Wnt5a、β-catenin 在乳腺浸潤性癌組織中的表達研究

朱影玲

在婦科疾病中乳腺癌是一種較為常見的惡性腫瘤疾病,其發病率相對較高且逐漸呈現年輕化趨勢［1］。乳腺癌主要是由多因素導致,是一個多步驟、多因素及信號通路失活或者異常激活等較為復雜的過程［2］。Wnt 信號通路在參與機體生長發育期間,還在細胞的分化、增殖以及粘附等過程中參與,在腫瘤的發生及發展過程中發揮至關重要的作用［3］。Wnt5a 等分子與細胞膜受體結合組成了Wnt 信號中的非經典通路,并通過相應的信號通路將信號傳遞至細胞核內,進而參于腫瘤的發生及發展［4］。此外,Wnt5a 還能夠經由其他機制對經典信號通路Wnt/β-catenin 進行有效調控,從而發揮其抑癌功能。本研究通過對乳腺浸潤性癌中的Wnt5a、β-catenin 表達情況進行檢測,從而探討其臨床意義,報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018 年1～12 月本院的104 份乳腺浸潤性癌組織作為研究樣本,研究樣本患者年齡33～75 歲,平均年齡(57.6±8.2)歲；臨床TNM 分期：Ⅰ期23 例,Ⅱ期17 例,Ⅲ期～Ⅳ期64 例；組織學分級：Ⅰ級17 例,Ⅱ級66 例,Ⅲ級21 例。另選取54 份正常乳腺組織(距離癌組織5 cm)標本作為正常對照標本。所有患者術前均未接受放療及化療等針對性治療,且均知情并同意本研究。

1.2 研究方法 利用免疫組化法對Wnt5a、β-catenin表達情況進行檢測,具體為：利用免疫組化法將石蠟組織制作成4μm 的切片標本,并經二甲苯梯度脫蠟、梯度乙醇脫苯直至水化,再進行相應的熱修復抗原,之后進行免疫組化染色。最終結果評估由2 名經驗豐富的病理醫師對所有染色切片經重讀閱讀后對其結果進行評估判定,免疫組化陽性：依據相應的染色面積對結果進行評分,若≤5%則為0 分,5%～24%則為1 分,25%～49%為2 分,50%～74%為4 分；之后依據著色強度進行相應的分別評估,著色較弱為1 分,中為2 分,著色較強為3 分,其中總分=著色強度×染色面積,若其總分≥5 分則為高表達,反之則為低表達。

1.3 觀察指標 記錄并比較兩種組織中Wnt5a 及β-catenin 表達陽性率；記錄并比較乳腺浸潤性癌組織中Wnt5a 及β-catenin 表達陽性率在各臨床指標中分布情況,臨床指標包含患者年齡、組織學分級、TNM 分期以及是否淋巴結轉移。

1.4 統計學方法 采用SPSS18.0 統計學軟件對數據進行處理。計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩種組織中Wnt5a 及β-catenin 表達陽性率比較 乳腺浸潤性癌組織中Wnt5a 表達陽性率27.9%低于正常乳腺組織的75.9%,而β-catenin 表達陽性率66.3%高于正常乳腺組織的14.8%,差異具有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩種組織中Wnt5a 及β-catenin 表達陽性率比較［n(%)］

2.2 乳腺浸潤性癌組織中Wnt5a 及β-catenin 表達陽性率在各臨床指標中分布情況比較 不同TNM 分期及是否淋巴結轉移患者的乳腺浸潤性癌組織中Wnt5a及β-catenin 表達陽性率比較,差異均有統計學意義(P<0.05)；不同年齡及組織學分級患者的乳腺浸潤性癌組織中Wnt5a 及β-catenin 表達陽性率比較,差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 乳腺浸潤性癌組織中Wnt5a 及β-catenin 表達陽性率在各臨床指標中分布情況比較(%)

3 討論

在目前的臨床研究中,大多認為腫瘤的發生與Wnt/β-catenin 經典通路緊密相關。部分學者認為,乳腺癌中存在的β-catenin 基因突變情況可能導致β-catenin 異常聚集情況出現,進而加劇乳腺癌的發生及發展［5］。在本研究中：乳腺浸潤性癌組織中Wnt5a 表達陽性率27.9%低于正常乳腺組織的75.9%,而β-catenin 表達陽性率66.3%高于正常乳腺組織的14.8%,差異具有統計學意義(P<0.05)。說明Wnt5a 及β-catenin 在乳腺癌的發生及發展中具有重要作用,其中Wnt5a 具有顯著的抑癌功能。此外,本研究顯示：不同TNM 分期及是否淋巴結轉移患者的乳腺浸潤性癌組織中Wnt5a 表達陽性率比較,差異均有統計學意義(P<0.05)；不同年齡及組織學分級患者的乳腺浸潤性癌組織中Wnt5a 表達陽性率比較,差異無統計學意義(P>0.05)。說明乳腺癌組織中Wnt5a 表達情況越低,其乳腺癌病變程度則相對較高,淋巴結轉移的發生率也相對較高。因此,通過提升機體組織內Wnt5a 表達,對于乳腺癌細胞的遷移、增殖、轉移及侵襲等惡性生物過程均有顯著的抑制功能［6,7］。在Wnt 經典通路中β-catenin 是其主要的核心蛋白,并能夠有效促進癌細胞的遷移侵襲及增殖等,并能夠明顯阻斷癌細胞凋亡［8］。據相關研究證實,β-catenin 的基因突變表達量異常以及表達部位的改變等均與乳腺癌的臨床分期及淋巴結轉移等情況相關［9］。在本研究也證實了這一觀點。本研究經過對β-catenin 與臨床參數的比較顯示：不同TNM 分期及是否淋巴結轉移患者的乳腺浸潤性癌組織中β-catenin 表達陽性率比較,差異均有統計學意義(P<0.05)；不同年齡及組織學分級患者的乳腺浸潤性癌組織中β-catenin 表達陽性率比較,差異無統計學意義(P>0.05)。由此可見,乳腺浸潤性癌患者中的β-catenin 高表達情況有效促進了乳腺浸潤性癌的發展以及淋巴結轉移,對患者身體健康及預后產生嚴重影響。此外,經相關研究顯示,乳腺浸潤性癌組織中Wnt5a 表達與β-catenin 表達呈現負相關性。Wnt5a 通過將Wnt 非經典途徑的Wnt/Ca2+信號通路進行有效激活,進而對β-catenin 與TCF/LEF1 結合情況進行負性調控,從而將經由β-catenin 介導的Wnt 經典信號途徑進行有效阻斷［10,11］。在目前的臨床研究中證實,重組的Wnt5a 經過與順鉑聯合或者單獨使用均對舌鱗狀細胞癌細胞增殖情況具有顯著的抑制功能,從而誘導細胞凋亡,進而達到對患者進行治療的效果［12］。Wnt5a是將Wnt 經典與非經典通路進行有效聯接的關鍵蛋白,通過對Wnt5a 進行針對性的靶向治療是以后對乳腺癌患者進行治療的新思路。

綜上所述,在乳腺浸潤性癌組織中Wnt5a 呈低表達,而β-catenin 呈現高表達,兩者在乳腺癌的發生及發展中均有參與,聯合檢測有助于治療方案的準確實施,利于患者預后。