聯合檢測血清補體C1q和尿微量清蛋白在糖尿病腎病中的診斷價值

張競文，藍衛東，肖 燕，譚 文，蔡安季 （. 華中科技大學協和深圳醫院檢驗科，廣東深圳5805；. 廣東省深圳市南山區婦幼保健院，廣東深圳 58067）

糖尿病腎病是糖尿病并發癥中發病率第二的并發癥類型，早期無明顯的臨床特征，極易惡化為終末期腎病，無法完全治愈，只能依賴血液透析延續生命，已成為糖尿病患者預后較差的因素之一[1]。早期診斷和治療對于保護腎功能和改善預后極其重要。糖尿病腎病的發病機制復雜，目前尚未研究清楚，隨著標記物檢測技術的發展，臨床上常以尿白蛋白水平作為糖尿病腎病的診斷標準[2]。補體C1q主要參與補體經典激活途徑，調控巨噬細胞清除凋亡細胞和循環免疫復合物。研究表明成人腎病綜合征患者血清和腎臟病理組織中C1q表達異常，揭示C1q可能參與腎病的發生發展[3]。本研究旨在探討血清補體C1q水平與尿微量清蛋白(mALB)聯合檢測在診斷糖尿病腎病中的應用價值。

1 資料和方法

1.1 病例與分組

選取2017年2月-2018年5月入院治療的早期糖尿病患者136例，根據是否并發腎病，將其分為糖尿病腎病組(70例)和單純糖尿病組(66例)，同時另選取入院體檢的健康者38例作為對照組。納入標準：(1)糖尿病患者符合1999年WHO糖尿病專家委員會提出的2型糖尿病診斷標準；(2)具有典型的2型糖尿病多飲、多食、多尿且體重減輕的臨床癥狀[4]；(3)24 h尿微量白蛋白排泄量維持在30～300 mg為早期糖尿病腎病組，低于30 mg的患者為無腎病糖尿病組[5]；(4)年齡25～75歲；(5)依從性好；(6)對照組無心血管類、糖尿病、肝腎等方面疾病及葡萄糖耐受試驗、血脂水平、腎功能及心肺指標均正常。排除標準：其他類型糖尿病；既往其他原因引起的腎病史；近期有嚴重糖尿病急性并發癥；內分泌代謝疾病；重要器官疾病；免疫系統疾病；惡性腫瘤；嚴重感染；長期藥物濫用史；酒精依賴；腎毒性藥物、糖皮質激素服用史；精神障礙者；妊娠、哺乳期婦女。糖尿病腎病組男39例，女31例；年齡26～74歲，平均(44.51±8.62)歲；身體質量指數(24.12±5.28)kg/m2。單純糖尿病組男37例，女29例；年齡29～73歲，平均(44.82±9.55)歲；身體質量指數(25.05±7.89) kg/m2；對照組男22例，女16例；年齡28～73歲，平均(45.36±7.18)歲；身體質量指數(23.59±4.86) kg/m2。3組在年齡、性別和身體質量指數方面差異無統計學意義(P＞0.05)。本研究已通過醫學倫理委員會批準，所有受試者均知情且簽署知情同意書。

1.2 檢測方法

1.2.1 血清中補體C1q水平檢測 夜間禁食8 h以上，于次晨空腹靜脈取血5 mL，3 000 r/min離心10 min，取上清即為血清，參照C1q檢測試劑盒(上海邦景實業有限公司)說明書步驟進行操作，并使用雅培C16 000全自動生化分析系統進行檢測。

1.2.2 尿液中mALB水平檢測 收集受試者晨起尿液4 mL，2 000 r/min離心5 min取上清，參照尿微量白蛋白(mALB)定量檢測試劑盒(寧波醫杰生物科技有限公司)說明書步驟進行操作，并使用日立7 600全自動生化分析系統進行檢測。

1.3 統計學處理

數據經SPSS19.0軟件進行統計學分析，計數資料以率(%)表示，采用χ2檢驗；計量資料以±s表示，多組間用方差分析和q檢驗；用ROC曲線進行診斷效能分析。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清中補體C1q和尿液中mALB水平的比較

早期糖尿病腎病組血清中補體C1q水平均低于單純糖尿病組與對照組(P＜0.05)。與對照組相比，單純糖尿病組和早期糖尿病腎病組尿液中mALB水平均顯著升高(P＜0.05)，且早期糖尿病腎病組高于單純糖尿病組。見表1。

表1 3組血清中補體C1q和尿液中mALB水平的比較(±s)

表1 3組血清中補體C1q和尿液中mALB水平的比較(±s)

與對照組相比：a P＜0.05；與單純糖尿病組相比： bP＜0.05

組別n C 1 q/(m g/L)m A L B/(m g/L)對照組單純糖尿病組糖尿病腎病組3 8 6 6 7 0 1 7 5.2 9±1 8.6 2 1 8 1.3 6±1 7.6 4 1 3.2 7±4.3 1 1 6.3 3±5.7 9 a 1 5 1.4 3±1 2.3 5 a b 3 8.8 9±5.8 4 a b

2.2 血清補體C1q和尿液mALB異常檢出率

與單純糖尿病組比較，糖尿病腎病組的血清補體C1q、mALB及聯合檢測的陽性率均明顯升高(P＜0.01)，且聯合檢測異常檢出率顯著高于單項檢測(P＜0.05)。見表2。

表2 血清補體C1q和尿液mALB異常檢出率的比較 例(%)

2.3 C1q、mALB檢測的ROC曲線分析

鑒別糖尿病腎病和健康者的ROC分析(A)結果顯示，當C1q≤160.28 mg/L時，曲線下的面積為0.750(P＜0.001)，95%可信區間為0.654～0.846，敏感度為78.6%，特異度為60.5%；當mALB≥15.07 mg/L時，曲線下的面積為0.900(P＜0.001)，95%可信區間為0.832～0.968，敏感度為92.9%，特異度為56.5%；而聯合檢測ROC曲線下面積為0.922(P＜0.001)，95%可信區間為0.870～0.974，敏感度為88.6%，特異度為81.6%，聯合診斷AUC大于C1q單項檢測(Z=3.329，P=0.001)。

鑒別糖尿病腎病和單純糖尿病患者的ROC分析(B)結果顯示，當C1q≤164.96 mg/L時，曲線下的面積為0.850(P＜0.001)，95%可信區間為0.783～0.917，敏感度為77.1%，特異度為84.8%；當mALB≥29.50 mg/L時，曲線下的面積為0.870(P＜0.001)，95%可信區間為0.802～0.938，敏感度為81.4%，特異度為95.5%；而聯合檢測ROC曲線下面積為0.923(P＜0.001)，95%可 信 區 間 為 0.876～0.969，敏 感度 為81.4%，特異度為90.9%，聯合診斷AUC大于單項檢測(C1q：Z=2.623，P=0.009，mALB：Z=2.372，P=0.018)。

3 討論

2型糖尿病隨著病情的發展，可誘發多種并發癥，這些并發癥使得2型糖尿病極難治愈，有較高的致死率，長期高血糖會引起全身性血管病變，由于腎臟代償功能十分強大，早期并沒有明顯的臨床表現，容易被忽視[6]。糖尿病腎病早期患者病理表現為：腎體積增大，有微血栓形成，腎小球基底膜糖質化，誘發腎臟缺血，引起腎小球過濾mALB等物質增加而出現蛋白尿，晚期時將會出現持續性蛋白尿的現象，從而出現尿毒癥，最終產生腎衰竭，且無法治愈[7]。糖尿病腎病已經嚴重威脅患者的生命健康和生活質量，靈敏的早期診斷指標有助于糖尿病腎病的確診和及時有效的治療，患者的病情將得到最大程度的控制[8]。正常生理狀態下，尿液中mALB水平較低，腎臟出現損傷后，mALB水平會異常升高，是腎小球損傷的重要標志，其表達水平可以預測早期糖尿病腎病[9]。早期糖尿病腎病的“金標準”為24 h尿微量白蛋白排泄量，但其操作繁瑣且檢測不穩定，研究表明采集晨尿或隨機尿檢測mALB水平雖更為便捷，但無法準確判斷早期糖尿病腎病[10]。

圖1 C1q、mALB檢測的ROC曲線分析

補體是一類具有酶活性、可自我調控的蛋白，廣泛存在于血清中，主要參與非特異性免疫和獲得性免疫的早期[11]。補體C1q是補體C1的一個亞基，可調控各種免疫細胞，在維持機體免疫耐受和炎癥反應中有著重要作用[12]。正常生理狀態下，補體C1q的激活可以有效清除免疫復合物、凋亡細胞和凋亡小體，使得機體免疫應答水平保持平衡，當補體C1q出現功能障礙時，機體將無法維持穩態[13]。研究表明，急性腎小球腎炎患者血清中補體C1q水平降低，其系膜區會沉積顆粒狀補體和免疫球蛋白，如：C1q、IgG和IgM等，提示抗C1q抗體水平檢測將有助于診斷急性腎小球腎炎并可以反映病情進程[14]。補體C1q在狼瘡性腎病患者血清中表達顯著降低，而抗C1q抗體表達顯著升高，提示血清補體C1q和抗C1q抗體水平檢測可以有效指導系統性紅斑狼瘡的診斷，有助于控制病情和判斷預后[15]。以上研究均表明補體C1q水平檢測在診斷腎病中有一定的應用價值，但對于補體C1q水平和尿微量清蛋白聯合檢測診斷早期糖尿病腎病的報道較少，因此本研究首次探索二者聯合檢測在診斷糖尿病腎病中的應用價值。

本研究結果顯示，早期糖尿病腎病組血清中補體C1q水平低于對照組、單純糖尿病組，而尿液樣本中mALB水平均高于對照組、單純糖尿病組，表明C1q和mALB是診斷早期糖尿病腎病的敏感指標。而C1q和mALB聯合檢測陽性率顯著高于單項檢測，表明聯合檢測可提高診斷準確率。ROC曲線分析結果顯示，血清C1q和尿mALB聯合檢測可有效從健康者和單純糖尿病患者中辨別出糖尿病腎病者，進一步說明C1q聯合mALB水平在診斷早期糖尿病腎病方面具有重要臨床意義。但本研究選取的樣本量較小，選擇上可能存在一定的偏倚性，還需要擴大樣本量作進一步驗證。

綜上所述，C1q和mALB是早期糖尿病腎病的有效診斷指標，且應用血清中補體C1q水平和尿微量清蛋白聯合檢測在診斷糖尿病腎病中有較高的診斷價值，提高診斷敏感性，可為糖尿病腎病患者早期確診、臨床治療和預后判斷提供幫助。