鼻息肉患者血清TNF-α、IL-17的表達及其意義①

羅經涇，黃曉麗，范宗憲

(佳木斯大學附屬第一醫院，黑龍江 佳木斯 154003)

鼻息肉(nasal polyp)是一種很常見的耳鼻咽喉頭頸外科的疾病，目前的治療方法以手術治療為主。其成人發病率約為1%～2%，術后復發率約為15%[1]。其難治性和易復發性的一個重要原因就在于該病的發病機制尚不明了。鼻息肉的發病已有很多學說表明可能與遺傳、變態反應、感染等多種因素相關[2]。 就目前已有的研究來看，各種免疫細胞和細胞因子的作用舉足輕重。很多學者發現Th1和Th2細胞失衡是鼻息肉病程的關鍵機制，而Th17細胞是否參與其中的平衡也是目前很多研究的對象。Th17細胞通過產生的白介素17[3]與Th1細胞產生的腫瘤壞死因子α可能在鼻息肉的發病及復發中扮演重要角色。在Reibman等的研究中TNF-α和IL-17會導致呼吸道的上皮細胞產生巨噬細胞炎性蛋白MIP-3α/CCL20增多[4]，而吳等[5]學者認為MIP-3α/CCL20直接對鼻黏膜產生作用，且趨化嗜酸性粒細胞和中性粒細胞，促進炎癥的發展，刺激新生血管的產生，最終造成鼻息肉發生。本次研究旨在通過ELISA測定和比較初發與復發的鼻息肉患者和正常志愿者血清中IL-17和TNF-α的濃度，并分析它們的關系，從一個側面來探討在這兩個因子在鼻息肉的發病和復發中可能起到作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018-01～2018-12在佳木斯大學附屬第一醫院確診的初發鼻息肉患者40例作為A組，其中男25例，女15例，年齡21～58歲，平均(45±13)歲，診斷依據病史采集、前鼻鏡檢查、鼻內鏡檢查和鼻竇CT檢查，排除標準為患有其他良惡性腫瘤、其他急慢性炎癥性疾病、支氣管哮喘或阿司匹林過敏史。手術后復發鼻息肉患者24例作為B組，其中男15例，女9例，年齡35～60歲，平均(51±16)歲，其診斷和排除標準同上。選取同期于我院體檢的健康成人20例為健康對照組，其中男12例，女8例，年齡24～60歲，平均(43±13)歲，排除標準同上。所有研究對象均已獲得知情同意。實驗組和對照組之間性別、年齡差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 材料準備，實驗組和對照組所有對象晨起空腹采血，EDTA抗凝，加入1.5mL的離心管中，經3500r/min離心10min后分離出血清，-20℃冰箱保存待測。將IL-17 ELISA試劑盒和TNF-α ELISA試劑盒保存在4℃冰箱中。

1.2.2 ELISA法測量所有對象血清中的TNF-α和IL-17的濃度，試劑盒為武漢博士德公司產品，操作步驟嚴格地按試劑盒的使用說明書進行，所有待測對象和標準品設兩個復孔，用酶標儀450nm處測量OD值。

1.3 統計學方法

采用SPSS21.0軟件進行處理，數據采用均數±標準差的方法來表示，比較采用獨立樣本t檢驗，P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血清TNF-α和IL-17水平的檢測

A組、B組血清中TNF-α和IL-17的水平均明顯高于對照組(P<0.05)，見表1～2。差別有統計學意義，且B組血清中的TNF-α和IL-17濃度明顯高于A組(P<0.05)，差別具有統計學意義。見表3。

表1 初發組(A組)與對照組血清TNF-α和IL-17水平對比

表2 復發組(B組)與對照組血清TNF-α和IL-17濃度對比

表3 復發組(B組)與初發組(A組)血清TNF-α和IL-17濃度對比

2.2 各組血清中TNF-α水平和IL-17水平的相關性

在A組和B組TNF-α和IL-17的濃度之間存在中等程度正相關的關系，而對照組兩因子之間的為極弱程度相關。見表4。

表4 各組TNF-α和IL-17濃度之間的相關性Pearson分析

3 討論

鼻息肉的發病與復發過程中各種免疫細胞和其產生的細胞因子的作用舉足輕重。IL-17主要由Th17細胞產生，在炎癥反應的進一步進行當中扮演重要角色[6]。它能促進很多細胞釋放各種其他細胞因子來促進炎癥反應，它還可以和其他細胞因子(TNF-α、IL-1等)協同作用加強炎癥反應[7]，它可能參與鼻息肉的基質纖維化、基底細胞增厚等[8]結構異常中。TNF-α則是一種前細胞因子，主要由單核巨噬細胞、Th1、Th17等細胞產生。研究表明，TNF-α大量且廣泛地在鼻息肉上皮 、血管內皮、腺體以及部分炎性細胞中表達[9]。張敏等[10]的研究則認為鼻息肉的發生發展與TNF-α和IL-17刺激鼻息肉上皮細胞產生MIP-3α/CCL20增加有關。吳等[5]學者認為MIP-3α/CCL20能直接對鼻黏膜產生作用，持續改變局部微環境并影響捕獲不成熟的樹突狀細胞，與此同時，MIP-3α/CCL20還能趨化嗜酸性粒細胞和中性粒細胞，令這些細胞捕獲附近的上皮細胞，促進慢性炎癥的發展，刺激新生血管的產生，最終造成鼻息肉發生。在本次研究中，健康志愿者、初發鼻息肉患者和復發鼻息肉患者血清的TNF-α和IL-17的水平依次增高，并且差異具有統計學意義，提示TNF-α和IL-17可能與鼻息肉的發生發展尤其是復發有著密切的關系。同時，各組血清TNF-α和IL-17之間具有正相關性，提示兩個細胞因子之間可能存在相互的協同作用，并推動鼻息肉的發生和復發。Fokkens教授認為白種人的鼻息肉組織中效應T細胞主要是Th2，而中國人的則以Th1、Th17為占優[11]。本實驗結果也間接支持了這一觀點。尤其是對于鼻息肉的易復發性，可能和Th1、Th17的作用有極其密切的關系。綜上所述，TNF-α和IL-17與鼻息肉的發生發展尤其是鼻息肉的易復發性密切相關，可能參與到鼻息肉的發病和復發中，并且可能存在協同作用。