人工繁育冬蟲夏草與野生冬蟲夏草的質量對比研究

★ 陳培武 蘇楊青 李小鳳（華潤江中制藥集團有限責任公司 南昌 330004）

冬蟲夏草Cordyceps sinensis（Berk.）Sacc.為麥角菌科真菌寄生在蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲上的子座和幼蟲尸體的干燥復合體，具有補腎益肺、止血化痰的功效［1］。我國冬蟲夏草主要分布于西藏、青海、四川、云南、甘肅等省區海拔3 600～5 200 m 的局部高山草甸地帶［2］。研究發現冬蟲夏草的主要成分有蟲草多糖、蟲草酸、蟲草素、脂肪、氨基酸、生物堿（腺苷、脲苷）和30 余種微量元素［3-6］。冬蟲夏草在國內外被視為珍品，因價格昂貴，素有“黃金草”之稱。但因市場需求量巨大，野生資源匱乏，蟲草市場始終呈現供不應求的現象，而且過度的開發也使高原地區的生態遭到嚴重破壞，加劇了野生蟲草資源萎縮的危險。近年來，在政府的大力扶持下，人工繁育的冬蟲夏草品種相繼問世，而人工繁育品種與野生品種的質量差異也備受關注。本文結合《中國藥典》中規定的冬蟲夏草質量標準，從性狀、有效成分含量測定、重金屬及有害物質檢查三個方面，對人工繁育的冬蟲夏草及來自青海、四川、西藏加查、西藏江達4 個產地的野生蟲草的質量進行對比研究。

1 儀器與材料

1.1 儀器 液相色譜儀（美國安捷倫公司）；A3 原子吸收分光光度計（北京普析通用儀器有限公司）；Agilent6890N，ECD 檢測器（美國安捷倫公司）。

1.2 試藥 腺苷對照品（110879-200202）、脲苷（110887-201803）對照品、重金屬、農藥殘留標準品均購于中國藥品生物制品檢定院；乙腈為色譜純，水為超純水，其它試劑均為分析純；

1.3 藥材 人工繁育冬蟲夏草（西藏）來源于亳州中信中藥飲片廠，人工繁育冬蟲夏草（湖北）1和人工繁育冬蟲夏草（湖北）2 來源于江西樟樹天齊堂中藥飲片有限公司，青海冬蟲夏草購于益豐大藥房，四川冬蟲夏草購于江西省中醫院藥劑科，西藏加查和西藏江達冬蟲夏草來源于河北省安國藥材市場。

2 方法與結果

2.1 性狀檢查 對人工繁育及野生冬蟲夏草的性狀進行檢驗發現：人工蟲草的直徑約0.4～0.6 cm，表面顏色呈深黃色，與來自青海的野生蟲草相比，除直徑較小、顏色略淺外，其他各項性狀無明顯差異。人工繁育冬蟲夏草與野生品種的性狀均符合藥典規定。

2.2 腺苷、脲苷含量的測定

2.2.1 供試品溶液的制備 分別取人工繁育冬蟲夏草、野生冬蟲夏草粉末各0.2 g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入90 %甲醇10 mL，稱定重量，加熱回流30 min，放冷，用90 %甲醇補重，濾過，取續濾液即得。

2.2.2 對照品溶液的制備 稱取腺苷對照品適量，加90%甲醇制成每毫升含腺苷0.4108 mg 的溶液。另稱取脲苷對照品適量，加甲醇制成每毫升含0.4202 mg 的溶液。

2.2.3 色譜條件 C18柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流動相為乙腈—水（4∶96）；柱溫為35 ℃；檢測波長260 nm；流速為1.0 mL/min；進樣量20 μL。

2.2.4 測定結果 人工繁育冬蟲夏草腺苷含量與青海野生冬蟲夏草無明顯差異，略低于來自四川、西藏加查和西藏江達的野生蟲草，但所檢人工繁育品種和野生蟲草均符合藥典規定的冬蟲夏草中腺苷含量的質量標準；而蟲草中另一種主要的生物堿成分脲苷的含量在人工繁育品種和野生品種間無明顯差異。結果見表1。

表1 腺苷、脲苷含量測定結果 %

2.3 重金屬檢測

2.3.1 檢測方法 根據《中國藥典》（2015 年版）四部通則2321 鉛、鎘、砷、汞、銅中B 法進行樣品處理及檢測［7］。

2.3.3 檢測結果 如表2 所示，人工繁育冬蟲夏草的重金屬砷（As）含量為0.4 mg/kg，符合藥典規定，而來自青海、四川、西藏加查和西藏江達的野生冬蟲夏草As 檢測含量均超出藥典標準2.0 mg/kg；人工繁殖冬蟲夏草重金屬Pb、Cu 均低于青海野生冬蟲夏草；西藏加查草重金屬Pb、Cu 低于人工繁殖冬蟲夏草；人工繁殖冬蟲夏草重金屬Hg、Cd 與四個不同產地的野生蟲草無明顯差異。

表2 冬蟲夏草重金屬檢驗結果 mg/kg

2.4 農藥殘留檢測

2.4.1 檢測方法 根據《中國藥典》（2015 年版）四部通則2341 農藥殘留量測定法第一法進行9 種有機氯農藥殘留量測定法樣品處理及檢測。

2.4.2 檢測結果 人工繁育冬蟲夏草和來自青海、四川、西藏加查、西藏江達的野生蟲草中均未檢出六六六、滴滴涕、五氯硝基苯，因此農藥殘留項均符合藥典規定

3 討論

從實驗結果可知，人工繁育冬蟲夏草與來自青海、四川、西藏等地的野生冬蟲夏草在外觀性狀、有效成分含量及農藥殘留檢測方面并無明顯差異，均符合藥典規定；而人工繁育冬蟲夏草重金屬Pb 和Cu 的檢測結果明顯低于來自青海的野生蟲草，且人工蟲草重金屬As 的檢測結果更是遠低于來自4 個產地的野生品蟲草。查閱文獻也有人工培育冬蟲夏草重金屬檢驗結果優于野生冬蟲夏草的論述［8］。

實驗表明，人工繁育的冬蟲夏草與野生冬蟲夏草按藥典標準檢測性狀、有效成分含量和農藥殘留無明顯質量差異，同時人工繁育的冬蟲夏草可以更有效的控制重金屬等危害物質的含量，提高冬蟲夏草使用的安全性。另一方面，目前野生冬蟲夏草為珍貴稀缺藥材，人工繁育品的出現可以補足市場空缺，同時避免過度采挖蟲草而造成高原生態環境的破壞。本次實驗結果為使用人對冬蟲夏草購買提供參考、為冬蟲夏草有害物質控制提供方向，同時也為進一步對人工繁育蟲草的質量研究做了鋪墊。由于本次實驗樣品較少，今后還將進一步對人工繁育冬蟲夏草進行深入研究。