黏液型銅綠假單胞菌的臨床分布和耐藥特點分析 *

廖一群，劉德東，席徐翔，趙琴飛，鐘田雨，江麗霞

贛南醫學院第一附屬醫院檢驗科，江西贛州 341000

銅綠假單胞菌(PA)廣泛分布于水、土壤，以及人體的皮膚、呼吸道等，是引起醫院感染的重要條件致病菌，可引起皮膚、呼吸道及燒傷創口的感染，也可引起菌血癥、肺囊性纖維變性等。PA可分為黏液型和非黏液型，由于黏液型PA表面可產生大量黏液，從而形成生物膜，增加了臨床治療的難度。本研究對臨床分離黏液型PA的臨床分布和耐藥特點進行了調查、分析，旨在為合理選用抗菌藥物提供參考依據。

1 材料與方法

1.1菌株來源 收集本院2017年1月至2018年12月從臨床送檢標本分離到的PA共1 245株，其中黏液型PA 40株(3.2%)，非黏液型PA 1 205株(96.8%)，不重復計算同一患者相同部位重復分離的菌株。

1.2儀器與試劑 Vitek2 Compact全自動細菌鑒定儀及其配套試劑(法國生物梅里埃公司)、FX200系列全自動血培養儀(美國BD公司)，哥倫比亞血瓊脂培養基、中國蘭瓊脂培養基和M-H瓊脂培養基購自廣州迪景公司，藥敏紙片均為英國Oxoid公司產品。

1.3細菌鑒定與藥敏試驗 黏液型菌落是指菌落無色、邊緣不規則，呈露滴狀或膠凍狀；無上述特征的為非黏液型菌株。嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》第4版進行細菌培養與分離。用Vitek2 Compact全自動細菌鑒定儀進行細菌鑒定。用K-B法進行體外藥敏試驗，35 ℃孵育48 h讀取藥敏試驗結果[1-2]，按照2017年美國臨床實驗室標準化研究所(CLSI)的標準文件[3]判讀結果，PA質控菌株為ATCC27853。

1.4統計學處理 數據運用Whonet5.6和SPSS19.0軟件統計分析，用χ2檢驗比較組間耐藥率，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1黏液型PA的臨床分布情況 40株黏液型PA除1株來自中段尿標本外，其余39株均來自呼吸道標本。來源患者的疾病類型以慢性阻塞性肺疾病(COPD)和支氣管擴張癥多見；主要分布于呼吸內科(52.5%)，其次為重癥監護室(ICU,12.5%)；其中男性23例、女性17例，年齡24～89歲、平均(62.9±12.2)歲，見表1。

表1 40株黏液型PA的臨床分布情況

2.2藥敏試驗 黏液型PA對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別達到了25.0%和17.5%，對臨床其他常用抗菌藥物的耐藥率均不高，為2.5%～25.0%；與非黏液型PA相比，黏液型PA對哌拉西林的耐藥率更低，對頭孢吡肟、左氧氟沙星和環丙沙星的耐藥率更高，差異具有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 比較黏液型與非黏液型PA對抗菌藥物的耐藥率(%)

3 討 論

黏液型PA是PA的一種特殊存在形式，非黏液型PA在一定的條件下可轉化成黏液型PA[4]，其表面的生物膜使細菌易于持續定植于導管和黏膜，并逃逸宿主的免疫防御，從而抵抗抗菌藥物的抑制作用，引起抗菌藥物治療效果不佳[5]。本研究中黏液型PA較多分布于呼吸內科、ICU，患者主要為氣道結構改變性疾病(支氣管擴張癥、COPD)，這可能與患者的年齡、原發基礎疾病、免疫力以及插管等機械操作相關[6]，也說明黏液型PA是呼吸道感染的重要病原菌。

藥敏試驗顯示，黏液型PA對臨床常用抗菌藥物的耐藥率總體并不高，為2.5%～25.0%，其中對慶大霉素和阿米卡星的耐藥率均<10.0%，與陳近等[7]研究報道較一致。但值得注意的是，其對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別達到了25.0%和17.5%，與劉麗娟等[8](<3.0%)和李代昆等[9](<3.0%)的報道差異較大，與非黏液型PA相比，黏液型PA對哌拉西林的耐藥率更低，對頭孢吡肟、左氧氟沙星和環丙沙星的耐藥率更高，差異具有統計學意義(P<0.05)，對其他8種抗菌藥物的耐藥率差異無統計學意義(P>0.05)，與胡曉峰等[10]和謝國艷等[11]報道的黏液型PA對臨床常用抗菌藥物的耐藥率明顯低于非黏液型PA不一致，究其原因，一方面可能存在地區性差異，菌株來源于不同的人群和地區，可導致病原菌耐藥趨勢的差異；另一方面可能與生物膜的產生有關。

研究結果顯示，黏液型PA對臨床常用抗菌藥物的敏感性較高，但實際臨床工作常常出現治療效果欠佳的情況，導致藥敏試驗結果與臨床療效不符。究其原因，主要是銅綠假單胞菌的菌落形態易發生變化，容易在感染部位形成生物膜，從而阻礙抗菌藥物向菌膜內部滲透，降低抗菌藥物的有效抑菌濃度，導致病灶內的細菌難以被完全清除[12-13]。故而臨床治療黏液型PA感染時，應考慮使用能破壞或抑制細菌生物膜的藥物。已有研究表明，氨溴索合并環丙沙星能較好地抑制銅綠假單胞菌生物膜的形成[14-15]，低濃度紅霉素和阿奇霉素可阻止藻酸鹽的產生，廣泛應用于臨床的抗生物膜治療[16]，還有文獻報道，金銀花、大蒜素、云南白藥等中藥成分在體外可抑制生物膜的形成[17]，這些可為臨床治療黏液型PA感染提供較好的選擇。

因此，實驗室在分離鑒定黏液型PA后，應及時報告并提示臨床此類細菌可能形成生物被膜，臨床醫生在治療黏液型PA引起的感染時，應根據該菌的生物學特性，結合藥敏試驗報告合理選用抗菌藥物，以提高療效。