早產兒出生后血清Clara細胞分泌蛋白水平動態變化

張曉榮,魏紅艷,馮玉梅,戴紅霞,王建鈞,黃琳

1 珠海市人民醫院(暨南大學附屬珠海醫院)，珠海51900；2澳門理工學院健康科學及體育高等學校

近年來，隨著圍產醫學的快速發展，早產兒(體質量<2 500 g、胎齡<37周)的存活率不斷提高，但早產兒肺部疾病發病率及由此導致的病死率仍較高。Clara細胞分泌蛋白(clara cell secretory protein, CCSP)是由細支氣管、終末細支氣管及呼吸性細支氣管上的Clara細胞分泌產生的，與新生兒出生后肺的適應性關系密切。多項研究[1～3]發現，血清CCSP的變化在早期鑒別新生兒肺部疾病，尤其是新生兒呼吸窘迫綜合征(RDS)、支氣管肺發育不良方面具有重要價值。但目前對早產兒生后血清CCSP水平的動態變化等相關研究較少。為此我們觀察了51例早產兒出生2周內血清CCSP水平變化，并分析其動態變化的臨床意義。現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2013年6月～2016年12月間在我院出生的早產兒51例為研究組，其中男28例、女23例，胎齡30～34(32.1±2.0)周，均符合早產兒的診斷標準(胎齡<37周且體質量<2 500 g)。另選擇39例具有健康肺的足月新生兒為對照組，其中男26例，女13例，胎齡37.3～39.7(38.5±1.2)周。上述病例中均排除：①嚴重先天發育畸形者；②合并嚴重感染(敗血癥、膿毒癥等)和/或呼吸衰竭者；③研究組中住院時間不足14天的患兒，對照組住院時間不足7天的患兒。研究組父親年齡為26～36(31.2±5.1 )歲 ，母親年齡為25～36(30.6±4.9)歲；對照組父親年齡為26～38(32.0±6.0)，母親年齡為26～35(30.9±4.3)歲。兩組在父母年齡、新生兒性別、分娩方式、胎膜、羊水、臍帶基礎資料方面比較無統計學差異，具有可比性。納入者父母均簽署知情同意書，本研究通過醫院倫理委員會批準。

1.2 血清CCSP檢測 研究組分別于出生2 h、第3天、第7天、第14天，對照組于出生2 h、第3天、第7天采集靜脈血2 mL，1 500 r/min高速離心10 min，留取上清液，-70 ℃保存備檢。采用ELASA法檢測血清CCSP，試劑購自上海西唐生物科技有限公司，嚴格按照試劑盒操作說明進行測試。

2 結果

研究組出生2 h、第3天、第7天、第14天血清CCSP水平分別為(620.21±95.03)、(879.37±98.68)、(796.69±125.66)、(752.30±110.64)pg/mL，與出生2 h比較，出生第3、7、14天血清CCSP水平升高(P<0.05)；與出生第3天比較，出生第7、14天觀察組血清CCSP水平降低(P均<0.05)。

對照組出生2 h、第3天、第7天血清CCSP水平分別為(867.85±49.95)、(879.37±98.68)、(796.69±125.66 )pg/mL，與對照組比較，研究組出生2 h血清CCSP水平降低(P<0.05)。

納入線性相關分析的因素有父親年齡、母親年齡、新生兒胎齡、出生體質量、出生后的Apgar(1、5、10 min)評分、出生1 h PH等參數指標，非參數指標未納入線性回歸；出生2 h回歸方程：Y=-1 535.879+0.733X1，決定系數為0.438，方程檢驗F=2.516，P=0.029。最終納入39例早產兒進行下一步Enter回歸分析，早產兒出生2 h血清CCSP水平與新生兒胎齡有線性相關(P<0.05)；其余時間點血清CCSP水平與上述各因素均無明確線性相關(P>0.05)。詳見表1。

表1 早產兒出生后不同時點血清CCPS水平的線性回歸分析結果

3 討論

Clara細胞是一種無纖毛上皮細胞，主要分布于肺部終末細支氣管和呼吸性細支氣管上皮，具有活躍的增殖分化特性。CCSP是Clara細胞最主要的分泌產物，也稱為CC10、CC16，在呼吸道的肺上皮襯液中濃度約為100 mg/L，是外周血濃度的10 000倍，極易通過肺泡-毛細血管屏障進入外周血流，因此肺上皮襯液、支氣管肺泡灌洗液、血清中的CCSP濃度可直接反映肺部Clara細胞的分泌功能，也間接反映了肺泡毛細血管膜的完整性。CCSP在支氣管肺的氧化應激和炎癥中發揮重要的保護作用，參與支氣管上皮損傷的修復過程，與尤其新生兒RDS、支氣管肺發育不良等肺部疾病的發生和進展相關[1～5]。早產兒作為易發生RDS、支氣管肺發育不良的高危因素，其出生2周 CC16的血清水平如何動態變化，研究報道并不多。

本研究通過動態檢測早產兒出生2 h、3天、7天、14天的血清CCSP，發現早產兒出生后血清CCSP水平呈現先低后快速增高的變化趨勢。具體表現為早產兒出生2 h血清CCSP水平明顯低于足月兒，同時亦為出生2周的最低值，出生3天血清CCSP呈現快速上升趨勢，達最高水平，雖然與同期的足月兒相比沒有統計學意義，但水平略高于同期的足月兒組，出生7 d與足月兒相似維持于平穩水平。這些提示早產兒出生時，體內CCSP水平明顯低于正常足月兒，但隨后為適應外界環境的變化，肺可快速成熟，短時間內達到與足月兒相當的程度，提示早產兒血清CCSP生后逐漸上升且在3天達峰值可能對生后肺部具有保護作用。本研究早產兒生后CCSP水平變化趨勢與早產兒易發生RDS時間相一致，新生兒RDS表現為出生后不久(1～2 h)即出現呼吸急促、呻吟，病情進行性加重，24～48 h病情最重，病死率較高，生存3 d以上患兒隨肺成熟度的增加，癥狀逐漸緩解、病情減輕。我們同期進行的另外一個研究[6]發現，與無呼吸窘迫綜合征的早產兒相比，出現呼吸窘迫綜合征的早產兒血清CCSP水平更低，而兩者出生后2 h的血清CCSP水平均低于足月分娩兒。提示早產兒出生后早期(2 h)檢測血清CCSP水平可以評估早產兒肺的發育與成熟度，預測早產兒RDS的發生，做到早期干預，還可以通過動態監測CCSP水平的變化，預測早產兒RDS的發展和轉歸。兩研究均提示早產兒生后第一天CCSP水平低于足月兒，此結論一致，但早產兒生后血清CCSP高峰時間與本實驗不一致，此尚需進一步研究。

有研究[7]顯示，Clara細胞的發育具有時間性，在胚胎期15周左右胎肺出現Clara細胞，到22周時占支氣管上皮細胞約5.4%，細支氣管上皮11.2%，30周左右Clara細胞增長相對穩定，其分泌的CCSP的水平與肺的重量、胎兒的存活率密切相關[8]，CCSP水平可作為胎肺成熟的標志[9]。本研究將早產兒出生后的很多指標，如新生兒胎齡、出生體質量、出生后的Apgar評分(1、5和10分鐘)、出生2 h時動脈血PH等帶入線性回歸，分析后顯示，胎齡對出生后2 h的血清CCSP水平有明顯影響，其決定系數為0.438，對回歸方程進行檢驗后顯示統計學差異顯著。這與早產兒出生2 h血清CCSP水平明顯低于足月兒相符合。Loughran-Fowlds 等[10]對新生兒生后 12、24、48 h 及 3、4、7 天的血清 CCSP 水平監測發現，早產兒中胎齡越大血清 CCSP 濃度越高，顯示出胎齡-Clara細胞-CCSP三者之間具有的一定的相關性。早產兒Clara細胞的不成熟可能影響CCSP的分泌，引起RDS和支氣管肺發育不良的易患。

綜上所述，早產兒出生后血清CCSP水平呈動態變化，主要表現為出生2 h最低，隨后快速升高，出生第3天達到峰值，繼而降低趨于平穩。胎齡是早產兒出生后血清CCSP水平的影響因素，此變化特點可能對其出生后的肺功能適應具有一定的保護作用。本研究的不足在于納入病例數相對較少，下一步需要大樣本、多時間點及多中心合作進一步研究早產兒出生后CCSP水平的變化特點。