不同產(chǎn)地苦蕎的質(zhì)量評(píng)價(jià)研究

賓婕 張郴 晏通 胡建林

【摘?要】?目的：對(duì)云南及四川地區(qū)的苦蕎質(zhì)量進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，為苦蕎質(zhì)量監(jiān)控提供理論依據(jù)。方法：收集云南及四川地區(qū)的苦蕎樣品16份，采用藥典方法對(duì)蘆丁、槲皮素、肌醇、水分、浸出物、重金屬、砷鹽及農(nóng)藥殘留量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果：16份苦蕎樣品的蘆丁含量在1.02%～2.55%，槲皮素含量在0.12%～0.89%，肌醇含量在0.15%～0.51%，水分含量在7.38%～9.94%，浸出物含量在6.28%～18.22%，重金屬及砷鹽均符合限量要求，2種農(nóng)藥均未檢出。結(jié)論：不同產(chǎn)地苦蕎有效成分含量有一定差異，有害物質(zhì)殘留均符合規(guī)定，規(guī)定本品水分不得過10%，水溶性浸出物不得少于10%，醇溶性浸出物不得少于5%。

【關(guān)鍵詞】?苦蕎;含量測(cè)定;重金屬;農(nóng)藥殘留

【中圖分類號(hào)】R282.5?【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A?【文章編號(hào)】1007-8517（2020）19-0043-04

Abstract：Abjective To evaluate the quality of buckwheat in Yunnan and Sichuan，provide a theoretical basis for the quality control of buckwheat. Methods Collecte 16 samples of buckwheat from Yunnan and Sichuan，Determine the contents of rutin， quercetin， inositol， water， extractives， heavy metal， arsenic salt and pesticide residues by pharmacopoeia method. [WTHZ]Results [WTBZ] In the 16 buckwheat samples，The content of rutin ranged from 1.02% to 2.55%，quercetin ranged from 0.12% to 0.89%，inositol ranged from 0.15% to 0.51%，water content ranged from 7.38% to 9.94%，extractives is between 6.28% and 18.22%，heavy metals and arsenic salts meet the limit requirements，none of the two pesticides were detected.Conclusion The contents of active components in buckwheat from different regions were different， and the harmful substances remained were in accordance with the regulations， which stipulated that the water content of buckwheat should not exceed 10%， the water-soluble extract should not be less than 10%， and the alcohol-soluble extract should not be less than 5%.

Key?words：Buckwheat; Content Determination; Heavy Metals; Pesticide Residue

苦蕎[Fagopyrum tartaricum（Linn）Gaench]屬蓼科蕎麥屬雙子葉植物，多產(chǎn)于云貴高原、黃土高原兩地[1]。其根、莖、葉、花、種子及籽殼中都含有大量黃酮類化合物，如蘆丁、槲皮素、肌醇。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)和現(xiàn)代醫(yī)學(xué)都證實(shí)苦蕎具有降血糖、降血脂、降尿糖、防便秘等功效[2-3]，被權(quán)威專家稱為“三降食品”和“21 世紀(jì)人類的健康食品”。因此苦蕎中蘆丁、槲皮素及肌醇含量是評(píng)價(jià)苦蕎功能性優(yōu)劣的重要指標(biāo)之一。此外，苦蕎中蛋白質(zhì)含量也較高，有極高的營(yíng)養(yǎng)和醫(yī)藥價(jià)值[4]。蕎麥蛋白除能顯著降低血液膽固醇濃度，其效果優(yōu)于大豆蛋白質(zhì)[5]，還具有抗衰老、抑制大腸癌的發(fā)生等作用。隨著其臨床研究和應(yīng)用越來越廣泛，制訂苦蕎的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)迫在眉睫。由于水分過多會(huì)導(dǎo)致霉變，引入安全性問題，且影響食藥價(jià)值。有效成分的含量多少也直接影響療效。且有專家提出：重金屬、農(nóng)藥殘留量檢查是中藥材走向世界，創(chuàng)立綠色中藥名牌產(chǎn)品的中藥標(biāo)志之一[6]。為此，本試驗(yàn)對(duì)苦蕎中有效成分進(jìn)行測(cè)定，及對(duì)水分，浸出物，重金屬、砷鹽和農(nóng)藥殘留進(jìn)行了檢查，旨在為制訂苦蕎的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

1?儀器與材料

1.1?儀器?LC-2010型高效液相色譜儀（包括四元梯度泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、紫外檢測(cè)器和蒸發(fā)光散射檢測(cè)器，日本島津），ODS柱（4.6 mm×150 mm，5μm，島津）， Luna C18柱（4.6 mm×150 mm， 3μm，Phenomenex公司），SK3200H超聲提取器（上海儀器制造廠），CP-224S電子天平（德國(guó)賽多利斯）。

1.2?材料?甲醇（色譜純，美國(guó)TEDIA天地試劑公司），乙腈（色譜純，美國(guó)Mallinckrodt Baker公司），水（娃哈哈飲用純凈水），其余試劑均為分析純。蘆丁（批號(hào)：09072231）、槲皮素（批號(hào)：09120411）對(duì)照品購(gòu)自上海同田生物技術(shù)有限公司，肌醇對(duì)照品（純度>98%，鼎瑞化工（上海）有限公司）。苦蕎樣品分別來自云南和四川。

2?方法與結(jié)果

為了對(duì)苦蕎的內(nèi)在質(zhì)量有個(gè)全面的認(rèn)識(shí)，分別對(duì)產(chǎn)自于云南及四川的16個(gè)樣品進(jìn)行了系統(tǒng)性研究，方便對(duì)我們的生產(chǎn)使用提供一定的參考依據(jù)。

2.1?蘆丁、槲皮素、肌醇的含量測(cè)定

2.1.1?色譜條件

2.1.1.1?蘆丁與槲皮素?島津ODS柱（4.6 mm×150 mm， 5 μm），以乙腈–水（含2%的冰醋酸）為流動(dòng)相，洗脫梯度為：0～18 min，乙腈濃度17%～40%，流速：1 mL/min，柱溫：25 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)：360 nm。

2.1.1.2?肌醇?HPLC：甲醇- 水（含0.1%的冰醋酸）為流動(dòng)相， 洗脫梯度為：0～5 min，甲醇濃度10%～30%，色譜柱：Luna C18柱（4.6 mm×150 mm， 3μm），流速：1 mL/min，進(jìn)樣量：6 μL，室溫操作。ELSD： 漂移0;管溫度5 ℃，載氣壓力40 psi。

2.1.2?對(duì)照品溶液的制備

2.1.2.1?蘆丁與槲皮素?精密稱取蘆丁對(duì)照品4.6 mg，槲皮素對(duì)照品4.0 mg，分別置于10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，再分別取1 mL至10 mL的容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，即得蘆丁和槲皮素對(duì)照品溶液濃度分別為0.046 mg/mL和0.04 mg/mL。

2.1.2.2?肌醇?精密稱取肌醇對(duì)照品6.7 mg置于25 mL容量瓶中，用超純水溶解并定容至刻度，搖勻，再精密移取0.5 mL至10 mL的容量瓶中，用超純水定容至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液濃度為13.4 μg/mL。進(jìn)樣前取適量溶液用0.22 μm微孔濾膜過濾。

2.1.3?供試品溶液的配制

2.1.3.1?蘆丁供試品溶液的制備?取苦蕎粉末（過60目篩）約100 mg，精密稱定，置于25 mL容量瓶中，加入80%乙醇5 mL，在常溫下超聲（59 KHz）提取30 min，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。進(jìn)樣前取適量溶液用0.45 μm微孔濾膜過濾。

2.1.3.2?槲皮素供試品溶液的制備?取苦蕎粉末（過60目篩）約100 mg，精密稱定，置于25 mL容量瓶中，加入50%乙醇4 mL，在常溫下超聲（59KHz）提取30 min，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。進(jìn)樣前取適量溶液用0.45 μm微孔濾膜過濾。

2.1.3.3 肌醇供試品溶液的制備?取苦蕎粉末（過60目篩）約100 mg，精密稱定，置于25 mL容量瓶中，加入40%甲醇溶液4 mL，在常溫下超聲提取20 min，用相應(yīng)的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。進(jìn)樣前取適量溶液用0.22 μm微孔濾膜過濾。

分別取10 μL進(jìn)高效液相色譜儀，記錄峰面積，由線性方程計(jì)算各自含量，結(jié)果見表1。

2.1.4?線性關(guān)系考察

2.1.4.1?蘆丁與槲皮素?分別精密吸取2.1.1項(xiàng)下的蘆丁和槲皮素對(duì)照品溶液0.5、1、5、10、15、20、25 μL和0.5、1、5、10、15 μL， 注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，測(cè)定其峰面積，以進(jìn)樣量X（μg）為橫坐標(biāo)，色譜峰面積Y為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，蘆丁和槲皮素的回歸方程和相關(guān)系數(shù)分別為：Y = 1703415X+9229.6，r=0.9996;Y=3833824 X-11994.2，r= 0.9999。

2.1.4.2?肌醇?精密吸取2.1.2項(xiàng)下的肌醇對(duì)照品溶液2、4、6、8、10 μL注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖， 測(cè)定其峰面積，以進(jìn)樣量X（μg）為橫坐標(biāo)，色譜峰面積Y為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得：Y=156739X+43.2，r=0.9997。

2.1.5?樣品含量測(cè)定?取不同來源的苦蕎粉末適量，精密稱定，分別按2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，分別記錄蘆丁、槲皮素及肌醇的峰面積，由線性方程計(jì)算各自含量，測(cè)定結(jié)果見表1。

2.2?水分的測(cè)定?按照《中國(guó)藥典》（2020年版）中水分測(cè)定法（四部通則0832）第二法[7]，根據(jù)減失的重量，計(jì)算苦蕎樣品含水量（%），結(jié)果見表1。

2.3?浸出物的測(cè)定?按照《中國(guó)藥典》（2020年版）中浸出物測(cè)定法（四部通則2201）[7]，分別計(jì)算苦蕎樣品中水溶性浸出物及醇溶性浸出物的含量（%），結(jié)果見表1。

2.4?重金屬、砷鹽殘留?按照《中國(guó)藥典》（2020年版）中重金屬檢查法（四部通則0821） [7]第二法檢查重金屬;按砷鹽檢查法（四部通則0822）[7]第二法檢查砷鹽，檢測(cè)結(jié)果見表1。

2.5?農(nóng)藥殘留?本試驗(yàn)結(jié)合蕎麥生長(zhǎng)期的病害特點(diǎn)和針對(duì)性的用藥，發(fā)現(xiàn)吡蟲啉和多菌靈是種植蕎麥最常用的農(nóng)藥，故本試驗(yàn)對(duì)吡蟲啉和多菌靈進(jìn)行殘留量檢查，用液-質(zhì)聯(lián)用方法進(jìn)行檢測(cè)。液相條件：Waters ACQUITY?UPLC -MS/MS（API 3200），色譜柱為ACQUITY?UPLC ODS柱（2.1 mm× 100 mm，7 μm），以乙腈-水為流動(dòng)相梯度洗脫：0～2 min，乙腈濃度為15%，2～6 min，乙腈濃度15%～90%，柱溫30 ℃，流速0.3 mL/min，進(jìn)樣1 μL。質(zhì)譜條件：氣體為高純氮?dú)猓x子源：電噴霧離子源，掃描方式：正離子掃描，檢測(cè)方式：多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)，電噴霧電壓：5500 V，霧化氣壓力：0.414 MPa，輔助加熱氣壓力：0.345 MPa，氣簾氣壓力：0.069 MPa，離子源溫度：600 ℃。

對(duì)照品和供試品的定性結(jié)果見圖1，檢測(cè)結(jié)果見表1。

3?討論

研究考察了16個(gè)產(chǎn)地苦蕎樣品的有效成分，其中蘆丁含量最高，在1.02%～2.55%，肌醇含量最低，在0.15%～0.51%;且不同產(chǎn)地苦蕎中蘆丁、槲皮素及肌醇含量有一定差異，說明產(chǎn)地的氣候、土壤特性等生態(tài)因子及產(chǎn)地加工方式對(duì)藥材質(zhì)量影響很大。同產(chǎn)地的苦蕎，因加工方式不同含量也有明顯差異。根據(jù)測(cè)定情況和一般養(yǎng)護(hù)經(jīng)驗(yàn)，規(guī)定本品水分不得過10%。浸出物含量反映了植物體內(nèi)生物活性物質(zhì)的積累情況，與藥材質(zhì)量密切相關(guān)[8]。按照測(cè)定結(jié)果適當(dāng)下浮來設(shè)定指標(biāo)限度比較符合實(shí)際情況，規(guī)定本品水溶性浸出物不得少于10%，醇溶性浸出物不得少于5%。

按照國(guó)際市場(chǎng)對(duì)無公害綠色藥材的要求，對(duì)不同產(chǎn)地的苦蕎進(jìn)行了重金屬、砷鹽及農(nóng)藥殘留檢測(cè)，結(jié)果表明，苦蕎樣品符合《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》[9]（中華人民共和國(guó)對(duì)外貿(mào)易經(jīng)濟(jì)合作部）規(guī)定，及中國(guó)藥品生物制品檢定所《中藥中鉛、鎘、砷、汞測(cè)定方法起草說明》[10]中提出的四元素的限量標(biāo)準(zhǔn)，即鉛不高于5 ppm，鎘不高于0.5 ppm，砷不高于2 ppm，汞不高于0.2 ppm。

本實(shí)險(xiǎn)對(duì)云南及四川地區(qū)苦蕎的蘆丁、槲皮素、肌醇含量、水分、浸出物、重金屬、農(nóng)殘進(jìn)行測(cè)定，為科學(xué)評(píng)價(jià)苦蕎內(nèi)在質(zhì)量積累了科學(xué)資料，提供了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]王鴻澤，蘭海銘. 苦蕎的綜合利用[J]. 食品安全導(dǎo)刊，2018（15）：124-125.

[2]REN W，QIAO Z，WANG H，et al. Tartary buckwheat flavoniod activatea caspase and induces HL cell apoptosis[J]. Methods Find Exp Clin Pharmacol，2001，23（8）：427-432.

[3]劉淑梅，韓淑英，霍國(guó)金，等.甜蕎麥葉總黃酮降糖降脂作用及機(jī)制[J].第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，22（19）：1815-1817.

[4]祁學(xué)忠，吉鎖興，王曉燕，等.苦蕎黃酮及其降血糖作用的研究[J].科技情報(bào)開發(fā)與經(jīng)濟(jì)，2003，13（8）：111-112.

[5]李丹，丁霄霖.苦蕎黃酮抗氧化作用的研究[J].食品科學(xué)，2001，22（4）：22-23.

[6]羅國(guó)安，王義明.中藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[J].中藥研究與信息，1999，37（6）：21.

[7]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[S].2020年版.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2020.

[8]賀軍權(quán)，歐陽(yáng)曉玫，朱俊儒，等.甘肅不同產(chǎn)區(qū)大黃藥材的綜合質(zhì)量考察[J].中成藥，2007，29（1）：88-91.

[9]中華人民共和國(guó)對(duì)外貿(mào)易經(jīng)濟(jì)合作部.藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[S].2001.

[10]王奎，張尼，魏增，等.微波消解-電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定砂仁中的銅、鉛、砷、鎘[J].化學(xué)分析劑量，2018（5）：25-28.

（收稿日期：2020-05-09?編輯：劉?斌）