牛人工授精技術操作要點

文│黃龍（貴州省黔西南布依族苗族自治州農業農村局）

1780年，意大利生理學家司拜倫謹尼（SpallanZanni）首次對狗進行人工授精并獲得成功，迄今已有240年歷史，開創了動物繁育新技術。人工授精是指通過工具將公畜的精液取出，再用工具將精液輸入到發情母畜的生殖道內，使母畜授精的一種配種方法。

一、牛人工授精的關鍵技術環節

1.人工授精站的基本要求。工作室設置人工授精站必須具備專用工作室、凍精解凍檢查室、配種室、消毒器械和冷藏設備。

2.室內工作規則。輸精員進入工作室必須穿工作服；工作室內保持整潔，要求無煙、無蠅、無異味、無雜物，干凈、衛生；禁止在室內燒火、吸煙；防疫、治療、消毒藥品、治療器械等不得與其他物品混用；非輸精員禁止進入工作室內。輸精員要嚴格執行人工授精操作規程，熟練掌握人工授精技術和肉牛飼養管理技術，母牛發情和產犢情況，并做好登記。對畜主進行科技宣傳培訓，使畜主掌握牛的飼養和繁育基本知識，嚴格執行人工授精設備的消毒制度和物資管理。認真做好配種記錄，加強工作總結，找出工作中存在的問題，研究提高母牛受胎率、產犢率的有效措施和方法。

二、母牛受胎率影響因素

母牛受胎率影響因素有發情表現、精液質量、畜主對牛的發情鑒定水平和配種員的輸精技術等。母牛受胎率=發情表現×精液質量×發情鑒定×輸精技術×100%。

對輸精器械要進行嚴格的清洗和消毒工作，輸精器械在消毒前先用肥皂水刷洗，再用清水沖凈擦干，然后按器械的性質、種類分別包裝，放入高壓滅菌鍋內消毒30分鐘，冷卻后置放瓷盤內備用。潤滑劑、生理鹽水、棉球用前經蒸氣消毒。新購置的玻璃器皿使用前先用2%碳酸鈉溶液浸泡，再用清水洗凈，放入80～120℃高溫干燥箱中消毒。凡與精液接觸的用具，使用前必須用滅菌生理鹽水或解凍液沖洗1～2次。

三、鮮精采集及凍精解凍

1.采精。對采精場的要求：寬敞、平坦、安靜、清潔、采光好，場內設采精架以保定臺畜。

2.采精臺的準備。

（1）臺畜。性情溫和的發情母牛。

（2）假臺畜。貌似牛樣的模型，將發情母牛尿液用麻袋片浸濕假臺畜，誘引公牛爬跨。

（3）公牛的調教。激素的作用：發情母牛陰道分泌物對公牛有刺激和引誘作用，激發公牛的性欲。視覺、“觀摩”：讓調教公牛看其他公牛配種，產生配種欲望。采精前的刺激：公牛和發情母牛拴在一起5～10分鐘，公母相互挑逗，但不讓其爬跨，使公牛性興奮不斷加強，待公牛陰莖充分勃起并伸出時，再讓公牛爬跨，使用假陰道進行采精，約8～10秒。

（4）采精原則。完全收集到精液；保證精液品質；不能損傷公牛生殖器官；對公牛的性反射不能有不良影響；方法簡單、實用、易操作。方法：假陰道法（牛、羊、馬、兔、豬均可）。采精頻率：每周采兩天，每天采兩次。

（5）精液品質檢查。外觀檢查：色澤乳白色或灰白色；氣味：無味或淡淡腥味；精液量：5～8毫升。

（6）精子成活率。在顯微鏡下計數板觀察精液中直線前進運動的精子數占總精子數的百分率。精子成活率的檢查條件：溫度37～38℃，恒溫臺（箱）。精子成活率：鮮精≥0.6，凍精≥0.3，并執行相關標準。

（7）凍精解凍。顆粒凍精解凍：每粒用2.9%檸檬酸鈉溶液5毫升試管中加熱30～37℃解凍（每粒0.5～0.25毫升），顆粒溶解完畢，輸精針、注射器吸入備用。

細管凍精解凍：放入3～37℃水中解凍（每支0.25毫升），發現冒氣泡時取出。凍精保存：在罐內-176～-196℃液氮中保存，凍精離開液氮的時間不超過10秒，每周檢查兩次液氮，液氮量不低于罐容的1/3。

四、輸精

1.母牛的發情鑒定。指母牛特有的與排卵過程密切相關的周期性的性活動現象。發情表現：精神興奮、鳴叫、食欲減退、臥立不安、舉尾、頻頻排尿；性欲（交配欲）：主動接近公牛，爬跨其他母牛，接受爬跨，兩后腿分立，呈交配姿勢。

2.生殖道變化。陰道充血，分泌物增多，子宮頸口開張，子宮頸充血增大變軟，子宮與陰道收縮加強，陰門有黏液流出。黏液變化為：無色透明、米湯色、乳白色，在米湯色到乳白色時配種最佳。

3.卵巢變化。母牛發情周期為21天，分四個階段。

（1）發情前期。上一個周期的黃體迅速退化，卵泡迅速發育生長，沒有性欲表現。

（2）發情期。卵泡成熟，開始排卵，陰道上皮角質化明顯，生殖道收縮加強，精液分泌增加，接受爬跨，有性欲，持續1～2天。

（3）發情后期。黃體開始形成，保護卵巢，母牛恢復正常，不接受交配。

（4）間情期。卵巢上黃體成熟，分泌加強，抑制發情。一旦妊娠，黃體將維持到分娩，叫妊娠黃體；如果設有妊娠，黃體只維持在間情期，叫周期黃體。

4.發情母牛配種。發情母牛用保定架或拴在柱上保定后，用0.1%高錳酸鉀液擦洗外陰消毒，采用直腸把握輸精（輸精員需提前剪磨指甲，并清洗消毒），打上潤滑劑（如凡士林和肥皂水），手指呈錐狀緩慢從肛門伸入直腸，掏出腸內貯存糞便，通過直腸壁輕輕下壓握住子宮頸，另一只手將裝好精液的輸精槍（管）向上與水平成30～40度角插入陰道，直腸內手指感觸槍（管）頭，兩手配合引入子宮頸內口進入子宮角，將精液緩慢注入，輸精完成后，將輸精槍慢慢抽出。輸精時若母牛努責（初配母牛較常見），助手按壓母牛腰薦部，待努責停止后再將手伸入直腸內。凍精劑量：細管0.25毫升，顆粒0.1毫升，有效精子數大于1200萬個。

5.配種記錄。應做好配種記錄，如畜主、地址、母牛品種、年齡、外貌特征、發情狀況、配種時間、輸精日期、精液品種、公牛號等信息。

6.配種后觀察。配種后母牛下一情期再發情，說明未受胎，如不再發情，且食欲增加、溫和、貪睡，一般認為已受胎。要加強懷孕期母牛飼養管理，黃牛懷孕期280天，水牛304天。產犢后跟蹤調查，測定犢牛體尺體重指標、統計分析受胎率、產犢率及后代生產性能等，為今后配種提供技術依據。