不同免疫檢驗方法檢測人類免疫缺陷病毒的可靠性

高瑜

云南中醫藥大學第二附屬醫院檢驗科 （云南昆明 650041 ）

艾滋病是一種由人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染引起的慢性傳染病，具有病死率高、傳染性強的特點。病毒感染后可逐漸破壞患者的免疫系統，使其受損甚至喪失，增加機體感染疾病的風險，嚴重威脅患者的生命安全，因此，及早的診斷干預十分重要。隨著診斷技術的快速發展，HIV 檢測已經發展為一種常規診斷檢測，且隨著第四代和第五代檢測技術的出現，解決了早期HIV 檢測的主要缺陷，陽性預測值顯著提升。目前，HIV 檢測已經可以在暴露后2周檢測到感染，且假陽性率較低[1-2]。本研究比較直接酶聯免疫吸附試驗（enzyme-linked immunosorbnent assay，ELISA） 法、金免疫層析試驗、間接ELISA 法檢測HIV 的可靠性，現報道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2019年6月我院收治的疑似HIV 感染患者50例作為研究對象，其中男24例，女26例；年齡26～48歲，平均（36.37±3.5）歲。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。

納入標準：（1）患者均知情同意本研究，且已簽署知情同意書；（2）全程參與研究，未中途退出或死亡；（3）均需經過臨床癥狀鑒定與病理學鑒定（免疫印跡法）；（4）無肢體障礙、嚴重內科疾病。排除標準：（1）存在精神障礙或心理疾病的患者；（2）存在認知障礙、言語障礙、肢體功能障礙的患者；（3）伴有心臟、腎臟功能異常的患者；（4）艾滋病重癥晚期且預期生存期低于12個月的患者；（5）惡性腫瘤患者；（6）存在嚴重代謝異常的患者。

1.2 方法

患者均采取直接ELISA 法、金免疫層析試驗、間接 ELISA 法進行檢測。

直接ELISA 法應用雙抗原夾心法進行檢測，試劑采用科華生物有限公司出產的試劑盒；間接ELISA 法試劑采用上海優選生物科技有限公司所生產的試劑。直接ELISA 法、間接 ELISA 法：將抽取的血清樣本置于離心機中作離心處理，離心速率為3 500 r/min，隨后將樣本置于3～8 ℃恒溫箱內保存，均采用FAME24/20自動化酶免分析儀（HAMILTON）在72 h 內完成檢測工作，試驗值≥Cut off 值為陽性，

金免疫層析試驗：采用滴管抽取采集的血清樣本，放于金免疫試紙中的sample 區（樣本區），靜置等候血清樣本完全浸透試紙，再等候10 s，隨后以肉眼觀測試紙的顏色變化，若試紙出現一條紅線則為陰性，兩條紅線則為陽性，觀測時間需>30 min，以免誤診、漏診。

1.3 臨床評價

以免疫印跡法的檢測結果作為金標準，比較3種方法的診斷靈敏度、特異度、準確度。

1.4 統計學處理

采用SPSS 22.0統計軟件進行數據分析，計數資料以率表示，采用F 檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 免疫印跡法檢測結果

免疫印跡法檢測結果顯示，50例患者中，38例陽性，12例陰性。

2.2 直接ELISA 法、金免疫層析試驗、間接 ELISA 法的檢測結果

3種檢測方法中，直接ELISA 法的診斷靈敏度、特異度、準確度更高，與其他方法比較，差異有統計學意義（P<0.05），見表1～4。

表1 直接ELISA 法的診斷結果（例）

表2 金免疫層析試驗的診斷結果（例）

表3 間接 ELISA 法的診斷結果（例）

表4 3種檢測方法的診斷結果比較（%）

3 討論

HIV 可誘發艾滋病，屬于極度危險的傳染性疾病。該病病程較長，致殘率、病死率較高，嚴重威脅患者的生命安全。HIV 可以攻擊人體的免疫系統，特異性攻擊淋巴細胞，使患者免疫功能喪失，誘發疾病。我國對艾滋病的普及力度逐年增強，但其知識普及度一般，大眾對艾滋病的了解尚淺[3]。

現階段，HIV 的常規檢驗方法為ELISA 法和金免疫層析試驗。其中，ELISA 法具有高效、快速、方便、準確度高等特點[4-5]。ELISA 法分為直接ELISA 法、間接ELISA 法。間接ELISA 法的應用范圍較窄，只能檢測IgG 水平，無法篩查微孔板上的抗體，因此靈敏度、特異度較低；此外，患者血清中HIV 抗體與細胞抗原、HIV 抗原與血清中逆轉錄病毒之間容易發生交叉反應，干擾間接ELISA 法的檢測準確度，導致假陽性率較高。而直接ELISA 法通常應用于HIV 的初篩階段，采用抗HIV 抗原（固相抗原）作為酶標記物，可雙重識別患者血清中的HIV 抗體，靈敏度、特異度均優于間接ELISA 法，且假陽性率低[6]。

本研究結果顯示，直接ELISA 法的診斷靈敏度、特異度、準確度顯著高于金免疫層析試驗、間接 ELISA 法。需要注意的是，在行直接ELISA 法檢測時，需嚴格管理血液樣本的采集程序，保障檢測的可靠性。

綜上所述，直接ELISA 法檢測HIV 的可靠性高于金免疫層析試驗、間接 ELISA 法。