飼料中添加VC 和VE 對加州鱸生長和免疫力的影響

陳 健 李良玉 陳 霞 唐 洪 魏文燕

維生素是維持動物機(jī)體正常生長、發(fā)育和繁殖所必需的微量小分子有機(jī)化合物，特別是維生素C（VC）和維生素E（VE）在水產(chǎn)動物生長和免疫力方面起著至關(guān)重要作用。VC通過促進(jìn)膠原蛋白的形成而參與表皮黏液、鱗片的形成，是一種重要的抗氧化劑，可保護(hù)生物膜免遭脂質(zhì)過氧化的破壞，是機(jī)體防病抗病的第一道屏障；VE是魚類生長必須的脂溶性維生素，缺乏VE會導(dǎo)致魚類出現(xiàn)生長緩慢、存活率下降、血液紅細(xì)胞受損等癥狀。

加州鱸屬肉食性魚類，生長速度快，對鹽度和溫度的適應(yīng)范圍廣，其肉質(zhì)細(xì)嫩、味道鮮美，深受人們的喜愛。目前有關(guān)加州鱸營養(yǎng)學(xué)研究已有報(bào)道，加州鱸的蛋白質(zhì)、脂肪的最適需要量已初步確定，維生素及幾種維生素聯(lián)合作用對于加州鱸生長及免疫力的影響還未見相關(guān)。本試驗(yàn)以加州鱸為研究對象，根據(jù)正交設(shè)計(jì)17個(gè)試驗(yàn)組，通過探究雙因子（VC、VE添加量）四水平下VC、VE含量對加州鱸生長及免疫力的影響，篩選加州鱸生長適宜VC、VE含量；篩選加州鱸飼料適宜VC/VE組合配方；為加州鱸人工配合飼料的開發(fā)和利用提供理論指導(dǎo)，同時(shí)為科學(xué)配制加州鱸飼料、提高養(yǎng)殖效益提供基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)用魚

實(shí)驗(yàn)所用加州鱸購于通威股份有限公司，隨機(jī)選取平均體質(zhì)量10g左右加州鱸魚苗，魚苗規(guī)格整齊，健康活潑，無病害。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)分組

試驗(yàn)條件下將雙因子（VC、VE添加量）各設(shè)4個(gè)水平，VC的4個(gè)水平分別為：0.002%、0.004%、0.008%、0.016%；VE的4個(gè)水平分別為：0.0025%、0.005%、0.01%和0.02%；根據(jù)正交設(shè)計(jì)16種組合見表1，17組為試驗(yàn)對照組。

表1 正交設(shè)計(jì)的因子水平表

1.2.2 飼料配制

各組相同的飼料成分為：魚粉，65%；豆粕，10%；面粉，18%；魚油，3%；磷酸二氫鈣等；各試驗(yàn)組根據(jù)正交設(shè)計(jì)的因子水平添加相應(yīng)的維生素比例。

1.2.3 飼養(yǎng)管理

購買的加州鱸在試驗(yàn)基地暫養(yǎng)，在玻璃鋼池中用基礎(chǔ)飼料（對照組飼料）馴養(yǎng)7天，至其完全適應(yīng)玻璃鋼池試驗(yàn)環(huán)境。馴養(yǎng)結(jié)束后，選取1530尾健康加州鱸幼魚，隨機(jī)分在17組，每組90尾魚，3個(gè)重復(fù)，分別投喂對應(yīng)飼料比例，17組投喂基礎(chǔ)飼料，每天投喂2次，投喂量為體重的2%-5%，同時(shí)應(yīng)根據(jù)水溫、天氣和魚的攝食情況調(diào)整投喂量，飼養(yǎng)周期為60天，保證良好水質(zhì)條件，溶解氧大于6.0mg/L。

1.3 樣品采集

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束前，停食24小時(shí)，然后對每個(gè)網(wǎng)箱中的所有加州鱸進(jìn)行計(jì)數(shù)、稱重，記錄生長情況。從每個(gè)網(wǎng)箱隨機(jī)撈取5尾魚，測定體重、體長等相關(guān)指標(biāo)，同時(shí)進(jìn)行肝臟樣品的采集。取肝臟組織，剔除其表面的結(jié)締組織附著物，并按重量1∶10加入PBS（pH7.4）緩沖液，均漿機(jī)高速均漿后，3500g低溫離心20分鐘，取上清液，置于-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 生長性能指標(biāo)測定

增重率、特定生長率和成活率等指標(biāo)，計(jì)算公式如下：

表2 VC、VE的添加量對加州鱸生長的影響

1.5 抗氧化性能指標(biāo)的測定

丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性均采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定，測定方法參照試劑盒說明書進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 VC、VE的添加量對加州鱸生長的影響

由表2可看出VC、VE水平對加州鱸增重率、特定生長率、肥滿度、肝體比、臟體比和成活率有影響。VC添加水平為0.008%、VE添加量水平為0.02%時(shí)，其增重率和特定生長率出現(xiàn)最高值，分別為325.87%和1.96%；但加州鱸成活率較其他組偏低。VC添加水平為0.004%、VE添加量水平為0.02%時(shí)，加州鱸成活率最高；低VC水平（0.002%、0.004%）時(shí)，其存活率相對較高。

2.2 VC、VE的添加量對加州鱸MDA含量和SOD活性的影響

MDA是脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的最主要的產(chǎn)物之一，過多積累會對細(xì)胞產(chǎn)生毒害，影響機(jī)體免疫力；SOD是重要的抗氧化酶，能夠清除體內(nèi)自由基，對抗與阻斷氧自由基對細(xì)胞造成的損害；MDA、SOD可間接衡量加州鱸機(jī)體免疫力。從表3可以看出，VC、VE對MDA和SOD有一定互作效應(yīng)；VC添加水平為0.016%、VE添加量水平為0.0025%時(shí)，肝臟組織中MDA含量最低，其機(jī)體免疫力最強(qiáng)；VC、VE在高水平時(shí)其MDA含量相對于對照組都處于較低水平；VC、VE在最高添加水平時(shí)SOD活性達(dá)到峰值。

表3 VC、VE對加州鱸MDA含量和SOD活性的影響

3 結(jié)論

飼料中添加適量的VC、VE能夠促進(jìn)加州鱸的生長，提高其存活率和其免疫力，過量的維生素水平會抑制加州鱸的生長。本試驗(yàn)條件下，飼料中添加適宜含量的VC、VE水平有一定互作效應(yīng)，尤其對肝臟組織中MDA和SOD活性影響明顯。將加州鱸的存活率、增重率和特定生長率作為主要考慮因素，同時(shí)綜合考慮其對免疫指標(biāo)影響素，在本實(shí)驗(yàn)條件下，選擇組號8作為兩種維生素添加量的最佳組合，VC添加水平為0.004%，VE添加水平為0.02%。

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