空氣微粒計數法在層流潔凈手術間空氣微生物濃度監測中的應用與分析

□ 馬玲飛 MA Ling-fei 王海紅 WANG Hai-hong 侯偉 HOU Wei

Objective To explore the application value of air particle counting method in the monitoring of air microbial concentration in laminar flow clean operating room. Methods Six clean laminar flow operating rooms in a tertiary hospital of Zhejiang Province from March 2018 to March 2019 were selected as monitoring objects. Four of them were Class I laminar flow clean operating rooms and two were Class III. The air particles were the detection targets, and the air particle counting method was used to evaluate the air microbial concentration in the laminar flow clean operating room. The correlation between the diameter of air particles and the concentration of microbes was analyzed using Pearson correlation analysis. Results The results of 23 tests of the air microbes in the laminar flow clean operating rooms showed that the qualified rate of air quality was 88.24% (15/17). The numbers of air particles were 0～3544/L and 0～2083/L for the diameter of≥0.3μm and 0.5μm, respectively. the numbers of air particles with diameter of ≥0.3μm,≥0.5μm, ≥2.0μm, ≥5.0μm were positively correlated to the number of microbes (r=0.719, 0.738, 0.727, 0.736, p＜0.001). Conclusion The air particle counting method has a high application value in the monitoring of air microbial concentration in the laminar flow clean operation room. The monitoring results are basically consistent with the results of the sedimentation method. The number of microbes in the air can be estimated from the number of air particles, which is beneficial for dynamically monitoring the air microbial concentration in the operating room.

手術間是院內感染高發場所，積極控制或減少手術間相關院 內感染發生，對確保手術效果和改善患者預后具有重要意義。研究指出，手術間空氣中微生物污染是導致手術間相關醫院感染的主要原因[1]。空氣中微生物含量較多，術中菌落定植在手術創面，可引起院內感染。實際工作中，難以做到空氣的絕對無菌，僅能減少空氣中微生物含量，進而減少醫院感染的發生[2]。目前，層流凈化方式被逐漸應用于醫療機構的手術間和部分特殊病房的空氣凈化，采用特殊空氣過濾裝置過濾空氣中的塵埃，減少空氣中的微生物含量。常規情況下，百級層流潔凈手術間可滿足普通手術相關無菌要求[3]。但實際工作中，因醫護人員流動，會直接影響手術間空氣的潔凈度，增加空氣中微生物含量。因此，密切監測手術間空氣中微生物含量對控制醫院感染十分重要[4]。基于此，本研究對空氣微粒計數法在層流潔凈手術間空氣微生物監測中的應用效果進行分析，為臨床快速評估層流潔凈手術間空氣質量提供理論依據。

資料與方法

1.一般資料。選擇2018年3月至2019年3月浙江省某三甲醫院6間層流潔凈手術間作為監測對象，其中4間為Ⅰ級層流潔凈手術間，2間為Ⅲ級層流潔凈手術間。采用自然沉降法，用普通營養瓊脂培養基平板(直徑9cm)進行采樣，通過空氣激光微粒計數檢測儀檢測其空氣中微生物濃度，并對結果進行分析。共采樣17次，層流潔凈手術間平均溫度為23.20℃，平均濕度為52.50%。

2.方法

2.1 檢測前準備。徹底清潔手術間，在采樣前30分鐘，將層流凈化系統開啟，維持手術間內溫度在20℃～25℃，控制相對濕度在40%～60%。于靜態且無人狀態下，由專業檢測人員采樣，要求穿無菌手術衣，戴口罩和帽子。

2.2 采樣點。依據GB50333-2013《醫院潔凈手術部建筑技術規范》相關要求準確設定采樣點。

2.3 微生物濃度檢測。(1)自然沉降法：利用普通營養瓊脂平板(直徑9cm)于采樣點暴露0.5小時后，立即將培養皿送至實驗室培養箱內培養，培養箱溫度為36℃±1℃，對培養結果進行觀察，對平板上菌落數進行計數。(2)空氣激光微粒計數檢測：通過空氣激光微粒計數檢測儀，在上述相同采樣點將激光微粒檢測儀啟動，分別對空氣中微粒直徑≥0.3μm、≥0.5μm、≥2μm、≥5μm相關微粒數(個/L)進行讀取。

2.4 層流潔凈手術間空氣質量檢測合格標準：Ⅰ級層流潔凈手術間手術區域空氣中微生物濃度＜0.009cfu/(30min·Φ90皿)；周邊區域空氣中微生物濃度＜0.239cfu/(30min·Φ90皿)。Ⅲ級層流潔凈手術間手術區域空氣中微生物濃度＜0.031cfu/(30min·Φ90皿)；周邊區域空氣中微生物濃度＜0.848cfu/(30min·Φ90皿)。空氣檢測合格率=空氣檢測合格次數/空氣檢測總次數×100%。

2.5 層流潔凈手術間空氣中微粒數監測合格標準：Ⅰ級層流潔凈手術間手術區域空氣中微粒數＜20個/L (直徑≥0.3μm)；周邊區域空氣中微粒數＜200個/L (直徑≥0.3μm)。Ⅲ級層流潔凈手術間手術區域空氣中微粒數＜70個/L (直徑≥0.3μm)；周邊區域空氣中微粒數＜400個/L (直徑≥0.3μm)。

3.統計學方法。采用SPSS20.0統計學軟件進行數據分析，計數資料用率和百分比表示，采用χ2檢驗，計量資料用()表示，采用t檢驗，采用Pearson相關性分析法，分析手術間空氣中微粒直徑與微生物濃度的相關性，以p＜0.05表示差異有統計學意義。

結果

1.層流潔凈手術間空氣中微生物濃度及空氣質量合格率。6間手術間共檢測17次，其中2次空氣中微生物濃度檢測結果顯示不合格，而不合格手術間的手術區域、周邊區域空氣中平均微生物濃度分別是2.19cfu/(30分鐘·Φ90皿)、2.76cfu/(30分鐘·Φ90皿)。層流潔凈手術間空氣中微生物濃度的17間次監測結果，手術間空氣質量檢測合格率為88.24% (15/17)，檢測結果見表1。

表1 手術間空氣中微生物濃度檢測情況

2.微粒數檢測結果。層流潔凈手術間空氣中微粒直徑≥0.3μm、≥0.5μm的微粒數分別是0～3544個/L、0～2083個/L，見表2。

表2 手術間空氣中微粒數檢測情況

3.微生物濃度與微粒直徑相關性。Pearson相關性分析結果顯示，直徑≥0.3μm、≥0.5μm、≥2.0μm、≥5.0μm 的微粒與微生物濃度均呈正相關(r=0.719、0.738、0.727、0.914，p＜0.001)，見表 3。

表3 手術間空氣中微粒直徑與微生物濃度的相關性

討論

手術間空氣中微生物是引發手術間相關感染的主要原因，且空氣中微生物濃度與院內感染風險呈正相關。故空氣中微生物濃度監測、切口感染防治，確保潔凈手術間空氣質量是保證醫療質量，預防院內感染的關鍵措施之一[5]。層流潔凈手術間通過層流凈化系統能將室外新風適當引入高效過濾裝置并呈流線型等速流過手術間后再流出[6]。相關研究發現，層流凈化系統能經過濾器過濾室外空氣中微生物、顆粒，避免室內產生的微生物、塵粒擴散至四周，使室內微生物、塵粒隨氣流排出手術間，確保層流潔凈手術間的空氣質量[7-8]。但因手術間中操作人員和參觀人員較多、頻繁流動，導致手術間空氣中微生物濃度增加，影響手術間空氣凈化。而監測空氣中微生物濃度，并依據監測結果加強相應管理，能明顯提高手術間空氣質量[9-10]。

研究表明，依據GB50333-2013《醫院潔凈手術部建筑技術規范》相關要求，所有醫療機構均需將潔凈手術間空氣質量視作常規監測項目，準確設定采樣點[11]。依據GB15982-2012《醫院消毒衛生標準》提出的微生物指標要求實施監測，但因微生物濃度監測耗時長，手術間空氣中微生物監測結果通常需要24小時以上獲得，故認為根據微生物采樣結果監測手術間空氣中微生物濃度，醫師不能及時而準確地判斷當天手術患者院內感染相關性。相關研究提出，相較于微生物采樣方法，利用粒子測量系統監測潔凈手術間空氣中微生物濃度、顆粒計數能幫助臨床醫師預測手術間空氣中微生物污染狀況[12]。本研究結果顯示，6間手術間共檢測17間次，其中2間次空氣中微生物濃度檢測結果不合格，手術間空氣質量檢測合格率為88.24% (15/17)。說明空氣微粒計數法在層流潔凈手術間空氣微生物濃度監測中具有較高的應用價值。而分析層流潔凈手術間空氣中微粒直徑≥0.3μm、≥0.5μm、≥2.0μm、≥5.0μm 微粒數相應微生物濃度變化情況發現，微粒數與微生物濃度存在顯著相關性，其中直徑≥0.5μm微粒相關性最強。提示通過空氣微粒計數法分析層流潔凈手術間空氣中微粒數、微粒直徑，能反映空氣中微生物濃度，即隨著空氣中微粒直徑增加、微粒數升高，提示空氣中微生物濃度增高。

綜上所述，空氣微粒計數法用于層流潔凈手術間空氣微生物濃度監測中的應用價值高，其監測結果和采用沉降法基本一致，能通過監測層流潔凈手術間空氣中微粒數，對空氣中微生物數進行推測，利于動態監測手術間空氣中微生物濃度，故有較高的可行性。