日糧不同蛋白質(zhì)水平對妊娠后期母豬繁殖性能、血清參數(shù)和初乳中氨基酸濃度的影響

俞清霞 董志巖 方桂友＊

（1.連江縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局長龍鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站 福建連江 350500；2.福建省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所 福州 350013）

環(huán)境氮污染問題與蛋白質(zhì)飼料資源緊缺是規(guī)模化養(yǎng)豬亟待解決的問題， 根據(jù)理想氨基酸模式應用低蛋白質(zhì)日糧已成為緩解這兩大問題行之有效的方法， 在商品肉豬中應用低蛋白氨基酸日糧已經(jīng)有較多報道[1-2]。 岳隆耀等報道斷乳仔豬日糧降低1 個蛋白點，能減少氮排泄量8.4%%[3]，Galassi 等報道肥育豬日糧蛋白質(zhì)降低1%，氮排泄量能降低8%[4]。 體內(nèi)氮源減量化可緩解豬場氮排泄物后處理的壓力，提高規(guī)模化豬場污染物處理的效率。 據(jù)海關統(tǒng)計，2017 年我國大豆進口量達9553 萬t，這種對進口飼料蛋白質(zhì)原料的高度依賴性導致蛋白質(zhì)原料的價格高居不下，無形中加重了生豬養(yǎng)殖成本。飼料中粗蛋白降低2 個百分點， 豆粕用量可減少約6 個百分點[5]。 應用低蛋白質(zhì)氨基酸平衡日糧可有效節(jié)約蛋白質(zhì)飼料資源[6]。 妊娠母豬的營養(yǎng)（能量和蛋白質(zhì)）影響著初生仔豬的生產(chǎn)性能、 母豬的繁殖性能與利用年限。 由于妊娠母豬胚胎生長、乳腺發(fā)育、自身營養(yǎng)代謝的復雜性等因素影響了飼糧氨基酸營養(yǎng)需要， 在妊娠后期應用低蛋白質(zhì)氨基酸平衡日糧對哺乳仔豬生長性能和初乳中氨基酸濃度的影響未見報道。 因此，本試驗根據(jù)Kim 等構建的妊娠后期母豬理想氨基酸模式[7]，添加合成氨基酸，探討不同蛋白質(zhì)水平對妊娠后期母豬繁殖性能、 血清生化指標和初乳成分的影響， 為低蛋白質(zhì)日糧在妊娠后期母豬的應用提供技術參考。

1 材料與方法

1.1 試驗設計 采用單因素試驗設計， 選擇體況、懷孕天數(shù)相近的3～7 胎次長大二元母豬60 頭，隨機分為4 個處理組， 每個處理組15 個重復，每個重復1 頭母豬。 4 個處理日糧CP 水平分別為12.0%、13.0%、14.0%、15.0%， 各處理組日糧可消化賴氨酸水平均為0.63%，試驗日糧參照NRC（2012）妊娠母豬的營養(yǎng)需要進行配制[8]，通過添加色氨酸、蛋氨酸、 蘇氨酸和賴氨酸保證4 個處理組飼料中可消化賴氨酸:可消化蘇氨酸:可消化蛋氨酸:可消化色氨酸的比值（100:72: 27:16）一致[7]，試驗日糧配方與營養(yǎng)水平見表1。

1.2 試驗管理 飼養(yǎng)試驗于2017 年9～11 月在福建優(yōu)康種豬科技開發(fā)有限公司進行。 供試母豬飼養(yǎng)在同一舍內(nèi)，配種后母豬個體單圈限位欄飼養(yǎng)，日喂2 次，自由飲水。 試驗母豬配種后75 d 飼料飼喂量為2.5 kg/d，預飼期5 d。 試驗母豬配種后80 d 試驗開始，配種后80 d 至分娩飼料飼喂量為2.5 kg/d。母豬產(chǎn)前5 d 轉(zhuǎn)入分娩舍。 母豬分娩后更換為統(tǒng)一的哺乳母豬料，母豬分娩當天不喂料，分娩第2 d 逐漸加料，至第5 d 自由采食。哺乳期仔豬7 日齡開始補料，自由飲水，哺乳仔豬第21 d 斷乳后留欄飼養(yǎng)。其他飼養(yǎng)管理均按優(yōu)康種豬場常規(guī)操作統(tǒng)一進行。

1.3 測定指標與測定方法

1.3.1 母豬的繁殖性能 分娩當天， 記錄各組母豬每窩的初生仔豬數(shù)、死胎、木乃伊和初生活仔數(shù)。 在仔豬出生后2 h 內(nèi)， 吃乳前稱量每頭初生仔豬個體重并計算初生窩重。分娩后21 d 稱量斷乳仔豬重量及記錄斷乳仔豬數(shù)量， 計算斷乳仔豬窩重和泌乳期窩增重。

1.3.2 母豬背膘厚 母豬妊娠第80 d、110 d 及斷乳當天，在左側(cè)最后肋骨處距離背中線6.5 cm 處用亞衛(wèi)8800 型背膘測定儀測定P2 點背膘，計算妊娠80～110 d 母豬背膘變化。

1.3.3 血液采集與測定指標 每組選擇5 頭母豬，于母豬懷孕100 d 上午8:30 喂料前，母豬耳緣靜脈采血約8 mL， 采血后室溫靜置30 min，5 000 r/min離心15 min，收集血清，樣品-20 ℃保存。 采用美國Beckman 公司全自動分析儀測定血清尿素氮。 采用ELISA 方法測定血清胰島素和雌二醇含量， 試劑盒購自上海朗頓生物技術有限公司。

1.3.4 乳汁采集與乳成分測定 在分娩當天， 每組隨機選擇5 頭母豬， 先在母豬耳靜脈注射20 IU 催產(chǎn)素，10 min 后分別從前、中、后3 個部位的乳頭采集乳汁約30 mL，樣品在-20 ℃保存待測。 乳汁氨基酸采用氨基酸自動分析儀 （德國曼默博爾氨基酸自動分析儀A3000）測定。

1.3.5 數(shù)據(jù)處理與分析 測定數(shù)據(jù)用Excel 軟件進行統(tǒng)計分析，以平均數(shù)±標準差表示，使用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析，差異顯著性用Duncan 法進行多重比較。

2 結果與分析

2.1 日糧不同蛋白質(zhì)水平對妊娠后期母豬背膘厚的影響 由表2 可知，各處理組之間妊娠80 d 背膘厚度、 妊娠110 d 背膘厚度和斷乳時背膘厚度差異均不顯著（P＞0.05），妊娠 80-110 d 背膘厚變化隨著蛋白質(zhì)水平的升高呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢，并且13.0% CP 組顯著高于 12.0% CP 組（P＜ 0.05），其余處理組之間差異均不顯著（P＞0.05）。

2.2 妊娠后期不同蛋白質(zhì)水平對母豬繁殖性能的影響 由表3 可以看出，各處理組之間的窩產(chǎn)仔數(shù)、窩產(chǎn)活仔數(shù)、 初生仔豬均重和斷乳仔豬數(shù)差異均不顯著 （P＞0.05）；13.0%CP 組的初生窩重比 12.0%CP組顯著增加7.43%（P＜0.05）， 其余處理組之間差異均不顯著 （P＞0.05）。 13.0%CP 組的斷乳窩重比12.0%CP 組顯著增加 8.36%（P＜0.05）。

2.3 日糧不同蛋白質(zhì)水平對妊娠后期母豬血清參數(shù)的影響 從表4 可知： 日糧蛋白質(zhì)水平對妊娠后期母豬血清尿素氮濃度有顯著影響（P＜0.05），低蛋白日糧組（12.0%CP、13.0%CP、14.0%CP）比 15.0%CP 組分 別降 低 15.53%、13.31%、5.80%（P＜0.05），12.0%CP 和 13.0%CP 組分別比 14.0%CP 組降低10.33%、7.97%（P＜0.05），12.0%CP 與 13.0%CP 組之間差異不顯著（P＞0.05）。 13.0%CP 組的血清胰島素濃度分別比 12.0%CP 組和 15.0%CP 組增加16.23%、12.86%（P＜0.05），其余各組之間差異不顯著（P＞0.05）。 日糧蛋白質(zhì)水平對妊娠后期母豬血清雌二醇濃度和催乳素濃度均無顯著影響（P＞0.05）。

表1 試驗日糧配方和營養(yǎng)水平

表2 不同蛋白質(zhì)水平對妊娠后期母豬背膘厚的影響

表3 妊娠后期不同蛋白質(zhì)水平對母豬繁殖性能的影響

2.4 妊娠后期不同蛋白質(zhì)水平對母豬初乳中氨基酸濃度的影響 從表5 可知：13.0%CP 組母豬初乳中賴氨酸、蘇氨酸、異亮氨酸、亮氨酸和總氨基酸濃度顯著高于 12.0%CP 組（P＜0.05），其余母豬初乳中氨基酸濃度各組間差異不顯著（P＞0.05）。

3 討 論

3.1 妊娠后期母豬日糧不同蛋白質(zhì)水平對母豬繁殖性能的影響 母豬的生產(chǎn)是規(guī)模化豬場的核心，母豬的繁殖性能是決定規(guī)模化豬場養(yǎng)殖效益的重要指標。 母豬的體能儲備對其繁殖潛能發(fā)揮起著重要的作用[9]，背膘厚度反映母豬在不同時期的體能儲備和營養(yǎng)狀況，可有效反映母豬的體況。張茂等發(fā)現(xiàn)長大二元母豬產(chǎn)前背膘厚在21～24 mm 時， 總產(chǎn)活仔數(shù)和初生窩重最高[10]。 Yang 等報道妊娠母豬日糧賴氨酸濃度由0.59%提高至0.82%可增加母豬體重和背膘厚[11]。 Cechova 等發(fā)現(xiàn)，增加母豬的背膘厚可提高母豬的繁殖性能[12]。董志巖等報道，泌乳母豬日糧蛋白質(zhì)水平從18%降低至16%、15%，對母豬泌乳期失重和仔豬斷乳窩增重無顯著影響[13]。 劉剛等研究表明，將泌乳母豬日糧蛋白質(zhì)水平進一步從18%降低至14%、則會降低泌乳母豬的生產(chǎn)性能[14]。由于妊娠母豬胚胎生長、 乳腺發(fā)育及自身營養(yǎng)代謝的復雜性， 日糧中不同蛋白質(zhì)水平對妊娠后期母豬繁殖性能影響的研究較少。本試驗結果顯示，妊娠后期母豬日糧不同蛋白質(zhì)水平對母豬的產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、初生仔豬均重、斷乳仔豬數(shù)、妊娠80 d 背膘厚度、妊娠110 d 背膘厚度和斷乳時背膘厚度無顯著影響，但13.0%CP 組的初生窩重、斷乳窩重和妊娠80～110 d背膘厚變化比12.0%CP 組顯著增加，可能與12.0%CP 組添加的合成氨基酸較多，而合成氨基酸的消化代謝較快， 使合成氨基酸于合成蛋白質(zhì)被利用之前被機體所氧化分解， 造成氨基酸供應相對不平衡有關[15]。 可見，日糧蛋白質(zhì)水平降低1～2 個百分點時，不影響妊娠后期母豬的繁殖性能， 若日糧蛋白質(zhì)水平降低過多， 可能會影響妊娠后期母豬的體況及之后的繁殖性能。

3.2 日糧不同蛋白質(zhì)水平對妊娠后期母豬血清參數(shù)的影響 血清尿素氮是動物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝的終產(chǎn)物，Brudevold 等研究發(fā)現(xiàn)可用其濃度來準確反映動物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝或氨基酸間的平衡狀況[16]。 當動物體內(nèi)氨基酸平衡良好時， 血清尿素氮含量出現(xiàn)下降[17]。因此，一般認為可通過血清尿素氮濃度來反映飼料蛋白質(zhì)的利用情況。本試驗結果表明，低蛋白日糧組（12.0%CP、13.0%CP、14.0%CP）的血清尿素氮濃度比15.0%CP 組分別顯著降低15.53%、13.31%、5.80%，12.0%CP 組和 13.0%CP 組分別比14.0%CP 組顯著降低 10.33%、7.97%。 高蛋白組（15.0%CP） 的血清尿素氮濃度顯著高于12.0%CP組、13.0%CP 組、14.0%CP 組， 可能的原因是高蛋白組日糧中存在較多不平衡的氨基酸， 較多的氨基酸被氧化代謝，使血清尿素氮濃度升高，導致氨基酸的利用率降低。

表4 日糧不同蛋白質(zhì)水平對妊娠后期母豬血清參數(shù)的影響

表5 妊娠后期不同蛋白質(zhì)水平對母豬初乳中氨基酸濃度的影響 mg/dL

Gill 等報道胰島素在調(diào)控營養(yǎng)代謝與繁殖功能方面起著重要作用[18]，Pettigrew 等研究發(fā)現(xiàn)可用血清胰島素含量來反映營養(yǎng)與繁殖的化學信號[19]。 管武太等報道日糧中氨基酸平衡良好能促進胰島素的分泌[20]，胰島素能通過調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的合成速度來促進蛋白質(zhì)沉積。 蔣亞東研究發(fā)現(xiàn)隨著日糧中賴氨酸濃度的提高， 血清胰島素濃度表現(xiàn)出先升高后降低的趨勢[21]。 本試驗結果顯示13.0%CP 組的血清胰島素濃度分別比12.0%CP 組和15.0%CP 組顯著增加16.23%、12.86%，可能的原因是高蛋白組（15.0%CP）日糧中存在較多不平衡的氨基酸，而12.0%CP 組添加的合成氨基酸較多所致，而13.0%CP 組的日糧氨基酸平衡性較好，促進了胰島素的分泌。

在乳腺發(fā)育過程中，催乳素由垂體前葉分泌，與乳腺上皮細胞中的受體結合，刺激乳腺生長發(fā)育，促進乳的合成與分泌并維持泌乳。 Farmer 等報道催乳素在調(diào)控乳蛋白表達方面也起著重要作用[22]。 蔣亞東等研究發(fā)現(xiàn)隨著日糧中賴氨酸濃度提高， 血清催乳素濃度表現(xiàn)出先升高后降低的趨勢[23]。本試驗中，13.0%CP 組的血清催乳素濃度比12.0%CP 組增加9.76%，由于組間標準差較大，所以差異不顯著。

3.3 妊娠后期母豬日糧不同蛋白質(zhì)水平對母豬初乳乳汁中氨基酸濃度的影響 母豬初乳的分泌受環(huán)境、母豬體況、代謝、營養(yǎng)等條件的影響。Famer 等研究發(fā)現(xiàn)妊娠期母豬的營養(yǎng)攝入狀況及體況會影響母豬泌乳早期的泌乳[24]。 Tokcah 等報道飼料中氨基酸含量影響母豬的產(chǎn)乳量和乳汁蛋白質(zhì)含量[25]。 Yang等試驗表明提高妊娠母豬賴氨酸攝入量， 增加初乳中乳蛋白的含量[10]。 飼料中氨基酸可能通過改變母豬體內(nèi)胰島素、 催乳素等相關激素的含量來影響母豬泌乳性能[26]。 在本試驗中，13.0%CP 組初乳中賴氨酸、蘇氨酸、異亮氨酸、亮氨酸和總氨基酸濃度顯著高于12.0%CP 組，可能與血清中胰島素的含量增加有關， 說明妊娠母豬飼料中過低的蛋白質(zhì)含量會影響初乳品質(zhì)。

4 結 論

本研究結果表明， 妊娠后期母豬采用可消化賴氨酸:可消化蘇氨酸:可消化蛋氨酸:可消化色氨酸=100:72:27:16 的氨基酸平衡模式配制日糧，日糧粗蛋白質(zhì)水平從15%降低1～2 個百分點，顯著降低妊娠母豬血清尿素氮濃度， 對妊娠后期母豬繁殖性能沒有顯著影響。 日糧粗蛋白質(zhì)水平進一步降低至12%時，減少妊娠80～110 d 背膘厚變化，降低初生窩重和斷乳窩重，顯著降低血清胰島素濃度，減少初乳中賴氨酸、蘇氨酸、異亮氨酸、亮氨酸和總氨基酸濃度。可見，在滿足主要必需氨基酸需求條件下，妊娠后期母豬日糧粗蛋白質(zhì)適宜水平為13%。