310 例孕婦IgG 型抗體效價調查及與新生兒溶血病的相關性

林金美，肖文海，葉祖興，毛建玉，廖麗娟

福建醫科大學附屬三明第一醫院 （福建三明 365000）

新生兒溶血病（hemolytic disease of newborn，HDN）屬于臨床上較為常見的一種免疫性溶血性疾病，主要發生于胎兒及新生兒，母嬰血型不合是該病的重要病因，且多見于ABO 血型系統[1]。有研究結果顯示，當母嬰血型存在差異時，母親體內免疫系統的被動激活可導致胎兒紅細胞抗原的特異性抗體的產生，而該特異性抗體主要由IgG 型抗體組成[2]。IgG 型抗體是目前已知唯一可通過胎盤的免疫球蛋白，繼而可能進入胎兒的血液循環中，和紅細胞發生免疫性溶血反應，引起胎兒早產、新生兒貧血、肝脾腫大等，甚至引發嬰兒死亡[3]。產前檢查是目前臨床上用以預防及早期診斷HDN 的有效途徑，有利于臨床制定針對性干預措施，繼而達到改善嬰兒預后的目的。臨床上往往通過微柱凝膠法檢測孕婦體內的IgG 型抗體效價，從而預測ABO 系HDN[4]。該檢測方式具有操作簡便、快速、標本用量較少、靈敏度較高及特異性較強等優勢，且結果可進行較長時間的保存，目前已被廣泛應用于臨床孕婦早期抗體的檢測中[5]。本研究調查2016年2月至2018年12月我院收治的310例夫妻血型不合的O 型血孕婦的IgG 型抗體效價，分析其與HDN 的相關性，旨在為臨床HDN 的防治提供參考依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年2月至2018年12月我院收治的夫妻血型不合的O型血孕婦310例作為研究對象，年齡21～45歲，平均（28.45±5.23）歲；受教育程度，初中及以下112例，高中及以上198例；孕周26～40周，平均（35.62±4.22）周；家庭月收入，低于5 000元/月166例，5 000～10 000元/月93例，>10 000元/月51例。本研究經醫院醫學倫理委員會批準，孕婦及其家屬均自愿簽署知情同意書。

納入標準：（1）均為單胎妊娠；（2）年齡21～45歲；（3）既往無輸血史；（4）臨床病歷資料完整。排除標準：（1）合并肝、腎、肺等重要臟器及血液系統疾病的孕婦；（2）伴有嚴重感染性疾病、免疫系統疾病及惡性腫瘤的孕婦；（3）存在交流溝通障礙或伴有精神疾病的孕婦；（4）正參與其他研究的孕婦。

1.2 試劑與方法

1.2.1 試劑

微柱凝膠抗人球蛋白試劑卡購自吉林省長春博迅生物技術有限公司，產品批號為20161205、20171204等。ABO 標準紅細胞由我院自制獲取，主要由5人份以上正常人混合紅細胞制作而成，濃度為0.8%。2-Me 試劑購自長春博迅生物技術有限公司，產品批號為20170401、20170901等。

1.2.2 檢測方法

通過微柱凝膠法檢測孕婦的IgG 型抗體效價：將樣本血清采用2-Me 進行處理，測定IgG 抗體的特異性，并將存在特異性的IgG 抗體標本血清進行倍比稀釋處理，分別取50 μl 上述標本置入編碼的微柱凝膠抗人球蛋白試劑的柱管內，同時加入相對應的我院自制標準紅細胞50 μl，于37 ℃條件下孵育15 min、離心處理，最后判定結果。

采用HDN 血型血清學3項試驗診斷HDN：母嬰血型存在差異，新生兒紅細胞直抗試驗、紅細胞抗體釋放試驗及血清抗體游離試驗結果均顯示為陽性，即可診斷為HDN；紅細胞直抗試驗及紅細胞抗體釋放試驗中至少有1項結果顯示為陽性，并與臨床膽紅素水平結合，也可診斷HDN[6]。

1.3 臨床評價

分析夫妻血型與孕婦IgG 型抗體效價的關系，以及孕婦的IgG 型抗體效價與HDN 的相關性。

1.4 統計學處理

采用SPSS 20.0統計軟件進行數據分析，計數資料以率表示，采用χ2檢驗，等級資料采用秩和檢驗，多組間比較采用單因素方差分析， P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 夫妻血型與孕婦IgG 型抗體效價的關系

夫妻血型為A-O、B-O、AB-O 的孕婦的IgG 型抗體效價<64、64～127、128～255、256～511、≥512例數占比比較，差異無統計學意義（P>0.05），見表1。

表1 夫妻血型與孕婦IgG 型抗體效價的關系分析（例）

2.2 IgG 型抗體效價與HDN 的相關性

孕婦IgG 型抗體效價<64的新生兒均未發生HDN；A-O、B-O、AB-O 組HDN 發生率隨著孕婦IgG 型抗體效價水平的增高呈逐漸升高趨勢，各組間比較差異有統計學意義（P<0.05），見表2。

表2 IgG 型抗體效價與HDN 的相關性（%）

3 討論

HDN 主要是指發生于胎兒和新生兒早期，因母嬰血型差異導致的同族免疫性溶血[7-8]，臨床上主要包括ABO 血型系統及Rh 血型系統的溶血，以ABO 血型系統的溶血最為常見[9-11]。近年來，隨著相關研究的不斷深入，越來越多的學者提出HDN的發病機制為胎兒遺傳獲取A、B血型抗原，妊娠或分娩過程中上述抗原進入母親血液循環，從而刺激其產生對胎兒紅細胞抗原的特異性抗體，待抗體進入胎兒的血液循環后，可通過和胎兒紅細胞表面的A 或B 抗原特異性結合，導致胎兒的免疫系統被激活，從而引起胎兒或新生兒紅細胞的破壞溶解，可能引起不同程度的黃疸、水腫及貧血，病情嚴重時甚至可導致胎兒或新生兒死亡[12-14]。

本研究結果顯示，夫妻血型為A-O、B-O、AB-O 的孕婦的IgG 型抗體效價<64、64～127、128～255、256～511、≥512例數占比比較，差異無統計學意義（P>0.05）。李錦榮等[15]通過研究孕婦IgG 型抗體效價與HDN 的相關性發現，318例ABO 血型不合夫婦中，A-O、B-O、AB-O 分別占比49.7%、42.7%、7.5%；孕婦IgG 型抗體效價≥128的占比為48.1%，其中A-O、B-O、AB-O 組分別占比48.7%、48.5%、41.6%，差異無統計學意義（P>0.05）。本研究結果與其相似，表明不同血型組合中均可能發生HDN。分析原因為，血型不合的母嬰中，胎兒紅細胞通過胎盤進入母體血液循環中，多種組織細胞和體液中均存在A、B 血型物質，非特異性刺激與多次妊娠等均可能引起IgG 型抗體的形成。有研究結果顯示，孕婦IgG 型抗體效價的高低和胎兒受害程度密切相關，通過檢測孕婦血清中的IgG 型抗體水平，診斷及預防HDN，具有靈敏度、準確度較高的優勢[16-18]。本研究結果顯示，孕婦IgG 型抗體效價<64的新生兒均未發生HDN；A-O、B-O、AB-O 組HDN 發生率隨著孕婦IgG型抗體效價水平的增高呈逐漸升高趨勢，各組間比較差異有統計學意義（P<0.05）。這提示，孕婦IgG 型抗體效價與HDN 發生率成正相關，即隨著孕婦IgG 型抗體效價水平的不斷增高，HDN 發生率升高。其原因可能為，IgG 型抗體效價越高，通過胎盤的概率越大，繼而增加了HDN 的發生風險。有研究證實，孕婦IgG 型抗體效價的高低和胎兒受害程度密切相關，特別是當IgG 型抗體效價≥64時，胎兒紅細胞受到源自母體抗體破壞的風險更大，從而使得新生兒出現ABO-HDN 的概率更高[19-20]。另外，當孕婦IgG 型抗體效價≥64時，有新生兒未發生HDN，其原因可能與胎兒A、B 抗原強弱、血型物質的含量不同及胎盤屏障作用有關。因此，在臨床實際工作中，無法單獨依據孕婦IgG 型抗體效價≥64即確定胎兒必然會發生HDN，針對該類孕婦需定期監測其體內的IgG 型抗體效價，予以相應的治療措施，進一步降低HDN 的發生率。

綜上所述，孕婦IgG 型抗體效價與HDN 發生率成正相關，即隨著孕婦IgG 型抗體效價水平的逐漸增高，HDN 發生率升高。因此，夫妻ABO 血型不合的O 型血孕婦產前檢測IgG 型抗體效價，對預測HDN 的發生具有重要的意義。