NY/T 761-2008標(biāo)準(zhǔn)前處理操作過程中需要注意的問題

NY/T 761-2008 蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測(cè)定是農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布推薦的標(biāo)準(zhǔn)，共分為3 個(gè)部分，涵蓋105個(gè)檢測(cè)參數(shù)，是農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)中常用的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。該標(biāo)準(zhǔn)雖然前處理簡(jiǎn)單，但是操作過程一旦有誤，會(huì)出現(xiàn)回收率不穩(wěn)定、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差等現(xiàn)象。本文就前處理操作過程中需要注意的問題作以下總結(jié)。

一、標(biāo)準(zhǔn)溶液的購買和配置

要購買附有證書的標(biāo)準(zhǔn)品，純度在≥ 98 %以上；要正確使用移液槍，槍頭和稀釋標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸量管需要先潤(rùn)洗2～3 遍，每次都應(yīng)從最上面刻度起始點(diǎn)放下所需體積，先加入少量介質(zhì)至容量瓶，再加入標(biāo)準(zhǔn)品，最后定容。按照在儀器上的響應(yīng)值和保留時(shí)間配置農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，在-18 ℃以下的冰箱中儲(chǔ)存。標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配，放置一段時(shí)間濃度會(huì)有所改變，每次應(yīng)與之前的圖譜進(jìn)行比較，檢查峰面積是否有較大的變化。

二、樣品制備

樣品切碎，均勻混合，按照四分法縮份，一般不少于1 kg，放入勻漿機(jī)勻漿，留存2 份，每份不少于200 g，分裝于潔凈容器密封并標(biāo)識(shí)。樣品長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)不檢測(cè)分析，需要在低于-20 ℃條件下冷凍保存，解凍后立即分析。

三、天平的使用和樣品稱量

在使用1%電子天平前，先檢查天平是否水平正常，至少預(yù)熱30 min。試驗(yàn)過程中需要用的玻璃儀器用記號(hào)筆做好標(biāo)記，并認(rèn)真檢查離心管是否清晰，有無磨損，這個(gè)很重要，因?yàn)樽詈笠陔x心管里定容。后面用的移液管、燒杯都要完全干燥。稱量前檢查樣品狀態(tài)，充分混勻樣品，使用大一點(diǎn)的稱量勺可以減少樣品間差異，用廣口瓶大一點(diǎn)的開口可以有效避免樣品沾到容器壁上。氯化鈉加入多少由樣品的水分含量多少?zèng)Q定，水分少的加入5 g，水分多的加入7 g，稱量結(jié)束后按要求及時(shí)填寫天平的使用記錄。

四、提取

由于農(nóng)藥殘留分析試樣中農(nóng)藥含量很小，因此提取效率的高低就會(huì)直接影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。準(zhǔn)確加入50.0 mL 乙腈，如果使用瓶口分配器應(yīng)先排空氣。勻漿機(jī)使用前后依次用水—丙酮—水清洗，樣品在高速勻漿機(jī)上勻漿2 min，如果有質(zhì)控樣品，應(yīng)先勻漿空白樣品，最后勻漿質(zhì)控樣品。濾紙折疊好后，把兩層的部分撕去一角，這樣可以使濾紙和漏斗貼緊不易產(chǎn)生氣泡。過濾時(shí)要用玻璃棒引流，防止液體濺出來，如果直接傾倒，有可能液體飛濺出來導(dǎo)致溶質(zhì)減少，會(huì)給結(jié)果帶來誤差。一定要按照標(biāo)準(zhǔn)要求劇烈震蕩1 min，靜置30 min 以上。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)準(zhǔn)備計(jì)時(shí)器以確保準(zhǔn)確計(jì)時(shí)，使水相和乙腈相完全分開。

五、凈化

把移液管10.00 mL 先用少量上層乙腈提取液潤(rùn)洗3 遍，在準(zhǔn)確吸取10.00 mL 上層提取，移液管插入1～2 cm，放入燒杯并與燒杯壁成45°角，液面降至流液口處靜止后要等待15 s，再移走移液管。置水域加氮吹80 ℃蒸發(fā)近干，氮吹管不可以離液面太近，以防止污染，氣流量要控制得當(dāng)，因?yàn)橛袡C(jī)磷農(nóng)藥熱穩(wěn)定性差、易分解，切記不可蒸干。有機(jī)磷在近干狀態(tài)下水浴鍋取出，可以用洗耳球緩慢吹入干燥空氣。有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥需要過固相萃取柱，過SPE 柱是一個(gè)連續(xù)的過程，活化、淋洗、洗脫步驟都需要做好銜接。固相萃取是一個(gè)吸附解體的物理過程，速度太快和太慢對(duì)凈化效果都不是太好，一般流速控制在以液滴連續(xù)滴下但不成線為宜，即40～60 滴/min，絕不可出現(xiàn)“干柱現(xiàn)象”。只有注意到這些細(xì)節(jié)問題，才可以得到準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果。

六、原始記錄的填寫與結(jié)果計(jì)算

原始記錄必須做到真正原始，原始記錄一定要能反映現(xiàn)場(chǎng)狀態(tài)的全部信息，應(yīng)當(dāng)及時(shí)、準(zhǔn)確、完整、客觀，要能夠再現(xiàn)，具備重現(xiàn)性。首先，數(shù)字修約應(yīng)符合GB/T 8170-2008 數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示和判定；其次，計(jì)算按照標(biāo)準(zhǔn)要求結(jié)果保留兩位有效數(shù)字，當(dāng)結(jié)果＞1 mg/kg 時(shí)保留三位有效數(shù)字；再次，記錄如需更改要按照杠改加蓋章的原則，即在需要改動(dòng)數(shù)據(jù)上畫一橫杠，然后在橫杠右上方填寫更改的數(shù)據(jù)，并加蓋本人印章。原始圖譜主檢人簽字，原始記錄要三級(jí)審核簽字以確保相關(guān)信息和數(shù)據(jù)準(zhǔn)確無誤。

七、其他需要注意的事項(xiàng)

化驗(yàn)室新購買的試劑應(yīng)先做試劑空白，來確定試劑是否符合要求；進(jìn)行試驗(yàn)前要穿好防護(hù)服、佩戴好口罩和手套，有些重要步驟需要更換手套以防污染；移液槍使用后應(yīng)調(diào)到最大刻度并放到移液槍專用架子上。當(dāng)檢測(cè)結(jié)果在標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的臨界值附近或離散數(shù)據(jù)容易造成誤判時(shí)或檢測(cè)過程中發(fā)生異常情況（如停電、停水、儀器故障、環(huán)境變化等）有可能會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果時(shí)需要進(jìn)行復(fù)檢。