顯微鏡觀察血涂片之實驗改進

王 潔 閆 潔

（石河子大學生命科學學院 新疆石河子 832030）

血涂片標本的觀察是生物學七年級下冊“流動的組織——血液”的實驗內容。因為人血不易獲得，且經過瑞氏染液染色后顯微鏡視野下紅細胞數量約占血細胞數量98%，所以認識血細胞的形態結構以及不同種類的血細胞在血液中的含量的難度增加，消磨了學生的耐心和興趣，影響教學效果。因此，教師在進行“流動的組織——血液”的教學時，往往會安排學生用顯微鏡觀察人血的永久涂片或者采用iPad移動終端等現代信息技術向學生展示血細胞的結構。這種教學模式雖然大大提高了教學效率，但不利于培養學生的實驗操作和探究能力，與新課標倡導的核心素養背道而馳。因此，為了契合倡導的教育理念，筆者對該實驗材料和實驗操作進行了改進，顯著縮短了實驗教學的時間，使實驗更易觀察和實施。

1 材料和方法

1.1 實驗材料

（1）試劑：羊血、生理鹽水（質量分數為0.9%的NaCl溶液）、瑞氏染液。

（3）器材：載玻片、蓋玻片、普通光學顯微鏡。

1.2 實驗方法

（1）試劑配制（教師準備）：采集羊血血樣放于有抗凝劑（肝素）的試管內；配制瑞氏染液。

（2）血涂片的制作（學生操作）：用吸管吸取羊血血樣，滴取直徑約3 mm的血液分別于2片潔凈的載玻片上；將血膜均勻推開并自然晾干；一片載玻片滴加瑞氏染液使其能夠覆蓋血膜，蓋上蓋玻片觀察紅細胞形態；一片載玻片先滴加生理鹽水使其能充分覆蓋血膜；進而滴加適量瑞氏染液。使生理鹽水與瑞氏染液混合均勻，靜置10～15 min。用蒸餾水沖去染液，吸水紙吸干后鏡檢。

2 實驗操作注意事項

為了使血膜薄且連續，操作者在推片時可以先使蓋玻片與血滴有一定的距離，并使推片與載玻片呈約45°，進而漸漸地靠近血滴，輕輕觸及血滴并勻速推進，使血液沿載玻片端展開。

滴加生理鹽水后，靜止幾秒后就可以滴加瑞氏染液。若時間過長載玻片上的血膜容易脫落。此外，生理鹽水也可以由蒸餾水替代，但是實驗效果沒有滴加生理鹽水的效果好。

用蒸餾水沖洗染液時要注意沖洗的水流不能太大、太迅速，否則會將血膜破壞或沖洗干凈。

3 實驗結果及分析

3.1 實驗結果

因為NaCl溶液覆蓋血膜后，在血膜外形成了一層液態膜。所以瑞氏染液與紅細胞被液態膜阻隔，避免了紅細胞與瑞氏染液的直接接觸，而帶相對較多電荷的白細胞受影響較小。因此，未經染色的紅細胞顏色非常淺，呈現草綠色或淡黃色，只能隱約看見其輪廓。經過染色之后紅細胞呈兩面凹的橘紅色圓盤狀。嗜酸性白細胞胞質常被染成粉紅色，細胞核被染成紫紅色；嗜堿性白細胞胞質常被染成蘭紫色；嗜中性白細胞細胞質被染成淡紅色，細胞核為藍紫色；淋巴細胞核大圓形，染成紫藍色；單核細胞的顏色比淋巴細胞淡；血小板為不規則碎塊，有細小的紫蘭色顆粒。

3.2 實驗改進后的優勢

對于學生來說，實驗現象更易觀察，不必再花大量的時間和精力尋找顯微鏡視野下不同類型的血細胞，而是一目了然。這樣不僅縮短了實驗教學的時間，而且強化了學生實驗操作的耐心和實驗觀察探究的興趣。

對于教師來說，改進后的實驗材料——羊血更容易獲得，提高了實驗的可行性，也更易開展實驗教學培養學生的實驗探究能力。

3 總結

新方法在顯微鏡下觀察血涂片時，紅細胞顏色非常淺，呈現草綠色或淡黃色，紅細胞幾乎看不見，只能隱約看見其輪廓。而鋪在載玻片上的白細胞則染色比較好，與直接滴加瑞氏染液時沒有明顯的區別。因此，學生能夠快速找到不同類型的血細胞并對血細胞進行形態結構的觀察。該操作方法明顯降低了血細胞的分類時間，增強了學生實驗探究的興趣，提高了實驗教學的效率和可行性。