莫志洋 李英 韓曉東 王虹霞 翁巧鳳
青海省人民醫院1頜面整形外科,2麻醉科(西寧810008);3青海大學附屬醫學院口腔科(西寧810001)
舌鱗狀細胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)是常見的口腔惡性腫瘤,發病率、病死率均較高[1-2]。上皮?間質轉化(epithelial mesenchymal transition,EMT)是腫瘤轉移、侵襲的起始步驟,與口腔鱗癌、喉癌、乳腺癌等惡性腫瘤發展過程密切相關[3-5]。淫羊藿次苷Ⅱ(icariside Ⅱ,ICSⅡ)是中藥淫羊藿主要提取物,可增強免疫功能、延緩衰老、調節骨代謝,抗腫瘤作用顯著。目前,臨床對ICS Ⅱ的探索多圍繞骨髓間充質干細胞成骨性分化、腫瘤細胞增殖等方面[6-7],鮮有關于其對TSCC EMT作用的研究。近年來有研究表明[8-9],Notch1/PTEN/FAK信號傳導途徑的異常激活是腫瘤形成機制之一,且參與調節多種組織細胞的生長、分化、凋亡,但關于該通路在TCSS EMT中的作用研究尚少。鑒于此,本研究將探討ICSⅡ對TSCC細胞EMT影響,并探究其通過Notch1/PTEN/FAK通路的調控機制。現報道如下。
1.1 材料
1.1.1 細胞TSCC細胞Tca?8113,購自中國醫學科學院腫瘤細胞庫。
1.1.2 藥物、主要試劑、主要儀器淫羊藿次苷Ⅱ(上海純優生物科技有限公司,純度>98%),胎牛血清、RPMI?1640培養基(美國Amresco公司),四氮唑鹽(microculture tetrozolium,MTT)溶液、二甲基亞砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)(美國Sigma公司),吉姆薩(Giemsa)染色液(南京億迅生物科技有限公司),BCA蛋白定量試劑盒(日本Takara公司),兔抗人Notch1、PTEN、FAK、磷酸化FAK(p?FAK)單抗(美國Abcam公司),辣根過氧化酶標記的二抗(上海合星生物科技有限公司)。
NIB900?FL型倒置熒光顯微鏡(德國Leica公司),SpectraMax iD3酶聯免疫檢測儀(美谷分子儀器(上海)有限公司),Transwell小室(北京優尼康生物科技有限公司),TY?80電泳儀(南京普陽科學儀器研究所),Fluor Chem FC2凝膠成像系統(美國Bio?rad公司)?!?br>