大組織切片技術在前列腺癌診斷中的應用

宋彥錕 羅 勝

福建醫科大學附屬第一醫院病理科，福建省福州市 350005

前列腺癌是男性常見泌尿生殖系惡性腫瘤，術后病理檢查是疾病診斷重要方法。但是，前列腺癌腫塊常為多灶性，離體后外觀形狀與增生前列腺相似，加之術前內分泌治療組織退變，辨認困難，因此，如何處理根治標本成為病理醫師一項巨大挑戰[1]。為判斷手術切除癌灶干凈與否，前列腺癌術后病理通常取材整個前列腺，但由于包埋盒規格等設備限制，常規標本處理需將前列腺分割成數十小組織塊，會破壞標本完整性，不僅后期制片煩瑣，也易造成拼接誤差，影響閱片質量[2]。大組織切片技術是近年應用于臨床的標本處理新技術，為大標本處理、病灶全面觀察及綜合評價提供了極大便利[3]。本文選取2018年1月—2020年1月我院126例前列腺癌根治患者，探討大組織切片技術診斷前列腺癌的臨床價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 擇取2018年1月—2020年1月我院收治126例前列腺癌患者，隨機分為兩組。兩組基線資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。

1.2 納入與排除 納入標準：術前穿刺活檢、術后病理檢查證實前列腺腺癌；初治病例，接受前列腺癌根治手術；患者簽署知情同意書；臨床及病理資料齊全；倫理委員會批準同意。排除標準：前列腺癌遠端轉移；既往前列腺手術史；根治術前行新輔助內分泌治療；合并其他前列腺器質性病變。

表1 兩組基線資料比較

1.3 方法

1.3.1 實驗組(大組織切片病理檢查)：手術獲取新鮮、完整的前列腺標本，即刻送檢病理科。標本置于取材臺(精囊腺朝上，尖部尿道口面向醫師)，以紅黑顏色的特殊染料進行色標染色，標記前列腺左右兩側(左紅右黑)。待自然吹干后，4%中性甲醛溶液固定12h以上。次日取出標本，以取材刀離斷精囊腺，由前列腺尖部至基底部沿垂直尿道方向做冠狀切面，切成厚度3～4mm的組織片，數量6～8塊，依次標號，平鋪于5cm×7cm大組織網狀包埋盒內，以鏤空板條固定，再次置于甲醛溶液中固定12h以上，使標本中央組織充分固定。次日取出標本，乙醇梯度脫水，二甲苯透明，高密度石蠟浸漬，操作于全封閉組織脫水機中自動進行，試劑溫度45℃，石蠟溫度65℃。采用二次包埋法將組織片制成大蠟塊，一般切片與精囊腺最大切面包埋，前列腺尖部和底部切緣垂直包埋。常規整修蠟塊并鑲裝，石蠟大組織切片機連續勻速平推切片，切片厚度5μm。切片置于定制的大規格載玻片上，常規漂洗、HE染色、封片后，行數字病理掃描。

1.3.2 對照組(常規組織切片病理檢查)：手術獲取新鮮、完整的前列腺標本，即刻送檢病理科。標本切片前常規處理同實驗組，甲醛溶液充分固定后，離斷精囊腺，切取前列腺尖部和底部，切取厚度2～3mm，余體部左右側分開，依次切成體積不超過15mm×10mm×5mm的組織塊，數量40～60塊。取前列腺尖部和底部切緣、精囊腺、輸尿管以及穿刺定位的病灶組織塊，依次標號，置于普通包埋盒內，同實驗組方法對包埋組織塊進行連續切片，切片置于一般規格載玻片上，同法處理后行數字病理掃描。

1.4 觀察指標與評價標準 比較觀察兩組病理診斷結果，統計切緣陽性率、微小病灶檢出率、原發腫瘤病理分期、精囊侵犯率、局域淋巴結轉移率、術后GS評分升高者占比。腫瘤分期參照AJCC 2002版標準[4]。前列腺癌GS評分標準[5]：依據腫瘤分化程度將前列腺癌分為1(分化好，惡性程度低)～5(分化差，惡性程度高)級，分別記1～5分，將所占比例最高的癌灶分化分數作為主要結構評分，與次要結構評分相加作為總分，單一分化時分數重疊相加，三種及以上分化時，將占比小但評分為最高級別的腫瘤分化分數作為次要結構評分，評分范圍2～10分，8分級以上為高危。

2 結果

實驗組標本切緣陽性率高于對照組，微小病灶檢出率高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，組間精囊侵犯率、淋巴結轉移率、術后GS升高占比無統計學差異(P>0.05)，見表2。兩組TNM病理分期無統計學差異(P>0.05)，見表3。

表2 兩組病理診斷結果比較[n(%)]

表3 兩組TNM病理分期比較[n(%)]

3 討論

傳統前列腺癌根治標本病理檢查，需將前列腺切成細碎小塊，依據前列腺大小一般為40～60塊，甚至更多[6]。此法臨床處理十分煩瑣，技術員制片與病理醫師閱片工作量大，而且前列腺完整性遭破壞嚴重，小切片拼接易產生誤差，增加了觀察難度，不利于病理醫師全面細致評價，影響診斷質量[7]。

大組織切片技術可以獲得與常規組織切片技術相當的制片質量，研究證實厚度與染色均理想[8]。但與常規組織切片相比，大組織切片，制片數量減少，可以減少制片與閱片的工作量，從而提高病理診斷工作效率，更具實用價值[9]，而且單個切片切面積增大，相對保證了標本完整性，病理醫師可于鏡下直觀觀察標本橫斷全貌，便于準確定位空間分布，明確前列腺組織結構與細胞學特征，發現微小病灶，精確病理診斷，以及與術前診斷進行對照等，從而提高診斷效果[9]。對于前列腺癌患者而言，即使是行根治手術，患者術后仍有復發的風險和可能，其主要原因在于，術前檢測前列腺癌浸潤程度及有無轉移，主要依靠影像學技術與穿刺活檢，靈敏度均有限，據此術前判斷沒有轉移的前列腺癌，可能已經出現了微轉移。以大組織切片技術觀察前列腺標本尖部與底部切緣等處，明確有無包膜外侵犯、精囊外侵犯等，鏡下影像更完整、更全面，可以有效避免稀碎組織切片拼接影響微小病灶觀察與檢出，從而更準確地判斷手術切除后有無癌灶殘留，為指導后續治療提供更有價值的依據。

本文結果顯示，實驗組標本切緣陽性率、微小病灶檢出率均高于對照組，與文獻報道大組織切片技術處理后前列腺標本的切緣陽性率46.7%、微小病灶率36.7%相符[10-11]，肯定了大組織切片技術用于前列腺癌臨床診斷的價值與優勢。另有學者比較觀察病理大切片與常規切片診斷前列腺癌，結果顯示前者精囊侵犯陽性檢出率(26.2%)高于后者(17.6%)[12]，與本文實驗組精囊侵犯陽性率(22.22%)與對照組(20.63%)相當的研究結論不一致，考慮可能為術前穿刺活檢無法明確精囊累及情況，兩個實驗納入病例個體存在差異。

綜上所述，采用大組織切片技術進行前列腺癌病理診斷，便于全面細致病理觀察，可以提高切緣陽性與微小病灶檢出率，精確病理診斷，為臨床診治提供更有價值的依據，值得推廣使用。