咽拭子核酸檢測的那些疑惑

應雨妍

● 樣本是如何采集的

在進行咽拭子核酸檢測時，采樣人員一般會讓大家微微仰頭，張大嘴巴。然后，他們會用一根長棉簽在雙側扁桃體和舌根后較深處的咽后壁刮擦采樣。采集結束之后，采樣人員會把棉簽放進有采樣液的采樣管里，然后擰緊蓋子。過程非常簡單，受試者可能會有干嘔、咳嗽的反應，不過采集結束后很快就可以恢復。

● 為什么使用咽拭子

核酸檢測可以采集的部位或分泌物有很多，如鼻咽部位、支氣管和肺泡灌洗的灌洗液、痰液和血液。那么，為什么要采用咽拭子核酸檢測呢？

在這些方法中，血液通常不大能檢測出新冠病毒。血液能檢測到的是身體針對新冠病毒產生的抗體，但產生抗體只能說明受試者感染過病毒，不能判斷他目前是否是感染者。而且抗體的產生需要時間，在感染之初，可能無法檢測到抗體的存在。因此，用血液樣本進行篩查是不可行的。

其余的幾種方法中，支氣管和肺泡灌洗液的敏感性最高，可以達到93%;痰液樣本稍弱，為72%。通俗地說，敏感性評判的是檢測方法準確判斷感染者的成功率，93%就相當于在100個感染者中，通過支氣管和肺泡灌洗液檢測可以成功發現93個。

但這三種方法顯然都更適合已經確診且住院的患者，而且采樣人員需要更高級別的安全防護，對于大規模的篩查來說并不太現實。根據研究，新冠病毒的受體ACE2在上皮細胞和平滑肌細胞上有豐富的表達，在上呼吸道（包括鼻、咽、喉部）中，病毒有很高的復制水平。因此，鼻拭子和咽拭子提取的上呼吸道上皮細胞和分泌物中可以捕捉到病毒。

很多人在網上看過鼻拭子采集示意圖。進行鼻拭子采集時，采樣人員要把棉簽插入到受試者的鼻腭處，還要轉動拭子，充分采樣后鼻拭子再退出。如果達不到足夠的深度，很可能采集不到足夠的病毒，無法檢測受試者是否受到感染。鼻拭子可能導致的不適反應包括疼痛、嘔吐反射和流淚，相對咽拭子來說，生理上的不適感和心理上的抵觸感會更強烈，而且對采樣人員也有更高的專業要求。

根據目前的研究，鼻拭子與咽拭子的準確程度一般是等同的，或略高于咽拭子。《自然》雜志上的一項研究發現，在患者感染病毒剛剛出現輕微癥狀時，咽拭子檢測就已經呈陽性了，在之后的7天里，咽拭子提取到的病毒載量都很高，峰值在第4天出現。而在整個病程中，鼻拭子和咽拭子的病毒載量和檢出率是沒有差異的。

因為新冠病毒的感染途徑主要經由上呼吸道，這表明，在感染之初，病毒可能在上呼吸道中大量復制，然后隨著疾病的進程，通過呼吸道黏膜進入人體，深入到其他器官。在上呼吸道中病毒載量下降，載量過低的情況下，就無法呈現陽性結果了，所以，在接觸病毒后的感染早期，單次咽拭子采樣結果作為大規模初篩的方式是可行的，但不能用于最終確診的依據。

● 咽拭子采樣后，如何確認是否感染

為什么咽拭子核酸檢測可以幫助我們判斷是否感染新冠病毒？實際上，僅僅依靠咽拭子本身是不行的，我們需要依靠的是PCR，也就是聚合酶鏈式反應。它的原理主要是把拭子采集到的遺傳物質RNA提取出來，經過逆轉錄變成與RNA互補的DNA（cDNA），然后用PCR進行擴增。PCR體系里包含一段由特異性序列組成的探針，被熒光基因標記，遇到要檢測的代表病毒的靶序列時，就會與它結合，發出熒光。每擴增一條這樣的DNA鏈，就會產生一個熒光分子。

檢驗人員用熒光定量PCR儀進行檢測時，會設置一個熒光分子數的閾值，監測達到閾值需要多少次循環擴增，需要的循環次數越少，樣本中病毒核酸濃度越高。在檢測中循環次數小于某個固定值的，就會被判定為陽性結果。

當然，PCR的檢測結果也有假陰性或假陽性的可能，畢竟當樣本量足夠大時，沒有檢測方法可以做到100%的準確率。所以，對于核酸檢測之后呈陽性的樣本，還要進行二次核酸檢測，如有必要，還要通過影像學的方法共同進行診斷;而如果呈陰性，也建議患者隔離14天，盡量避免出現假陰性的情況。

（編輯? ? 林? ? 妙）