血清S100B蛋白在新生兒缺氧缺血性腦病中的應用

黃小玲 林躍清 周冰新 沈斐敏

福建醫科大學附屬漳州市醫院新生兒科，福建漳州 363000

新生兒缺氧缺血性腦病（hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE）屬于新生兒常見疾病之一，其主要病因為各種因素引起的圍生期缺氧窒息，使新生兒腦部缺氧、腦部血流量減少，導致胎兒或新生兒不同程度的腦損傷[1-3]。該病的病死率和致殘率都比較高[4]，嚴重者可能出現生長發育落后、智能低下、情感障礙、行為異常甚至癲癇、腦癱等后遺癥[5-6]，近年來關注的重點在于HIE患兒早期腦損傷程度的判斷及預后的評估，以利于及早進行臨床干預，降低傷殘率，減少后遺癥的發生。目前HIE的診斷及輕重程度的判斷主要是根據病史、臨床表現和影像學表現，如頭顱CT或磁共振成像（MRI），臨床表現易受主觀因素的影響，頭顱CT 及MRI 雖然存在客觀性，但不宜早期床邊檢查監測，且對HIE 早期預測的靈敏度也有局限性[7]，不利于及時判斷病情及動態監測病情的變化；治療方面，主要是藥物的支持、對癥處理，嚴重者采用亞低溫、干細胞等治療改善HIE的預后[8-9]，但由于病情嚴重程度的判斷沒有生化指標，臨床上常常不能及時有效地對患兒進行個體化評估，因此個體化治療很難進行[10]，直接影響治療效果和預后，故臨床上需要一個客觀、早期的指標來反映HIE的病情及預后。有研究報道，血清S100B蛋白濃度的升高與腦損傷程度及預后緊密相關[11]。本研究分析血清S100B蛋白濃度在不同程度HIE患兒中的差異及臨床意義，為HIE的早期診斷、早期干預提供依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1～12月我院新生兒科收治的150例HIE患兒作為試驗組，根據出生時評分、生后意識障礙、肌張力異常、原始反射異常、顱內壓升高情況、腦干癥狀等臨床表現及出生72 h后頭顱CT或MRI結果將其分為重度HIE組（40例），中度HIE組（50例），輕度HIE組（60例）、選取同期正常健康足月新生兒60例作為對照組，均無缺氧窒息、出血、感染、遺傳代謝及神經系統疾病等病史，其母孕期健康分娩過程無異常。對照組中，男28例，女32例；胎齡（38.4±0.7）周；體重（3254±347）g。輕度HIE組中，男33例，女27例；胎齡（38.5±0.9）周；體重（3240±383）g。中度HIE組中，男27例，女23例；胎齡（38.4±0.8）周；體重（3205±398）g。重度HIE組中，男21例，女19例；胎齡（38.5±0.6）周；體重（3226±402）g。各組的一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。所有患兒家屬均對本研究知情且簽署知情同意書。

1.2 納入與排除標準

納入標準：①所有患兒均符合邵肖梅主編的第5版《實用新生兒學》對新生兒HIE的診斷標準[12]；②患兒均于出生后24 h 內入住我科。

排除標準：①患先天性代謝性者；②先天畸形者；③神經系統發育異常者；④感染性疾病者；⑤產傷所致的顱內出血者；⑥不能堅持隨訪12個月者。

1.3 觀察指標及檢測方法

試驗組患兒于出生后第1、3、7天采股靜脈血2 ml，標本用離心機離心（3000 r/min，15 min），保留血清500 μl 于-80℃低溫冰箱中保存待測S100B蛋白。標本溶血者除外。標本采集期間均無感染、低蛋白血癥。重癥高膽紅素血癥等合并癥、對照組足月新生兒于出生后第1天采股靜脈血2 ml，離心、低溫處理同試驗組、儀器使用Multiskom Ascent型號酶標儀，B600D型高速離心機，37℃恒溫孵育箱（芬蘭雷博公司）、S100B蛋白采用酶聯免疫吸附測定（ELISA）試劑盒（Adlitteram Diagnostic Laboratories，Inc.，美國）檢測。

1.4 隨訪

所有HIE患兒采用電子信息聯系及定期門診復診等方法完成隨訪，1～2個月隨訪1次，隨訪12個月。隨訪內容主要包括聽力篩查、視力篩查及智能測試，智能測試根據Gesell 發育量表的評估結果，將發育商（DQ）<85分者分為有后遺癥組，DQ≥85分者分為無后遺癥組。

1.5 統計學方法

采用SPSS 18.0 統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（±s）表示，符合正態分布的采用獨立樣本t 檢驗或單因素方差分析，非正態分布資料采用Mann-Whitney U 檢驗；計數資料用率表示，兩組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組出生后不同時間血清S100B蛋白濃度的比較

三組HIE患兒出生后第3、7天的血清S100B蛋白濃度均高于出生后第1天，差異有統計學意義（P<0.05）。三組HIE患兒出生后第1天的血清S100B蛋白濃度均高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。重度HIE組患兒出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白濃度均高于中度HIE組和輕度HIE組，差異有統計學意義（P<0.05）；中度HIE組患兒出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白濃度均高于輕度HIE組，差異有統計學意義（P<0.05）（表1）。

表1 各組出生后不同時間血清S100B蛋白濃度的比較（ng/ml，±s）

表1 各組出生后不同時間血清S100B蛋白濃度的比較（ng/ml，±s）

與本組出生后第1天比較，aP<0.05；與對照組同期比較，bP<0.05；與輕度HIE組同期比較，cP<0.05；與中度HIE組同期比較，dP<0.05；“-”表示無數據

組別例數 出生后第1天 出生后第3 天 出生后第7天對照組輕度HIE組中度HIE組重度HIE組60 60 50 40 4.61±1.68 9.08±3.02b 14.35±5.53bc 21.02±5.32bcd--6.34±2.69a 9.16±2.81ac 14.07±3.36acd 4.61±1.47a 6.75±2.02ac 9.15±1.71acd

2.2 有、無后遺癥組患兒出生后不同時間血清S100B蛋白濃度的比較

隨訪12個月后的HIE患兒中，有41例患兒出現后遺癥，其中腦癱6例，癲癇5例，聽力障礙、視力障礙、智力低下、生長發育落后（DQ<85分）30例。有后遺癥組患兒出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白濃度均高于無后遺癥組，差異有統計學意義（P<0.01）（表2）。

表2 有、無后遺癥組患兒出生后不同時間血清S100B蛋白濃度的比較（ng/ml，±s）

表2 有、無后遺癥組患兒出生后不同時間血清S100B蛋白濃度的比較（ng/ml，±s）

組別例數 出生后第1天 出生后第3 天 出生后第7天有后遺癥組無后遺癥組t值P值41 109 19.37±5.43 10.71±3.94 10.65<0.01 12.27±3.18 7.15±2.76 9.63<0.01 7.87±1.91 5.13±0.83 12.06<0.01

3 討論

新生兒HIE 可導致患兒智力發育遲緩、生長發育落后等后遺癥，影響患兒的生活質量，目前臨床上缺乏敏感的實驗室指標，對于病情嚴重程度的評估也缺乏必要的客觀性指標[13-14]。相關研究顯示，血液中存在著某些生物標志物與HIE的發生發展密切相關，可以用來早期預測HIE的發生、早期判斷腦損傷的輕重[15]，其中報道較多的是S100B蛋白。

S100B蛋白廣泛存在于哺乳動物的中樞神經系統，屬于鈣離子結合蛋白，亦被認為是鈣傳感器蛋白，多通過與鈣結合發揮其生理作用，可100%溶解于中性飽和硫酸銨，是神經系統的特異性蛋白之一，主要分布于中樞神經系統的神經膠質細胞，周圍神經系統的雪旺氏細胞中亦多見。S100B蛋白產生后作用于神經元及其生長環境、在人體腦組織內S100B蛋白主要由腦內的神經膠質細胞產生，與人體各組織相比，其在腦組織的濃度最高，S100B蛋白的排泄主要通過腎臟，臨床上主要考慮腦脊液標本留取對患兒損傷大，且HIE患兒往往尿較少，不易留取尿液標本，故血液標本最常用、通常健康者血清S100B蛋白濃度很低，當腦損傷發生時，腦脊液中S100B蛋白的濃度升高，腦損傷同時可破壞血腦屏障，使其通透性增加，S100B蛋白從腦脊液進入血液[16]，從而導致血液中S100B蛋白濃度升高，因此，在神經系統損傷早期、影像學未出現異常且臨床上尚未出現相應癥狀體征時，可以通過檢測血液中的S100B蛋白濃度來預測，并且可作為判斷腦損傷程度的指標。本研究結果顯示，三組HIE患兒出生后第1天的血清S100B蛋白濃度均高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05），提示S100B蛋白參與了HIE 腦損傷過程。本研究結果還顯示，三組HIE患兒出生后第3、7天的血清S100B蛋白濃度均高于出生后第1天，差異有統計學意義（P<0.05）；重度HIE組患兒出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白濃度均高于中度HIE組和輕度HIE組，差異有統計學意義（P<0.05）；中度HIE組患兒出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白濃度均高于輕度HIE組，差異有統計學意義（P<0.05）；有后遺癥組患兒出生后第1、3、7天的血清S100B蛋白濃度均高于無后遺癥組，差異有統計學意義（P<0.01），與吳松笛等[17]的大鼠缺血再灌注實驗結果相一致，提示S100B蛋白參與了HIE的發病過程，且在早期濃度已明顯升高，其用于早期診斷HIE及早期評估預后的敏感性強，HIE 病情較輕者或者病情漸恢復則其濃度下降，原因是S100B蛋白的半衰期短，若血清中S100B蛋白持續升高或下降后再升高，則應注意可能是在原本腦損傷的基礎上又發生其他腦損傷。

綜上所述，通過本研究對HIE患兒血清S100B蛋白濃度的早期檢測及動態觀察，血清中S100B蛋白濃度與HIE患兒腦損傷程度的輕重及HIE 預后的評估有較高的臨床實用價值，值得臨床推廣和應用。