膠體金法測定梅毒抗體陽性標本復(fù)檢結(jié)果分析

浦洪波 杜曉東 李躍松（通訊作者）

（1 江蘇省原子醫(yī)學(xué)研究所附屬江原醫(yī)院檢驗科 江蘇 無錫 216064）

（2 江南大學(xué)附屬醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科 江蘇 無錫 216062）

我院在2015 年以前只采用膠體金法進行梅毒螺旋體抗體的篩檢，因存在一定的假陽性問題，為解決該問題，提高診斷的特異性，降低誤診率，2015 年開始我們對膠體金檢驗陽性的標本，再用梅毒螺旋體顆粒凝集試驗（TPPA）及快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗（RPR）方法進行復(fù)檢，本文將對不同方法的檢測結(jié)果進行統(tǒng)計分析，找出不同分析結(jié)果間的差異，分析假陽性的原因，總結(jié)經(jīng)驗，這對我們以后的檢測工作可起到一定的指導(dǎo)作用。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

收集2016 年4 月—2017 年12 月我院住院手術(shù)病人用膠體金法篩檢梅毒抗體陽性標本56 例。其中男20 例，女36 例，平均年齡50.2±13.0 歲，再進行TPP A 和RPR 法的復(fù)檢，并對結(jié)果進行分析比較，找出差異性及對結(jié)果可能的影響因素進行分析。

1.2 檢測方法

對GICA 法陽性標本再用TPPA 和RPR 兩種方法進行復(fù)檢，嚴格遵照檢驗流程及操作說明進行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析處理，計數(shù)資料采用率（%）表示，行χ2檢驗，計量資料用均數(shù)±標準差（±s）表示，行t檢驗，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 三種方法測定結(jié)果的比較

三種方法測定結(jié)果的比較，見表1。

表1 三種方法測定結(jié)果的比較

三組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=47.078，P=0.000），兩兩比較顯示各組間的差異也具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），以TPPA 法所測結(jié)果為標準，則GICA 測定方法的誤診率（假陽性率）為28.6%；RPR 檢測方法的漏診率（假陰性率）為42.5%。

2.2 復(fù)查結(jié)果的分布情況比較

復(fù)查結(jié)果的分布情況比較見表2。

表2 復(fù)查結(jié)果的分布情況比較

所以在進行各組比較時，此組沒有參與比較。

TPPA+和RPR+組、TPPA+和RPR－組與TPPA－和RPR－組，三組間比較男、女性別比例差異無統(tǒng)計學(xué)意義，χ2=1.467，P=0.480。年齡的分布在三組間差異也無統(tǒng)計學(xué)差異F=1.901，P=0.160。

3.討論

梅毒是由蒼白密螺旋體（treponema pallidum，TP）引起的一種性傳播疾病，主要通過性傳播、血液傳播和母嬰垂直傳播等多種途徑，人體被感染后可引起神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)及全身各組織器官的病變，且病程較長，如不能及時地診斷和治療，病變嚴重時會給患者帶來極大的痛苦，因此及時準確診斷尤為重要。但此種病原體在體外無法培養(yǎng)，且病原體的檢查受取材、送檢時間及檢驗技術(shù)人員的經(jīng)驗水平等多種因素的影響，在臨床普及篩檢不便且靈敏度較低[1]，在實驗室梅毒血清學(xué)檢測時，結(jié)果可能會受方法學(xué)本身的局限性、患者的體質(zhì)差異性以及實驗室條件、試劑、儀器等因素影響，出現(xiàn)假陽性或假陰性[2]。由于梅毒的血清學(xué)檢測在梅毒的診斷和療效監(jiān)測方面占有重要地位，梅毒的防治工作也得到了極大的重視。梅毒感染患者的早期癥狀不明顯，很容易漏診、誤診，在提高梅毒檢測準確率中，實驗室檢測工作也就起著非常重要的作用[3]。

當前針對梅毒螺旋體的檢驗,常用的檢測方法有CLI A、E LI SA 與TPPA。TPPA 主要是對陽性標本進行篩查試驗，ELISA 主要是利用基因重組，對梅毒螺旋體的特異性抗體進行檢測,其檢測可以使用全自動酶免儀進行批量的檢測[4]。血清學(xué)檢測主要分為兩大類，包括梅毒非特異性抗體的檢測和梅毒特異性抗體的檢測，且各自的臨床意義不同。非特異性抗體的檢測方法主要有：性病研究實驗室玻片試驗（VDRL）、不加熱血清反應(yīng)素試驗（USR）、快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗（RPR）和甲苯胺紅不加熱試驗（TRUST）等。特異性抗體的檢測方法有：梅毒螺旋體血凝試驗（TPHA）、梅毒螺旋體顆粒凝集試驗（TPPA）、膠體金免疫層析法（GICA）、免疫印跡法（WB）、酶免法（TP－ELISA）及化學(xué)發(fā)光法（CLIA）等。由于梅毒病原體感染人體后，非特異性抗體和特異性抗體產(chǎn)生的時間存在差異，特異抗體不同種類的產(chǎn)生也存在差異，各醫(yī)院所用的方法存在差異，即使所用方法相同，但生產(chǎn)廠家也可能不同，這些原因使得檢測結(jié)果存在很大的差異，且各測定方法也存在優(yōu)缺點，這給結(jié)果的判定帶來影響。

膠體金法靈敏度和特異性均較低，故不適合臨床對梅毒的診斷，但可采用該方法對梅毒病情進行觀察，以便判斷治療的效果，還可以檢測復(fù)發(fā)的情況[5]。

本次結(jié)果發(fā)現(xiàn)，若以TPPA 法的檢測結(jié)果為金標準，GICA法存在一定的假陽性率與文獻報道相似，可能的原因為：①GICA 方法的干擾因素較多，如溶血、脂血及PH 值等都可對結(jié)果產(chǎn)生一定的影響；②本次的標本來源多為甲狀腺癌病人，這些患者多存在自身抗體，自身抗體有可能對GICA 的測定結(jié)果存在干擾；③樣本數(shù)較少也可能對統(tǒng)計結(jié)果造成一定的影響。RPR 法陽性率較低的原因可能與標本的來源有關(guān)，甲狀腺癌手術(shù)病人有可能為既往感染梅毒，經(jīng)治療好轉(zhuǎn)，使非特異性抗體陰性。由表2 可看出，膠體金法假陽性與真陽性患者在男女比例構(gòu)成及年齡分布間不存在統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05），這與文獻報道的高齡患者假陽性率高的結(jié)果不符[6]，可能的原因為本實驗的高齡患者占比較少，或標本來源病種不同引起的此種差異。

通過以上的分析可以看出，梅毒特異性抗體和非特異性抗體同時測定有著重要的臨床意義，如現(xiàn)時感染和既往感染的區(qū)別；療效的觀察；增加臨床診斷的特異性和敏感性等，特別對隱性感染者能夠做到早發(fā)現(xiàn)、早治療，有著積極意義。結(jié)合我院實際情況，綜合考慮方法的準確率、實驗室操作方便性、經(jīng)濟性等多方面因素，我認為現(xiàn)有條件下可以對住院病人及大批量體檢病人用膠體金法初篩，陽性標本再用TPPA和RPR 方法確認，這樣可減少誤診率，又可對現(xiàn)癥感染與既往感染加以鑒別，另一方面也減少了病人的費用，對后期的統(tǒng)計工作也有一些幫助。

通過查閱相關(guān)文獻發(fā)現(xiàn)，為防止不同方法因敏感性和特異性不同，造成的誤診和漏檢，梅毒抗體的篩查存在著一定的診斷程序[7-8]，本文采用類似逆序?qū)嶒炘\斷程序，即用膠體金法初篩，陽性標本再用TPPA 方法確認，這樣可減少誤診率，又可對現(xiàn)癥感染與既往感染加以鑒別[9]，具有重要臨床意義。

本文通過對膠體金方法陽性標本的復(fù)檢，提高診斷的準確性，降低誤診率，達到能及時為臨床提供正確的診斷依據(jù)，減少病人的過度檢查，降低病人醫(yī)療費用。雖然受到標本數(shù)量及病種類型等多種條件的限制，但通過實驗的對比分析和文獻資料的學(xué)習(xí)，使實驗室水平有了很大提高，使方法的組合更合理，提高了診斷的準確性，減少了誤診率，為臨床提供靈敏、合理的方法，來滿足臨床的需要。