五種腫瘤標志物分析靈敏度的建立

高虹，陳中唐

（江蘇省寶應縣中醫院檢驗科，江蘇 揚州 225800）

腫瘤標志物能夠在很大程度上對腫瘤的發生、發展起到反映作用，還能夠對治療反應進行監測[1]。本次研究對五種常見的腫瘤標志物的分析靈敏度進行建立，具體內容如下。

1 材料和方法

1.1 試劑盒 本次實驗的試劑盒均由深圳市新產業生物醫學工程股份有限公司所提供。

1.2 儀器 本次實驗所涉及的儀器為：MAGLUM4000新產業發光儀。

1.3 樣品 將五種試劑盒內的校準品作為原始樣品，均以“0”校準品進行稀釋，以稀釋后得到的低濃度校準品作為本次實驗的樣品。

1.4 方法

1.4.1 實驗方法 根據各類試劑盒說明書，通過化學發光法進行測定。

1.4.2 樣品測定 嚴格按照說明書進行操作實驗，所有標志物均接受8 d發光強度的測定，并計算出各標志物的標準差與均值。

1.4.3 確定LLD 計算出“0”校準品的均值，再加上3倍的發光強度標準差后，確定實際LLD。分析靈敏度需選取99.7%的可能性限值。

1.4.4 確定BLD 通過LLD加上3倍檢測低限樣品標準差的方法，對分析物最低濃度。計算不同濃度下發光強度均值，再減去3倍標準差發光強度，仍接近LLD值則為實際BLD。

1.4.5 確定FS 對各類腫瘤標志物發光強度均值進行測定，使其減去“0”校準品發光強度均值，如CV接近20%則可確定不同濃度的FS。

2 結果

2.1 CA242檢測限樣品發光強度 經過測定后，其中CA242的BLD為：1.17 U/mL。CA242分別為11.27、11.66、11.04、9.63、11.8、10.15、10.87、9.87 U/mL時，發光強度分別為40112、41288、36649、35100、42442、36878、33997、27944。

2.2 CA724檢測限樣品發光強度 經過測定后，CA724的BLD為：6 U/mL。CA724分別為48.37、48.73、54.91、52.9、50.96、52.07、532.64、57.23 U/mL時，發光強度分別為68525、66549、82123、79716、76180、70772、71390、76325。

2.3 AFP檢測限樣品發光強度 經過測定后，AFP的BLD為1.25 μg/L。AFP分別為47.04、53.61、42.82、50.93、60.26、54.51、49.29、54.62 U/mL時，發光強度分別為235924、234764、227110、264035、306503、258835、236834、259313。

2.4 NSE檢測限樣品發光強度 經過測定后，NSE的BLD為9 μg/L。NSE分別為46.91、44.36、47.09、41.08、42.9、42.23、41.24、43.02 U/mL時，發光強度分別為1695551、161085、173955、53504、159702、157414、150623、156618。

2.5 SCC-Ag檢測限樣品發光強度 經過測定后，SCC-Ag的BLD為1.2 μg/L。SCC-Ag分別為10.52、11.84、10.03、9.898、11.59、10.62、9.81、10.83 U/mL時，發光強度分別為52431、58136、65332、64589、73689、68354、63819、69513。

3 討論

腫瘤標志物具體指的就是于惡性腫瘤細胞內存在特征性，或者由惡性腫瘤細胞的異常變化所形成的物質，或者由宿主通過刺激腫瘤所形成的物質[2]。腫瘤標志物檢測能夠對臨床診斷及治療提供有效幫助，對各類腫瘤標志物分析靈敏度的建立，具有一定臨床價值[3]。

根據本次研究發現，上述5種腫瘤標志物LLD的實際測定結果與廠商說明書存在一定差異性。在實際應用中，對腫瘤標志物的陰性與陽性檢測報告仍然以廠商說明書為標準；如出現差異性，則可以本次實驗結果作為參考標準。

根據對定量檢測限報告結果的建立，可發現：①結果低于LLD則可判定其為陰性；②根據LLD及定量檢測限間結果可發現：腫瘤標志物的檢出情況，與定量之間無實際差異性。

綜上所述，通過對五種腫瘤標志物分析靈敏度的建立能夠報告低限，能夠對腫瘤患者的標志物檢測結果提供幫助，均具備一定的臨床價值。