楊梅衰弱病病癥及病樹礦質營養分析

任海英，鄭錫良，張淑文，梁森苗，吳昌旺，王康強，俞浙萍，戚行江*

(1.浙江省農業科學院 園藝研究所，浙江 杭州 310021； 2.文成縣經濟特產工作站，浙江 文成 325300；3.仙居縣特產技術推廣總站，浙江 仙居 317300)

楊梅是我國南方最具特色的水果之一，截至2019年全國楊梅種植面積約33.35萬hm2，為山區農民脫貧致富發揮著重要的作用。近年來全國楊梅產區陸續發生成年楊梅樹結果量變大、果實變小、品質低劣、老熟葉片脫落嚴重、樹勢嚴重衰弱的情況(作者命名為衰弱病)，由于樹勢衰弱原因尚不明確，無法采取有效防控措施，浙江省90%以上楊梅園已進入盛產期，防控形勢非常嚴峻。

自從楊梅產業大力發展以來，不同年份嚴重危害楊梅生產的主要病害略有不同。目前楊梅生產中5～6月發生嚴重病害的有樹皮生長橙色菌絲的枝干病害赤衣病[1-2]、肉柱凸起的果實病害肉蔥病[3]、果實開裂的裂核病[1]、果實表面生長有白菌絲的白腐病[1，4]，以及果實表面開裂、失水、呈深褐色的炭疽病[4]；6月下旬到8月上旬盛發病害有枝干上有凸起瘤狀物的細菌性病害癌腫病[5]；周年發生于10月爆發的病害主要有葉片青枯后干枯并伴有枝條干枯的凋萎病[6]、樹皮開裂的枝腐病[7]、缺鋅引起的小葉病[1]、葉片有褐色斑點的褐斑病[2，8]、葉片有不規則病斑的葉枯病[9]等。衰弱病與所有上述病害的病癥均不相同，是一種完全不同的新病害。

筆者對衰弱病的病癥進行了觀察，對病害發生情況進行了調研，測定了病樹根圍土壤理化性質和葉片內礦質營養元素含量，為該病的后續發生規律和防控技術研究提供部分依據。

1 材料與方法

1.1 發生規律觀察

2012—2018年對我國楊梅產區衰弱病發生情況、果園環境條件和管理情況進行調查，健康樹做對照。觀察該病害在果園中發病的分布規律、發病時期、發展規律、發病癥狀等，內容包括受害葉片，受害枝韌皮部、木質部，受害根的韌皮部、木質部，以及根圍土壤樹根情況等，并且參考方中達[10]植物病害的調查方法，設計出楊梅衰弱病病情級數的調查方法，在后期病害防控研究中可用來計算病情指數。

1.2 土壤和葉片采樣果園

以浙江省海寧市黃灣鎮黃灣村冷冰塢果園15年生東魁楊梅樹作為試材，果園環境條件為典型的緩坡山地，海拔50 m左右，土壤為酸性黃壤，果園的發病率為65%，病情指數在1～9級均有，栽植株行距為4 m×5 m，選擇負載量相似、樹冠大小和樹葉脫落量占整株樹葉片的25%～50%(病情指數為5級)之間的楊梅樹作為試驗樹，試驗園采用常規管理。健康楊梅樹做對照。取樣每棵楊梅樹算1次重復，每處理重復3次。

1.3 營養生長參數測定

于2016年6月分別選取有代表性的健康植株和發病植株的東、南、西、北四個方向春梢各5支，共20支，用數顯游標卡尺(上海刀具)測量枝梢粗度，取平均值，每支算1次重復。選取樹體外圍中部位置營養枝頂端以下第4～8片葉開始測定和取樣，每個測量指標取30個葉片檢測并且取平均值，使用Li-6400便攜式光合儀(美國LI-COR公司)測定光合速率，用SPAD-502 PLus葉綠素計(日本美能達公司)測定葉綠素質量分數(SPAD值)，測量葉片長度(頂端至葉柄基部)、寬度。葉片厚度用數顯游標卡尺測定10枚的厚度，重復3次，求其平均值。健康樹做對照。

1.4 果實經濟性狀測定

于2016年6月分別選取有代表性的健康植株和發病植株的東、南、西、北四個方向楊梅成熟果實，每個方位采集50顆，采后當天運回實驗室立即測定單果重量、可溶性固形物、硬度，并留存樣品于-20 ℃用于果實的可滴定酸和維生素C含量的測定。隨機取15個果實用電子天平(上海精密儀器)稱重，取平均值。使用ATAGOPR-101a手持數顯糖度計(日本)測定可溶性固形物(TSS)含量。病、健樹各取15個楊梅果實，用TA-XT plus質構儀測定果實硬度，探頭選擇TA-MTP，下壓距離為4.0 mm。可滴定酸采用酸堿滴定法[11]、維生素C采用2，6-二氯靛酚滴定法測量[11]。健康樹果實做對照。

1.5 土壤和葉片樣品采集

由于衰弱病樹體果實量大，果實采后土壤理化性質和葉片礦質營養在病樹和健康樹之間可能差異最大，故樣品采集選擇樹體營養生長和生殖生長較為穩定的果實采后時間。在2016年7月采集土壤和葉片樣品。在環繞楊梅樹干1圈1 m左右樹冠滴水線位置采集0～20 cm表土層樣品，利用四分法收集混合土壤樣品約2 kg，室溫條件下自然風干，過0.45 mm的篩網。每株楊梅樹選取東、西、南、北4個方位，每個方位選擇春梢頂端開始第4～8片成熟葉，每棵樹采集約200片，自來水沖洗干凈，去離子水復洗3次，在烘箱中105 ℃加熱15～20 min殺青，70 ℃烘干備用。病、健樹各采集3棵樹的土壤和葉片，健康樹做對照。

1.6 營養元素檢測方法

土壤理化性質和葉片礦質營養檢測方法均參考相關文獻[12]。

土壤理化性質檢測方法。pH值采用pH酸度計(土與水比為1∶2.5)測定；有機質用K2Cr2O7氧化-外加熱法測定；速效N采用改良式凱氏定氮法測定；速效P用鹽酸-氟化銨浸提-鉬銻抗比色法測定；速效K采用醋酸銨浸提-火焰光度計法測定；中微量元素(有效鈣、鎂、鋅、銅和錳)采用醋酸銨浸提，鐵采用DTPA浸提，iCE3500原子吸收分光光度計測定；有效硫采用磷酸鹽-鹽酸浸提，氯化鋇比濁測定法；有效硼采用熱水提取，姜黃素比色法。

葉片營養元素檢測方法。葉片礦質元素的測定氮、磷、鉀采用H2SO4-H2O2消解，分別采用改良式凱氏定氮法、鉬藍比色法和火焰光度計測定；鈣、鎂、鋅、銅、鐵、錳采用HNO3-HClO4Multiwave3000微波消解儀消解，iCE3500型原子吸收分光光度計測定；硫采用HNO3-HClO4消煮，比濁法測定；硼采用干灰化姜黃素比色法測定。

1.7 數據分析

采用Excel 2010作數據初步處理，用SPSS 17.0軟件進行t-test(α=0.05)分析顯著性差異。

2 結果與分析

2.1 發病情況

楊梅衰弱病是近年來新發現的重大病害，具有危害重、地域廣等特點。該病發生以盛產期果園為主，在浙江、廣西、廣東、福建、江西等地均有較大面積發生。品種間沒有明顯發病差異，主栽品種東魁和荸薺種都有較大面積發生。病害發生比較普遍，發病果園沒有特殊的地形地貌、果園溫濕度條件、土壤條件、灌溉條件等典型特征，在同一果園中沒有分布規律，沒有明顯的發病中心，比如山頂、山中、山腳、陽面、陰面等位置的差異，但是與果園土壤耕作、肥水管理等有一定相關性，比如復合肥和除草劑施用較多的果園發病嚴重，嚴重的果園甚至80%的樹體死亡。

2.2 發病癥狀及規律

研究病害在果園中的發病時期、發展規律和樹體受傷害情況發現，楊梅健康樹(圖1中A、B)枝繁葉茂，葉色翠綠。衰弱病樹在浙江產區4月底至5月初開始發病，表現為春梢枝中下部葉片綠色開始變淺，7月中旬葉片葉肉變斑駁黃色至全黃色，葉脈變黃綠色，最后整個葉片包括葉脈變成暗紅色(圖1中C、D)，8月中下旬開始脫落，至11—12月底大量脫落，樹冠外圍頂端有少量葉片暫存，但葉色暗綠無光澤(圖1中E、F)，結果量較多，但果實小而酸，沒有商品價值(圖1中G)，病情逐年加重直至死亡。針對葉片脫落量是樹體總量50%左右的衰弱病樹進行深入研究發現，楊梅健康樹枝梢內部韌皮部是淺綠色，木質部為白色(圖1中H)，而衰弱病發病枝梢內部，韌皮部變褐色，木質部顏色略加深(圖1中I)。楊梅健康樹的樹根須根較多(圖1中J)，而病樹的須根較少(圖1中K)；楊梅健康樹粗根的韌皮部為淺綠色，木質部為淡褐色(圖1中L)，而病樹大部分粗根的韌皮部和木質部變為黑色或者深褐色(圖1中M)，只有少部分樹根還維持健康。健康樹土壤內白色的須根較多(圖1中N)，而病樹土壤內幾乎看不到白色的須根(圖1中O)。

2.3 衰弱病病情分級方法

衰弱病病情級數調查時間需要選擇12月初發病穩定后進行。每棵樹的病情指數分級標準如下：0級，整個樹體葉片茂密，樹勢健康；1級，0<葉片脫落量占整個樹體總葉片量的比例≤10%；3級，10%<葉片脫落量占整個樹體總葉片量的比例≤25%；5級，25%<葉片脫落量占整個樹體總葉片量的比例≤50%；7級，50%<葉片脫落量占整個樹體總葉片量的比例≤75%；9級，75%<葉片脫落量占整個樹體總葉片量的比例≤100%。

2.4 營養生長

表1顯示，病情指數為5級的衰弱病樹營養生長明顯比健康樹差，且差異顯著。其中，枝梢長度短117.49%，葉片明顯變窄18.81%，葉片厚度變薄16.53%，光合速率降低182.35%，葉綠素含量降低19.63%。這說明楊梅衰弱病達到病情指數5級及以上后幾乎不再抽生新梢，葉片變薄變窄，光合效率變低。

表1 衰弱病楊梅營養生長

2.5 果實品質

病情指數為5級的病樹楊梅果實的所有品質性狀都明顯變差，單果重降低60.57%，TSS降低4.75個百分點，果實硬度降低36.31%，維生素C含量降低96.05%，可滴定酸含量增加0.39個百分點。這說明楊梅衰弱病達到病情指數5級及以上果實變小，TSS變低，而酸度變高，口味變差。

表2 衰弱病楊梅果實品質

2.6 土壤營養狀況

表3顯示，相比健康樹，病情指數為5級的病樹根圍土壤pH值降低0.44，有機質含量降低3.6%，速效氮含量降低25.01%，有效鈣、鎂、有效硫、鋅、銅、鐵、錳、有效硼等元素的含量分別降低69.81%、50.76%、29.31%、53.13%、115.87%、18.26%、197.06%、13.56%，其中錳的含量降低最多，銅次之，相反病樹內的速效磷和速效鉀含量顯著增加，分別增加45.93%和8.03%。說明楊梅衰弱病達到病情指數5級及以上后土壤內中微量元素較為貧乏，速效磷可能過量。

表3 衰弱病楊梅根際土壤養分含量

2.7 葉片營養狀況

表4顯示，相比健康樹，病情指數為5級的病樹葉片內的氮、磷、鉀沒有顯著差異，鈣、硫、鐵、錳、硼等元素的含量分別顯著降低37.27%、20.83%、19.36%、32.82%和9.38%，其中鈣的含量降低最多，錳次之，而鎂、鋅、銅等元素的含量分別顯著增加7.69%、13.10%和9.62%。這說明大量元素吸收至樹體內的量沒有明顯變化，而葉片內的中微量元素平衡部分失調。

3 討論

在病癥上，衰弱病最開始枝梢中下部葉片黃化，然后變紅脫落，老熟葉片脫落發生在整棵樹，表現為整株樹內堂空虛無葉，頂端葉片暫存暗綠無光澤，逐年加重后，才是整株樹死亡。與其不同，另外一種生產上發生較多的病害凋萎病最開始是外圍、內堂或者頂梢等葉片急性青枯，然后黃枯，最后變紅脫落，雨季葉片脫落處會有白色的菌絲，個別枝條枯死，枯死枝條數目逐年增多，樹干上會生發出很多葉片小且黃化的分蘗枝，最后才是整株樹枯死[6]。

表4 衰弱病楊梅植株葉片養分含量

在果園內發生位置上，衰弱病發生樹體位置隨機性強，沒有發病中心，沒有山腳、山中和山頂等的位置差異，沒有明顯的發病傳播趨勢。與其不同，凋萎病在同一個果園內明顯山腳發病較重，山頂較輕，而且有明顯的發病中心，有發病傳播趨勢[6，13]。

在發病原因和影響因素上，目前衰弱病發病原因是否受氣候因子影響尚未明確，具體發生規律需要深入研究。與其不同，凋萎病是擬盤多毛孢屬真菌侵染引起的[6，14]，受到氣候因子溫度和相對濕度的顯著影響[15]。兩者相同之處是，農事操作影響發病率，復合肥使用較多的果園，兩種病害發病率均較高。

果樹生長數年后根圍環境惡化，菌群結構發生變化，引起長勢變弱、果實品質下降，前人已有報道，如葡萄[16]、蘋果[17]等。本調查研究發現，與健康樹相比，衰弱病樹葉片變小，果實小而酸，新梢抽生困難，光合效率變差，病樹根圍土壤明顯酸化，有機質含量降低，中微量元素部分失調，這與前人研究的結果相似，也可能存在菌群變化等問題，需要進一步深入研究。

合理施肥和改良土壤是保證果樹健康生長的重要措施。自然生草能提高蘋果園土壤細菌群落的多樣性，改良群落的結構和組成，明顯提升土壤的養分狀況[18]。生物有機肥可以改良土壤微生物菌群，提高土壤的營養物質含量，不但能促進植物生長[19]，還對病害防控起著重要的作用，如施用生物有機肥后，楊梅凋萎病[20]、香蕉枯萎病[21-22]、當歸根腐病[23]等都得到了較好的防控。在利用熏蒸劑達唑[24]、石灰和碳酸氫銨[25]等進行土壤消毒后施用生物有機肥，可以較快地恢復土壤菌群結構，防控土傳病害，促進植物生長。開發有效的土壤改良措施很可能是防控衰弱病的重要技術措施，值得深入研究。