60%噁唑菌酮·氰霜唑水分散粒劑高效液相色譜分析

俞建忠，邵貴芳，陳列忠，侯佳音，俞瑞鮮，胡秀卿，趙學平

(浙江省農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量標準研究所 部省共建農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全危害因子與風險防控國家重點實驗室(籌)農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥殘留檢測重點實驗室，浙江 杭州 310021)

噁唑菌酮(famoxadone)是美國杜邦公司研制的一種新型高效、廣譜性殺菌劑，主要通過阻斷泛醌醇酶，抑制病原菌的孢子釋放，起到殺菌作用，可用于防治多種作物的白粉病、晚疫病、霜霉病、銹病等，且對后茬作物安全、無藥害[1]。氰霜唑(cyazofamid)是日本石原產(chǎn)業(yè)研發(fā)的一種磺胺咪唑類殺菌劑，具有高效、低毒、環(huán)境友好等特點，主要用于防治卵菌類病害，如疫病、霜霉病等，目前已在大白菜、番茄、黃瓜、荔枝樹、馬鈴薯、葡萄、西瓜等作物上登記使用[2-3]。

目前，噁唑菌酮的檢測方法有氣相色譜法和液相色譜法[4-6]，氰霜唑的主要分析方法為液相色譜法[2，7]，二者復(fù)配制劑的分析法已有報道，采用氣相色譜法進行分析[8]，但適用性更為廣泛的液相色譜法尚未見報道。本文采用高效液相色譜法同時對噁唑菌酮和氰霜唑進行定性和定量。該方法操作快速、準確、便捷，適用于該產(chǎn)品的質(zhì)量檢測。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

高效液相色譜儀Agilent1100，具有二極管陣列檢測器和色譜工作站；色譜柱為ZORBAX Eclipse-C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；過濾器(孔徑0.45 μm有機膜)。BSA224S電子天平(賽多利斯科學儀器北京有限公司)；超聲波清洗機(昆山舒美有限公司)。噁唑菌酮標準品(質(zhì)量分數(shù)98.0%，沈陽化工院研究有限公司)；氰霜唑標準品(質(zhì)量分數(shù)97.2%，沈陽化工院研究有限公司)；乙腈(色譜純，德國默克公司)；純凈水(杭州娃哈哈公司)；60%噁唑菌酮·氰霜唑水分散粒劑試樣(農(nóng)藥廠提供)。

1.2 液相色譜操作條件

流動相：乙腈+水(體檢比70∶30)；檢測波長：220 nm；流量為1.0 mL·min-1；柱溫30 ℃；進樣體積5 μL；保留時間：氰霜唑約8.7 min，噁唑菌酮約10.0 min。典型的噁唑菌酮和氰霜唑標樣及試樣高效液相色譜圖見圖1～2。

圖1 噁唑菌酮和氰霜唑標樣高效液相色譜

1.3 測定步驟

1.3.1 標樣溶液的配制

稱取噁唑菌酮標樣約0.065 g(精確至0.000 1 g)和氰霜唑標樣約0.05 g(精確至0.000 1 g)置于100 mL容量瓶中，加入適量乙腈溶解，超聲波振蕩5 min后冷卻至室溫，再用乙腈稀釋至刻度，搖勻備用。

圖2 60%噁唑菌酮·氰霜唑水分散粒劑高效液相色譜

1.3.2 試樣溶液的配制

稱取60%噁唑菌酮·氰霜唑水分散粒劑試樣約0.2 g(精確至0.000 1 g)置于100 mL容量瓶中，加入適量乙腈溶解，超聲波振蕩5 min后冷卻至室溫，再用乙腈稀釋至刻度，搖勻過濾備用。

1.3.3 測定

在上述高效液相色譜儀器條件下，儀器基線走穩(wěn)后，連續(xù)注射標樣溶液，直至標樣溶液的峰面積響應(yīng)值相鄰兩針相對變化小于1.2%后，按照一針標樣溶液、兩針試樣溶液、一針標樣溶液的進樣順序進行含量測定。

1.3.4 質(zhì)量分數(shù)計算

試樣中按式(1)計算：

(1)

式中：ω1為試樣中噁唑菌酮或氰霜唑的質(zhì)量分數(shù)(%)，A2為試樣溶液中噁唑菌酮或氰霜唑峰面積的平均值(將測得的兩針試樣溶液中噁唑菌酮或氰霜唑面積分別進行平均)，m1為標樣的質(zhì)量的數(shù)值(g)，ω為標樣中噁唑菌酮或氰霜唑的質(zhì)量分數(shù)(%)，A1為標樣溶液中噁唑菌酮或氰霜唑峰面積的平均值(將測得試樣前后兩針標樣溶液中噁唑菌酮或氰霜唑面積分別進行平均)，m2為試樣的質(zhì)量的數(shù)值(g)。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜條件的選擇

通過Agilent 1100高效液相色譜儀二極管陣列檢測器的全波段掃描功能，獲得氰霜唑和噁唑菌酮的紫外吸收光譜圖(圖3～4)。

圖3 氰霜唑紫外吸收譜

圖4 噁唑菌酮紫外吸收譜

從紫外吸收譜圖中可知，氰霜唑最大吸收波長在280 nm處，噁唑菌酮最大吸收波長在230 nm處。為避免溶劑對其干擾，且兩者均有較強的紫外吸收，試驗選擇220 nm為檢測波長。根據(jù)噁唑菌酮和氰霜唑的物理化學性質(zhì)，考慮到被試物的溶解性，選用溶劑乙腈溶解樣品，選擇乙腈和水混合溶液作為流動相，將流動相按乙腈+水不同體積比進行分離試驗，最終確定流動相為Ψ(乙腈∶水)=70∶30，流速為1.0 mL·min-1。在該條件下，各組分分離良好，色譜峰峰形尖銳、對稱，分離時間較短。

2.2 方法的線性相關(guān)性試驗

準確稱取噁唑菌酮標樣0.0 961 g和氰霜唑標樣0.0 514 g，置于同一25 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻備用。用移液管分別移取上述標樣溶液0.5、1.0、2.0、2.5、5.0 mL于5個10 mL容量瓶中，用乙腈稀釋到刻度，搖勻，配制噁唑菌酮、氰霜唑標準溶液。待儀器穩(wěn)定后，在上述色譜條件下，按濃度從低到高的順序進樣，每個濃度進樣2次。以噁唑菌酮(氰霜唑)的質(zhì)量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，得到噁唑菌酮線性回歸方程y=14.992x+202.8，線性相關(guān)系數(shù)為0.999 4；氰霜唑線性回歸方程y=8.8518x+33.83，線性相關(guān)系數(shù)為0.999 5。試驗結(jié)果表明該方法線性關(guān)系良好。

2.3 方法的精密度試驗

在上述高效液相色譜操作條件下，準確測量5個60%噁唑菌酮·氰霜唑水分散粒劑試樣的含量，計算標準偏差和變異系數(shù)。表1顯示，噁唑菌酮標準偏差為0.11，變異系數(shù)為0.32%；氰霜唑標準偏差為0.22，變異系數(shù)為0.86%，表明該方法精密度較好。

表1 精密度試驗結(jié)果

2.4 方法的準確度試驗

準確稱取5份已知含量的60%噁唑菌酮·氰霜唑水分散粒劑試樣，在每份試樣中分別加入一定量的噁唑菌酮和氰霜唑標樣，在相同條件下測定其含量，計算標樣添加回收率。表2顯示，測得噁唑菌酮平均回收率為99.31%；氰霜唑平均回收率為99.81%，表明該方法準確度較高。

表2 準確度試驗結(jié)果

3 小結(jié)

使用高效液相色譜法同時檢測混劑中噁唑菌酮和氰霜唑的含量。該方法在測試濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，分析時間短，方法精密度和準確度高，操作簡單、快速，是噁唑菌酮和氰霜唑復(fù)配制劑理想的分析測定方法。