實時熒光定量PCR在食品致病菌檢測中的應用

古麗米娜

（新疆塔城地區疾病預防控制中心，新疆 塔城 834700）

傳統的檢測方法通常需要培養病原體才能開始檢測。且比較昂貴，緩慢且效率低下，并且難以滿足現代食品安全測試的要求。PCR技術檢測方法能夠快速，準確地發現各種致病菌，具有快速、準確、靈活、有效的優點，目前已廣泛應用于食品致病菌檢測領域。

1 基本資料

1.1 PCR技術簡介 PCR技術是美國科學家于1985年創建的一種體外酶促合成技術，用于快速生長特定的DNA片段。與通過培養皿檢測微生物的傳統方法相比，可以快速檢測特定的微生物。PCR技術的最大優勢是能夠快速發現不同種類的微生物，并且具有快速而靈活的特應性優勢。因此，PCR技術在各種致病菌檢測中起著越來越重要的作用[1]。食源性致病菌的檢測是PCR技術在食品安全性測試中的重點。盡管PCR技術在該領域使用的時間較短，但近年來已逐漸得到推廣，進展非常迅速。現在利用這一技術可以檢測到大多數致病菌。傳統的細菌分離培養方法在檢測病原細菌方面效率較低，準確性較低，而PCR技術很好彌補了這些缺點。現在，PCR技術已經成為檢測食源性致病菌的最重要方法。經過相應的開發之后，可以生產14-16種食源性致病菌PCR檢測試劑盒。

1.2 技術優勢 傳統的檢測方法需要培養各種致病菌。該過程需要大量的人力和物力，操作非常繁瑣，并且各種微生物的生長環境所需的pH，溫度和營養培養基都不相同。在檢測過程中，需要花費幾天的培養時間，在鑒定過程中必須仔細觀察細胞特征和革蘭氏染色，并鑒定其生物學特征。而區分每種微生物是一個困難的過程，尤其是對于不穩定的菌株而言，更難以發現。因此，與傳統的檢測方法相比，PCR技術具有以下2個優點。

1.2.1 方便 與傳統方法相比，PCR技術中使用的設施和設備操作更簡單，整個過程更加便捷。

1.2.2 快速 傳統的檢測方法需要培養數天的樣品，導致效率較為低下。PCR技術可以快速產生檢測結果，可以更好地應用于工業生產。

1.3 方法 分析實時熒光定量PCR在常見食品致病菌的檢測效果。

2 結果

2.1 在金黃色葡萄球菌檢測中的應用 該致病菌突變后，就會很難去除相對較大的金黃色葡萄球菌。在大多數情況下，普通農藥殘留很難完全清除。如果使用過量的農藥，將存在農藥殘留，直接影響人類的身體健康。因此有必要仔細檢查水果和蔬菜中的金黃色葡萄球菌，以有效去除金黃色葡萄球菌的存在。金黃色葡萄球菌可以在水果和蔬菜中繁殖，并產生對人體有害的SE型毒素。這種毒素在進食時會引起直接食物中毒，PCR可用于明確檢測這一致病菌。在大多數情況下，通過PCR技術都能準確檢測出金黃色葡萄球菌的實際含量，可檢測出±1 pg的金黃色葡萄球菌，保證了總體檢測結果準確，符合實際情況[2]。

2.2 在綠膿桿菌檢測中的應用 在我們目前食用的食物中，還有著綠膿桿菌這一種對人體極為有害的微生物。食物中綠膿桿菌的長期存在會對人體造成極大傷害。PCR技術可用于擴增食品和藥品的基因序列，并可快速檢測食品中是否含有綠膿桿菌。同時，這一技術還可以通過檢測食品中的毒素基因來確定其是否存在綠膿桿菌。一旦產生了毒素，毒素A基因就是綠膿桿菌獨特的基因，并且可以通過該基因進行有效判斷。無論食物中是否含有綠膿桿菌，該方法都大大改善了對食物中是否含有綠膿桿菌的檢查準確性。

2.3 在大腸桿菌檢測中的應用 大腸桿菌是食物中最常見的微生物之一，也是最知名的微生物之一。但是這種微生物對人體非常有害。如果使用傳統的食品檢測方法，則難以準確地檢測食品中所含大腸桿菌的準確值。需要意識到大腸桿菌和其他微生物是不同的，并且繁殖能力非常快。一旦未準確檢測出大腸桿菌的值，則在一段時間后，大腸桿菌的值將呈指數增長。通過PCR技術，可以對食品中的大腸桿菌進行多重篩選，并且發現了毒素的序列基因。從而迅速發現大腸桿菌的基因序列，以確保通過PCR技術獲得的大腸桿菌值是最準確的。

2.4 在沙氏門菌檢測中的應用 在大多數情況下，沙門氏菌含量過多會導致腸道感染，而沙門氏菌感染如果不接受及時治療就會危及生命。傳統的食品檢測技術很難快速檢測食品中存在的外源DNA。然而PCR技術的使用則有所不同，PCR技術自身的靈敏度相對較高，可以快速檢測出各種食品中可能存在的沙門氏菌，減少了因檢測失誤引起錯誤。但是，還應該注意的是，使用PCR檢測技術時仍然存在錯誤的可能性。為此，沙門氏菌的檢測還需要進一步的優化和改進，以確保PCR技術能夠真正精準檢測沙門氏菌的數量，確保人們的生命安全。

3 結束語

綜上所述，實時熒光定量PCR在檢測食物致病菌的應用中有著非常優秀的效果，對于常見的沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌等多種致病菌都有著較為有效地檢測結果，應在疾病防控的實踐中推廣并進一步發展這一檢測方法。