暴馬桑黃SbLSD基因克隆及差異表達分析

劉增才，王世新，孫婷婷，曲曉磊，鄒 莉

（1.東北林業大學 林學院，黑龍江 哈爾濱 150040；2.哈爾濱學院 食品工程學院，黑龍江 哈爾濱 150086）

桑黃是一類大型的藥用真菌，近幾十年來深受消費者的喜愛和追捧，主要由于桑黃在降血糖[1]、抗氧化[2]、抗腫瘤[3]、增強人體免疫[4]等方面具有良好的醫療功效，并且在產生良好藥用效果的同時，不會使患者機體出現不良反應和副作用[5-6]。桑黃良好的藥用效果主要源于其富含的多種活性物質，包括三萜、多糖、黃酮、酚類等，通過分化誘導、抗侵襲轉移、對腫瘤細胞的毒作用等方式來發揮功效[7-8]。三萜是一類基本母核由30 個碳原子組成的復雜化合物，是桑黃發揮藥用功效的重要成分，并且三萜含量的多少是衡量桑黃藥用價值高低的重要指標[9]。

暴馬桑黃Sanghuangporus baumii(Pilát) L.W.Zhou &Y.C.Dai 是生長在暴馬丁香樹上的一種桑黃，目前從中分離提取得到的三萜含量較低，通過大面積人工栽培暴馬桑黃或者利用化學手段獲得大量三萜難度均較大，所以三萜的獲取限制了其藥用價值的應用。暴馬桑黃三萜是通過甲羥戊酸途徑（mevalonate pathway,MVA）途徑合成的，由起始物乙酰輔酶A 經過乙酰輔酶A ?；D移酶（acetyl-CoA acetyltransferase,AACT）、羥甲基戊二酰輔酶A 合酶（3-hydroxy-3-methylglutary-CoA synthase,HMGS）、羥甲基戊二酰輔酶A 還原酶（3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,HMGR）、甲羥戊酸激酶（mevalonate kinase,MVK）、甲羥戊酸焦磷酸脫羧酶（mevalonate pyrophosphate decarboxylase,MVD）、異戊二烯焦磷酸異構酶（isopentenyl diphosphate isomerase,IDI）、羊毛甾醇合酶（lanosterol synthase,LS）等一系列酶催化后反應生成中間三萜產物羊毛甾醇[10]。但是羊毛甾醇如何在多種酶的催化、修飾下演變成不同結構的三萜依然未知，目前大多數研究者認為，P450 家族基因在羊毛甾醇后續反應中起著重要作用，并且已有研究者發現證實，在靈芝和蒺藜苜蓿等生物中存在少量P450 基因參與三萜合成過程[11-14]?！?br>