氟醚菌酰胺和吡唑醚菌酯對葡萄霜霉病聯合毒力及田間防效

韓 君，吳建挺，趙恭文，陰冠津，邵莒南，楚 偉，王海燕

(1.山東中農聯合生物科技股份有限公司，山東 濟南 250100；2.濰坊市農業綜合執法支隊，山東 濰坊 261061；3.山東省農藥檢定所，山東 濟南 250100)

葡萄霜霉病(Plasmoparaviticola)，屬鞭毛菌亞門霜霉目單軸霉屬，是一種世界性的葡萄病害[1]。在我國各葡萄產區均有分布， 尤其在多雨潮濕地區發生普遍，是葡萄主要病害之一，1834年在美國野生葡萄中發現，我國1899年記載本病的發生。葡萄霜霉病容易在高溫多雨時候爆發，危害嫩葉背面形成白色霉層，會造成細胞壞死干枯，危害幼果，在果柄處造成細胞壞死凹陷。發病嚴重時，也危害新梢[2]。造成葉片焦枯早落，新梢生長不良，果實產量降低、品質變劣，植株抗寒性差。而當前葡萄種植區普遍用藥水平較高，導致抗性水平增加[3,4]，市售藥劑防治效果差，防治成本也不斷增高，因此篩選出安全高效的防治藥劑就成為解決該問題的關鍵。

氟醚菌酰胺(fluopimomide)是一種新型殺菌劑，對卵菌綱病原真菌有特效，且作用機理新穎，屬于細胞骨架和馬達蛋白分類[3]，主要作用于類血影蛋白(又稱為收縮蛋白，是細胞膜和細胞骨架間的特異蛋白)，從而影響細胞的有絲分裂，且氟醚菌酰胺具有良好的內吸傳導性，能從葉片上表面向下滲透，從葉基向葉尖方向傳導，對幼芽處理后能夠保護葉片不受病原菌侵染，此外氟醚菌酰胺還可從根部沿植株的木質部向整株作物分布。因此獨特的作用機理使得氟醚菌酰胺不易與其它殺卵菌藥劑產生交互抗性。吡唑醚菌酯(Pyraclostrobin)屬甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，是一種線粒體呼吸抑制劑，二者作用機理不同。殺菌劑單劑及組合的表現對評價殺菌劑聯合作用具有重要意義[6]，本研究測定了30%氟醚·吡唑微囊懸浮-懸浮劑對葡萄霜霉病的室內和田間防效，為防治葡萄霜霉病提供一種新的藥劑組合。

1 材料和方法

1.1 供試材料 供試靶標：葡萄霜霉病(Plasmoparaviticola)。

供試作物：葡萄(巨峰，感病品種)。

1.2 供試藥劑 98%氟醚菌酰胺原藥、95%吡唑醚菌酯原藥和30%氟醚·吡唑微囊懸浮-懸浮劑(5%氟醚菌酰胺+25%吡唑醚菌酯)；30%吡唑醚菌酯水分散粒劑和25%唑醚·氰霜唑懸浮劑，由市場購買。

1.3 試驗方法

1.3.1 室內毒力試驗

1.3.1.1 制備孢子囊懸浮液 采集新鮮的葡萄霜霉病病葉，用毛筆在流水下將病葉上老的霉層刷洗掉，葉背朝上鋪在底部有2層吸水紗布的保濕盤內，用塑料薄膜密封保濕盤，置人工氣候培養箱內培養，培養條件為18℃、相對濕度90%、光暗交替(光照12h、黑暗12h)。待病斑上新的孢子囊長出后，用蒸餾水沖洗，稀釋配制成1×105個/mL的孢子囊懸浮液，備用[7]。

1.3.1.2 室內毒力測定 于接菌24h前進行藥劑處理。將不同處理藥液分別噴于直徑1.5cm葉盤背面，待藥液自然風干后，將各處理葉盤背面向上放在培養皿中，培養皿底部墊有相同藥液潤濕的吸水紙。每皿同心圓位置放置15個葉盤，每處理1皿，重復4次。空白對照用0.1% 吐溫-80水溶液處理[6]。藥劑處理24 h后接菌。用移液器將孢子囊懸浮液接種至葉盤中心，每葉盤20μL。人工氣候箱培養，培養條件：溫度22℃、相對濕度90%、光暗交替(光照12h、黑暗12h)。

1.3.1.3 調查方法 培養到對照發病均勻時調查結果[5]。根據葉盤上病斑面積占該葉盤面積的百分率確定病情嚴重度，記載發病葉盤數、病情嚴重度，按公式計算病情指數和防治效果。

病情嚴重度分級標準：0級：無病斑；1級：病斑面積占整個葉面積5%及以下；3級：病斑面積占整個葉面積6%～25%；5級：病斑面積占整個葉面積26%～50%；7級：病斑面積占整個葉面積51%～75%；9級：病斑面積占整個葉面積76以上%。

1.3.1.4 數據處理及分析 以藥劑濃度對數值為自變量x、以防治效果的幾率值為因變量y作回歸分析，求得毒力回歸曲線方程y=a+bx和相關系數r，根據回歸方程計算各單劑及不同比例混劑的EC50及其95%置信限。

采用Wadley法進行評價：根據增效系數(SR)來評價藥劑混用的增效作用，即SR>1.5為增效作用；0.5≤SR≤1.5為相加作用；SR<0.5為拮抗作用。計算增效系數(SR)按公式(1)和(2)進行：

(1)

式中：

X—混劑的EC50理論值，μg/mL；

P(A)—混劑中A的百分含量；

P(B)—混劑中B的百分含量；

A—混劑中A的EC50值，μg/mL；

B—混劑中B的EC50值，μg/mL；

(2)

式中：

SR—混劑的增效系數；

X—混劑EC50的理論值，μg/mL；

X(1)—混劑EC50的實測值，μg/mL。

1.3.2 田間藥效試驗

1.3.2.1 田間試驗設計 依據《GB/T17980.122-2004農田間藥效試驗準則殺菌劑第122部分：殺菌劑防治葡萄霜霉病》開展試驗。田間試驗在河北省張家口市懷來縣露天葡萄田進行。每個小區15株，重復4次，設計為隨機區組排列，試驗區四周設保護行。保護試驗和治療試驗各施藥2次，采用莖葉噴霧的施藥方法，使用利農HD-400型手動背負式噴霧器噴孔直徑1.33mm，工作壓力為0.2 ～0.3mpa，出水量0.5～0.6L/min。保護試驗2019年7月21日第1次施藥，7月28日第2次施藥，施藥后7d(2019年8月4日)調查保護性試驗病情。治療試驗7月25日第1次施藥并調查藥前病情指數，2019年8月1日第2次施藥，施藥后7d(2019年8月8日)調查治療性試驗病情指數。

試驗共設4個處理。保護試驗分別為：30%氟醚·吡唑微囊懸浮-懸浮劑 1 500倍液，30%吡唑醚菌酯水分散粒劑 1 500倍液和25%唑醚·氰霜唑懸浮劑 1 500倍液；治療試驗分別為：30%氟醚·吡唑微囊懸浮-懸浮劑 1 000倍液，30%吡唑醚菌酯水分散粒劑 1 000倍液和25%唑醚·氰霜唑懸浮劑 1 000倍液。

1.3.2.2 調查方法 保護性試驗末次藥后7d調查病害病級。治療性試驗在施藥前調查發病情況，計算藥前病情指數，末次噴藥后7d調查發病情況，計算病情指數和防治效果。

調查方法：每小區隨機調查10個當年抽生新蔓，自上而下調查全部葉片，根據以下分級標準記錄各級病葉數及總葉數：0級：無病斑；1級：病斑面積占整個葉面積5%以下；3級：病斑面積占整個葉面積6%～25%；5級： 病斑面積占整個葉面積26%～50%；7級：病斑面積占整個葉面積51%～75%；9級：病斑面積占整個葉面積76%以上。

藥效計算方法根據病情指數按下列指數公式計算出防治效果，再按DMRT 法測定處理間防效的差異顯著性。

2 結果與分析

2.1 室內毒力試驗

2.1.1 氟醚菌酰胺等藥劑對葡萄霜霉病的毒力 氟醚菌酰胺與吡唑醚菌酯對葡萄霜霉病菌的EC50分別為0.655 4、1.582 1μg/mL，氟醚菌酰胺與吡唑醚菌酯復配，在1:1～1:8配比范圍內均為相加或增效作用(表1)，其中氟醚菌酰胺：吡唑醚菌酯比例為1:5時增效作用最明顯，SR值為1.92。

表1 氟醚菌酰胺與吡唑醚菌酯復配對葡萄霜霉的聯合毒力

2.2 田間藥效評價 30%氟醚·吡唑微囊懸浮-懸浮劑對葡萄霜霉病菌保護效果如(表2)，30%氟醚·吡唑微囊懸浮-懸浮劑1 500倍液與對照藥劑30%吡唑醚菌酯水分散粒劑1 500倍液、25%唑醚·氰霜唑懸浮劑1 500倍液對葡萄霜霉病防效分別為87.15%、83.14%和85.43%，且防效差異不顯著。30%氟醚·吡唑微囊懸浮-懸浮劑對葡萄霜霉病的保護效果高于對照藥劑，但沒有顯著性差異。各供試制劑按推薦用量使用對作物安全。

表2 30%氟醚·吡唑微囊懸浮-懸浮劑對葡萄霜霉田間效果(保護)

30%氟醚·吡唑微囊懸浮-懸浮劑對葡萄霜霉治療效果如(表3)，30%氟醚·吡唑微囊懸浮-懸浮劑1 000倍液與對照藥劑30%吡唑醚菌酯水分散粒劑1 000倍液、25%唑醚·氰霜唑懸浮劑1 000倍液對葡萄霜霉病防效分別為85.41%、80.98%和81.75%，30%氟醚·吡唑微囊懸浮-懸浮劑顯著高于兩對照藥劑防效。各供試制劑按推薦用量使用對作物安全。

表3 30%氟醚·吡唑微囊懸浮-懸浮劑對葡萄霜霉田間效果(治療)

3 討論

室內毒力試驗表明，氟醚菌酰胺:吡唑醚菌酯為1:5時SR值最大，增效作用最明顯。30%氟醚·吡唑微囊懸浮-懸浮劑按1 500倍施藥后，保護效果達到87.15%，對葡萄霜霉具有較好的保護效果；按1 000倍施藥后，治療效果達到85.41%，保護和治療效果均高于對照藥劑30%吡唑醚菌酯水分散粒劑和25%唑醚·氰霜唑懸浮劑，并對作物表現安全。因此推薦30%氟醚·吡唑微囊懸浮-懸浮劑在葡萄霜霉上使用。

氟醚菌酰胺是一種新型細胞骨架和馬達蛋白分類殺菌劑，對卵菌綱病原菌的各生長發育階段均有很好的抑制活性[9]，作用機理新穎，不易與其它葡萄上常用藥劑產生抗性。已有報道氟醚菌酰胺與吡唑醚菌酯混配后對馬鈴薯晚疫病菌具有較高的抑制活性，且增效作用顯著[10]。而當前葡萄種植區因霜霉病害常年嚴重發生，對常見的卵菌藥劑均產生了一定的抗性[3,4]。氟醚菌酰胺的作用機理與當前葡萄霜霉病上常用藥劑完全不同，且對葡萄霜霉病保護與治療效果突出，且未見抗性產生的報道。因此氟醚菌酰胺與吡唑醚菌酯復配，擴大了殺菌譜，且能延緩其抗藥性的產生，對葡萄霜霉病的防治具有重要意義。建議在葡萄霜霉病的防治上，未見或初見病斑時噴施30%氟醚·吡唑微囊懸浮-懸浮劑1 500倍液保護，在葡萄霜霉病發病后噴施1 000倍液治療。