免疫固定電泳聯合游離輕鏈檢測對多發性骨髓瘤的診斷價值

胡玉皎，郝曉柯，程曉東，周鐵成，張 瑩，胡娟娟，劉家云

空軍軍醫大學西京醫院檢驗科，陜西西安 710032

單克隆漿細胞出現惡性增殖，同時單克隆免疫球蛋白分泌過多被稱為多發性骨髓瘤，而患者不產生單克隆免疫球蛋白則稱為未分泌型多發性骨髓瘤，該情況發生率較低。多發性骨髓瘤屬于惡性腫瘤的一種，主要是由于骨髓內單一漿細胞株異常增生導致的[1],其主要臨床特點為易出現貧血、感染和骨質破壞，而造成以上情況發生的主要原因是正常多克隆漿細胞出現過量分泌，嚴重阻礙多克隆免疫球蛋白分泌[2]。根據相關統計結果顯示，在我國每10萬人有2～3人為多發性骨髓瘤，女性的發生率低于男性，占比約為1∶1.6，其中40歲以上的患者為該疾病的高發人群[3]。多發性骨髓瘤早期并無明顯的表現，且起病較為緩慢，其臨床表現多為淀粉樣變、感染、貧血、神經癥狀、骨痛、高鈣血癥、腎功能不全等，由于無確切的臨床表現，易造成漏診、誤診，而錯過最佳治療時間，給治療增加困難[4]。因此，及早確診對多發性骨髓瘤的治療尤為重要，本研究探討采用免疫固定電泳聯合游離輕鏈檢測對多發性骨髓瘤的診斷價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2017年7月1日至2019年5月16日來本院治療的多發性骨髓瘤患者836例為研究組，其中男506例，女330例，年齡42～79歲，平均(61.4±5.4)歲。研究組的納入標準：(1)所有多發性骨髓瘤患者均符合《中國多發性骨髓瘤診治指南 (2020 年修訂)》[5]的診斷標準；(2)患者神志清晰，無精神疾病，可進行正常溝通交流；(3)患者對此次研究均知情且同意；(4)患者年齡在40～80歲。研究組排除標準：(1)患有腎臟或其他嚴重疾病；(2)患有傳染性或皮膚疾病；(3)處于昏迷狀態或患有精神疾病，無法進行溝通交流；(4)患者依從性較差或拒絕參與此次研究。收集同期本院體檢健康者80例作為對照組，其中男48例，女32例，年齡41～80歲，平均(61.2±5.6)歲。對照組納入標準：(1)患者均為健康人群；(2)年齡在40～80歲。對照組排除標準：拒絕參與此次研究。

1.2方法

1.2.1患者血清總蛋白的檢測 收集2組研究者的晨起空腹靜脈血3～5 mL，室溫靜置30 min，隨后分離血清，防止溶血及脂血情況的發生，使用日立7600全自動生化分析儀對參與此次研究者的血清總蛋白水平進行檢測。陽性判斷標準：總蛋白水平≥85 g/L[5]。

1.2.2儀器與試劑 使用SEBIA CAPIA Arys 2毛細管電泳儀行血清蛋白電泳檢測。使用SEBIA Hydrasys 2 Scan全自動電泳儀及配套試劑進行血清免疫固定電泳檢測。使用日立7600全自動生化分析儀和英國Binding Site 游離λ/κ輕鏈檢測試劑盒(免疫比濁法)，嚴格按照儀器和試劑說明書進行操作。嚴密監測室內質控，確保檢測當日室內質控均在控。

2 結 果

2.1多發性骨髓瘤患者血清免疫固定電泳結果 836例多發性骨髓瘤患者血清免疫固定電泳分型結果顯示，IgG型462例，其中κ型273例，λ型189例；IgA型223例，其中κ型122例，λ型101例；IgM型40例，均為λ型；游離輕鏈型111例，其中κ型22例，λ型89例。

2.2比較2組研究者血清免疫球蛋白水平 研究組患者IgG型人群的IgG水平明顯高于其他人群，IgA型人群的IgA水平明顯高于其他人群，IgM型人群的IgM水平明顯高于其他人群(P<0.05)。見表1。

表1 2組研究者血清免疫球蛋白水平比較

2.3M蛋白檢出患者血清游離輕鏈結果 研究組κ型患者的κ輕鏈水平、κ/λ值與對照組比較，差異有統計學意義(P<0.05)，研究組λ型患者的λ輕鏈水平、κ/λ值與對照組比較，差異有統計學意義(P<0.05)，對照組人群的κ輕鏈、λ輕鏈水平、λ/κ值與未檢出M蛋白的多發性骨髓瘤患者比較，差異有統計學意義差(P<0.05)。見表2。

表2 M蛋白檢出患者血清游離輕鏈結果[M(P25～P75)]

3 討 論

多發性骨髓瘤是單克隆的漿細胞惡性增殖性疾病，該疾病對漿細胞進行單克隆，而結構均一的單克隆免疫球蛋白主要是由增生的漿細胞產生[6]。多發性骨髓瘤患者根據體質的不同，臨床表現也不一樣，本研究的836例多發性骨髓瘤患者主要是由于出現腎功能不全、反復感染、骨折、貧血、蛋白尿、發燒、腰腿痛等一種或多種癥狀而到本院就診[7]。通過骨髓檢查、免疫固定電泳、免疫球蛋白定量、游離輕鏈檢測等確診為多發性骨髓瘤[8]。根據相關研究結果顯示，判斷患者是否為多發性骨髓瘤及治療后的復發、預后情況，可依據患者的血清、尿液電泳和免疫固定電泳、游離輕鏈檢測等結果[9]。本研究結果顯示，IgG型462例，其中κ型273例，λ型189例；IgA型223例，其中κ型122例，λ型101例；IgM型40例，均為λ型；游離輕鏈型111例，其中κ型22例，λ型89例，與相關研究結果無明顯差異[9]。

免疫固定電泳是抗體反應、電泳技術與抗原相結合，該技術結合了單克隆抗體的靈敏度及特異度，同時，具備蛋白質電泳的高分辨率分離技術，因此，具有結果判讀直觀、特異度強、分辨率及靈敏度高的特點[10]。根據報道結果顯示，免疫固定電泳在對單克隆球蛋白進行檢測時其檢出量在6～10 mg/L，診斷的靈敏度在93%以上，同時對M蛋白的免疫球蛋白性質也可以準確檢測出來，是目前臨床上對M蛋白檢測及對其進行免疫化學鑒別的“金標準”[11]。本研究結果顯示，研究組患者IgG型人群的IgG水平明顯高于其他人群，IgA型人群的IgA水平明顯高于其他人群，IgM型人群的IgM水平明顯高于其他人群(P<0.05)。

多發性骨髓瘤患者的免疫球蛋白出現漿細胞惡性增生，導致M蛋白水平異常增高，通過反饋機制對正常免疫球蛋白的合成進行抑制，造成多發性骨髓瘤患者的抵抗力顯著降低，進而使患者出現反復感染和發燒等臨床表現。免疫固定電泳是目前臨床上較為有效的對M蛋白及分型快速分離和鑒別的方法，該方法具有較高的準確度、靈敏度和特異度，對多發性骨髓瘤的分型、預后情況及臨床治療效果都有重要意義[12]。

本研究結果顯示，研究組κ型患者的κ輕鏈水平、κ/λ值與對照組比較，差異有統計學意義(P<0.05)，研究組λ型患者的λ輕鏈水平、κ/λ值與對照組比較，差異有統計學意義(P<0.05)，對照組患者的κ輕鏈、λ輕鏈水平、κ/λ值與未檢出M蛋白的多發性骨髓瘤患者比較，差異有統計學意義(P<0.05)。在進行免疫固定電泳的基礎上聯合游離輕鏈檢測可以明顯提高檢出率，同時將漏診、誤診的概率降低。若患者在進行免疫固定電泳檢測時未被檢測出，則λ輕鏈、κ輕鏈水平或κ/λ值上會出現相應的提示，所以，在對患者進行免疫固定電泳聯合游離輕鏈檢測時，若其中一種檢測結果為陽性則可提示單克隆免疫球蛋白疾病，同時進行骨骼的X線、核磁共振成像、CT及骨髓穿刺等更進一步的檢查，以使檢出率提高，從而降低漏診率。在臨床上對于多發性骨髓瘤的診斷，免疫固定電泳和游離輕鏈檢測均具有重要的價值，聯合檢測意義尤為突出。

目前，臨床試驗主要采用免疫固定電泳對M蛋白進行檢測，尤其是對M蛋白進行分型的意義較為突出，也可進一步篩查血清蛋白電泳異常和球蛋白增高的患者，可有效縮短多發性骨髓瘤的診斷時間。