一例紫色色桿菌感染小熊貓的診治報告

修云芳 徐素慧 王隆柏 羅偉銘 何曉聰 周倫江＊ 曾顯成

（1.海峽（福州）大熊貓研究交流中心 福州 350003；2.福建省農業科學院畜牧獸醫研究所福州 350013；3.福建農林大學動物科學學院（蜂學學院） 福州 350002）

紫色色桿菌是一種在熱帶和亞熱帶地區的水與土壤中存在的革蘭氏陰性桿菌，是一種條件致病菌，最早發現于巴西亞馬孫河流域的黑河， 動物和人類均可感染， 但感染人類極少 （若感染后死亡率較高）[1-2]。 小熊貓主要生活在喜馬拉雅山的山地針闊混交林和中國西南部海拔2 000～4 000 m 山脈中。近年來隨著人類活動的干擾，生存環境喪失、棲息地破碎化嚴重威脅著小熊貓的生存。 圈養條件下小熊貓壽命可達10～13 歲，傳染病是圈養小熊貓種群的最大威脅，防治措施不得當可能會導致群體死亡。

2009 年7 月，福州大熊貓研究中心發現有3 只小熊貓感染了紫色色桿菌無色變種， 出現以呼吸衰竭為特征的主要臨床癥狀， 病死率為100%[3]。2020 年7 月以來該中心陸續出現6 只小熊貓急性死亡，分析其發病情況、臨床癥狀和病理變化，并經實驗室檢測和藥敏試驗， 初步診斷為小熊貓感染紫色色桿菌。 通過采取緊急防治措施， 疫情獲得有效控制。 現將診治結果報告如下。

1 發病情況

福州大熊貓研究中心于1994 年引進小熊貓，存欄數量達20 只。2019 年因小熊貓館改造搬遷，小熊貓暫時放在臨時過渡園（原蝴蝶園）飼養。 相比于原來的場館，臨時過渡園環境較差，自2020 年7 月9日起，突然發現6 只小熊貓發熱、被毛松亂、精神沉郁、采食量下降，用頭孢哌酮鈉、頭孢拉定、氨芐青霉素治療未見效，1～2 d 后死亡。

2 臨床癥狀

發病小熊貓主要表現為精神萎頓， 食欲減退或廢絕， 體溫升高 (38.2 ℃)， 呼吸困難； 其中編號1460 號與1152 號有外傷、后肢癱瘓，眼臉腫脹，鼻腔流出紅色液體；932 號與1151 號均出現后肢癱瘓，未發現外傷；1615 號為妊娠母貓，未發現外傷；928 號在發病前右后掌曾感染真菌，皮膚潰瘍，傷口處理愈合時間較長，17 d 后也發現類似主要癥狀。

3 病理變化

小熊貓氣管積泡沫、心包積液；肝臟有散在粟粒狀白色壞死灶；腹腔內有少量澄清、半透明液體，混有少量絮狀纖維蛋白； 胸腔有少量積液， 肺淤血。1115 號小熊貓脾臟出現壞死灶，其余個體脾臟未見異常。

4 實驗室診斷

4.1 細菌分離 取氣管、脾臟、肺臟和心包液，接種于血平板，放置37 ℃培養24 h，發現接種氣管積液的血平板長出藍黑色、圓形、中等大小、形態一致的光滑型菌落（見圖1）。 取單個菌落涂玻片進行革蘭氏染色、鏡檢，可見兩端鈍圓、革蘭氏陰性的紫色球桿菌（見圖 2）。

圖1 在血平板上培養的黑色菌落

4.2 PCR 檢測 設計合成引物[3]，提取細菌的DNA，進行PCR 擴增， 結果獲得約750 bp 大小的基因片段，與預期片段大小相符。 片段經測序比對分析，與NCBI 發布的紫色色桿菌的基因序列相符。

圖2 革蘭氏染色鏡檢

4.3 藥敏試驗 將分離的紫色細菌進行藥敏試驗，結果發現該細菌對氧氟沙星、 對氟苯尼考、 萬古霉素、利奈唑胺、阿奇霉素、紅霉素、氧氟沙星、亞氨培南、慶大霉素、環丙沙星敏感；對替加環素、利福平、阿莫西林、頭孢噻肟、呋喃妥因、頭孢哌酮鈉、阿米卡星中度敏感；對多西環素、多粘菌素、磺胺甲惡唑、青霉素、恩若沙星不敏感。

綜上，通過發病情況、臨床癥狀、病理變化和實驗室診斷，診斷為小熊貓感染了紫色色桿菌。

5 防治措施

5.1 預防 隔離患獸， 禁止飼養用具交叉使用；嚴格消毒， 將獸舍內一不流動水池硬化處理， 清除積水，進行全面環境消毒，連續1 周采用火焰消毒或者含氯消毒劑輪流消毒， 每天1 次； 全面排查環境安全，對獸舍、鐵網、門窗、棲架、睡床、產箱等可能引起小熊貓受傷的部位進行軟化處理。加強飼養管理，適當分群，減少群體數量；發現愛打架個體，對其單獨飼養，減少因群體打斗導致外傷；飼養員加強觀察，發現打斗要及時處理，做到早發現早治療。

5.2 治療 對患病小熊貓的傷口進行及時徹底消毒，依據傷口情況化膿瘡用雙氧水處理，新鮮創口用碘伏消毒，生理鹽水沖洗干凈后，涂黃金散、復方爐甘石散或茶樹油蘆薈膏。根據藥敏試驗結果，選擇有效抗菌藥物治療，參考個體敏感情況，可用保定籠靜脈注射氧氟沙星或氟苯尼考。 因患病小熊貓血清白蛋白低，采取補充人血白蛋白一次（2.5 g），對出現轉氨酶升高的小熊貓個體，靜脈注射氨基酸50 mL、維生素 C 250 mg、輔酶 A 30 UI，ATP 10 mg。

該中心通過采取以上綜合防控措施， 疫情最終得到有效控制。

6 分析與討論

紫色色桿菌， 是熱帶與亞熱帶地區環境中存在的條件致病菌，為革蘭氏陰性、兼性厭氧及無芽孢的球桿菌。 動物或人類的免疫力低下或免疫缺陷是感染該菌的誘因[4]。 Soares R L 等報道紫色色桿菌感染4 日齡小母牛主要表現為關節炎引起臥地不起、前葡萄膜炎引起失明、全身多臟器膿腫及敗血癥。小牛因母牛棄養， 未食初乳導致免疫力低下是發病誘因[5]。

紫色色桿菌感染小熊貓報道最早見于1998 年美國北達科他州動物園，解剖可見肩胛骨肌肉、淋巴結、肺膿腫；病理組織學觀察發現肝、肺、淋巴結及脾壞死[6]。 在國內最初報道病例為2009 年福州大熊貓研究中心，3 只小熊貓主要臨床癥狀為呼吸衰竭，病死率100%， 從肺與氣管分泌物分離的細菌經鑒定為紫色色桿菌無色變種[3]。 11 年后福州大熊貓研究中心再次發生小熊貓群體感染紫色色桿菌， 病變以肝臟膿腫為主，從心血、肝臟、肺臟、脾臟都分離到細菌。 2 個菌株引起小熊貓臨床癥狀及解剖病變有所不同，在血平板上的培養特性也不同，此次血平板培養出菌落為中等大小、濕潤的紫黑色球桿菌，未出現溶血現象， 而在2009 年分離的菌落為變種的白色菌，能導致溶血現象。

2009 年和2020 年福州大熊貓研究中心兩次發生小熊貓感染紫色色桿菌的病例， 均發生于較為炎熱的7 月。 該次小熊貓感染紫色色桿菌， 并導致發病、 死亡。 后經調查， 主要原因可能是該中心從2020 年初對動物園的獸舍進行升級改造，小熊貓臨時住所離改造獸舍不足百米，環境嗓音、氣味對其造成很大應激，群體免疫力都有所下降；另外，發生了群體打斗導致外傷，發現處理不及時，且運動場內有一處水池，長期蓄存不流動污水，污水中的紫色色桿菌感染傷口，導致該病流行暴發。

至于該次疫情所分離到的紫色色桿菌的其他生物學特性，以及與2009 年分離菌株的異同點，有待今后進一步研究。