屏障設施內實驗動物感染風險分析與應對措施

曾 暉，林 玲，馬 馳，袁粒星，何 賢

（四川大學華西第二醫院科技部出生缺陷與相關婦兒疾病教育部重點實驗室，四川 成都 610041）

隨著醫學和生物學的快速發展，動物實驗涉及細分的科研領域也更加廣泛，如新藥測試、疾病模型建立、腫瘤研究和遺傳學研究等[1-2]。為了保證動物實驗的準確性和有效性，各科研單位開始廣泛使用無特定病原體SPF(Specific Pathogen Free,SPF)實驗動物，并為SPF實驗動物配置屏障設施，對人、實驗動物、飼料、飲水、墊料、空氣及其他物品都要進行嚴格的微生物控制[3]。

然而，屏障設施內飼養的SPF級實驗動物存在被微生物污染的可能，管理者應當從硬件設施、實驗人員及實驗動物方面入手進行微生物控制。我們在日常管理工作中發現，當硬件設施穩定運行時，控制動物中心的生物安全風險在于監管入室動物和規范人員操作。本文從實驗動物管理和人員管理兩方面入手，分析討論了微生物感染途徑，并通過實施相應的管理措施降低實驗動物感染風險。

1 實驗動物管理常見的生物安全風險

1.1 使用來源復雜的實驗動物

由于國內實驗動物生產單位環境條件參差不齊，即使有實驗動物生產許可證，也存在售賣實驗動物微生物等級不一致的現象。同時，在運輸途中如果動物運輸箱破損，也會導致實驗動物微生物等級不合格[4]。另外，未經檢測直接接收從其他動物中心轉入的實驗動物，同樣存在生物污染風險。如果屏障設施接收了這類動物，就存在被病原微生物感染已飼養動物的風險。一旦入室的實驗動物攜帶人獸共患病和烈性動物傳染病的病原微生物，極易造成生物安全事故。

1.2 實驗人員操作不規范

學生在屏障設施內做動物實驗時，普遍缺乏規范化操作意識，表現為不戴手套、不戴口罩、半敞開隔離服、攜帶未消毒的手機進入潔凈區，以及人員和物品違規從緩沖區返回潔凈區，進出房間沒有隨手關門導致房間壓差異常等。

當實驗人員攜帶微生物病原體時，這些違規操作行為容易導致病原微生物感染動物實驗員。

1.3 屏障設施內檢測出病原體

按照實驗動物微生物學控制要求，應當定期對哨兵鼠進行檢疫，排除人獸共患病的病原體和烈性動物傳染病的病原體。實驗動物高密度規模化集中飼養的現象非常普遍，一旦外來傳染性強的病原微生物侵入飼養間，交叉感染現象會很快發生，動物疫情將以極快速度暴發。

2 實驗動物安全問題解決對策

2.1 采取嚴格的動物準入制度

實行嚴格的準入制度，拒絕接收無實驗動物質量合格證的動物。新購的動物實行廠家白名單管理制度，定期送檢生產廠家的實驗動物并做記錄，篩選出實際微生物等級達標的實驗動物生產廠家并建立白名單，拒絕接收白名單以外生產廠家的實驗動物。實驗動物送達時，要及時檢查外包裝，尤其要嚴格查看通氣膜的完整情況，拒絕接收運輸箱外包裝破損的實驗動物。如果準備接收其他動物中心的動物，必須抽檢該批動物。當出現微生物等級不達標的情況時，應當首先對該批動物做凈化處理，再將凈化成功的子代轉入。

2.2 規范動物實驗操作

通過實驗人員入室培訓及考試，可初步建立實驗人員基本的微生物控制規范操作意識。在培訓中必須明確指出進入動物中心的實驗人員和實驗動物是潛在傳染源，只有同時規范實驗人員操作和控制實驗動物微生物學等級才能避免生物安全問題產生。

針對屏障系統內實驗人員出現違規操作，如不正確穿戴防護服、不按規定流向進入飼養間以及攜帶違規物品等情況，一經發現，立即在管理群內通報批評，并責令違規人員整改并寫情況說明，由該課題組負責人簽字后交由動物中心管理人員備案。嚴格執行監察管理制度可杜絕違規情況發生，能夠有效避免實驗人員把病原微生物帶入飼養區。

2.3 已出現微生物污染的處理方案

當屏障系統內飼養間的哨兵鼠檢測出無特定病原體動物規定以外的病原時，首先應當及時對該房間隔離，并排查該房間與周圍房間的動物進出情況。其次是通過動物送檢確定該病原體的感染范圍，對確定污染的房間進行徹底消毒，并全部淘汰該房間內的實驗動物。淘汰的動物尸體及一般廢棄物應當按照規范存放在專用冰箱，交由無害化處置單位進行動物尸體回收處理，避免造成二次污染。

3 結束語

屏障設施的新風系統在正常運行的情況下，病原感染設施內動物的途徑主要有兩條：一條是通過入室動物攜帶病原進入屏障系統，另一條是通過實驗人員攜帶病原進入屏障系統。通過嚴格控制這兩條傳播途徑，可以有效降低病原的傳播風險，從而保障屏障設施內實驗動物的微生物等級。