牛結(jié)節(jié)性皮膚病綜述

史紅，唐萬勇

（武漢回盛生物科技股份有限公司，湖北武漢430042）

結(jié)節(jié)性皮膚病（Lumpy skin disease，LSD）又稱牛結(jié)節(jié)疹、牛結(jié)節(jié)性皮炎或牛疙瘩皮膚病， 是由痘病毒科的結(jié)節(jié)性皮膚病病毒（Lumpy Skin Disease Virus，LSDV）引起的一種牛的急性或亞急性傳染病， 是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）法定報(bào)告動(dòng)物疫病。2019 年8 月，我國在新疆維吾爾自治區(qū)伊犁州首次確診LSD，2020年在我國多地發(fā)生疫情， 引起各界的高度重視， 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部暫時(shí)將其作為二類動(dòng)物疫病進(jìn)行管理， 而在《中華人民共和國進(jìn)境動(dòng)物檢疫疫病名錄》中，規(guī)定為一類傳染病，即在進(jìn)口檢疫中， 列為最高等級管控的動(dòng)物疫病。

1 病原學(xué)

1.1 病原特性

LSDV 是有囊膜的雙股DNA 病毒，屬于痘病毒科，脊椎動(dòng)物痘病毒亞科，山羊痘病毒屬。 山羊痘病毒屬（Capripoxvirus） 成員包括綿羊痘病毒、 山羊痘病毒和結(jié)節(jié)性皮膚病病毒3 種， 成員間有血清學(xué)交叉反應(yīng)和交叉保護(hù)， 因此綿羊痘和山羊痘減毒活疫苗可用于LSD 的預(yù)防。 目前，LSDV 只有1 個(gè)血清型， 代表毒株為南非分離株Neethling 株。

1.2 對環(huán)境和理化因素的抵抗力

LSDV 非常穩(wěn)定。病毒在皮膚結(jié)節(jié)中-80℃可存活10 年， 在受感染的組織液中4℃可存活6 個(gè)月。在環(huán)境溫度下，尤其是在干性結(jié)痂中，長期存活， 可以在皮膚結(jié)節(jié)壞疽中存活長達(dá)33 天或更長時(shí)間，在干性結(jié)痂中存活長達(dá)35 天，在風(fēng)干的皮革中至少存活18 天。 在自然環(huán)境中LSDV 能長期保持繁殖能力。該病毒對陽光和含有脂質(zhì)溶劑的清潔劑敏感，但在黑暗的環(huán)境條件下，例如受污染的動(dòng)物棚舍中， 可存活數(shù)月。LSDV 對 溫 度 敏 感，55℃2 小 時(shí) 或65℃30 分鐘可滅活病毒； 對強(qiáng)酸強(qiáng)堿敏感，pH 6.6～8.6 時(shí)，37℃溫度條件下5 天內(nèi)病毒滴度不會顯著降低；對乙醚（20%）、三氯甲烷、福爾馬林（1%）和一些洗滌劑如十二烷基硫酸鈉敏感，常用消毒劑如氫氧化鈉、福爾馬林、氯仿、季銨鹽類均可將其殺滅， 但消毒劑往往難以殺死脫落的痂皮中的病毒。

2 流行病學(xué)

2.1 流行概況

LSD 起源于非洲，1929 年首次在贊比亞被發(fā)現(xiàn)，隨后的數(shù)十年間，該病在非洲各國流行。在2013～2018年，該病先后傳到西亞、中亞、東歐和俄羅斯。2018 年，該病沿著俄羅斯和哈薩克斯坦邊界， 進(jìn)一步向東移動(dòng)，接近我國新疆地區(qū)，從而對我國構(gòu)成嚴(yán)重威脅。 2019 年8 月10 日，新疆維吾爾自治區(qū)伊犁哈薩克自治州送檢的牛結(jié)節(jié)病料經(jīng)國家外來動(dòng)物疫病研究中心檢測LSDV 核酸陽性，這是我國首次確診發(fā)生LSD。

2.2 傳染源

患LSD 的病牛為主要傳染源。

病牛皮膚結(jié)節(jié)、結(jié)痂、硬皮組織病毒含量相對較高。 病毒可在這些組織中存活35 天甚至更久。 病牛血液、唾液、眼鼻分泌物、精液中都能分離到病毒。 發(fā)生感染后7～21 天，可間歇性地在血液中檢測到病毒（病毒血癥）， 含量比皮膚結(jié)節(jié)中略低。 病牛可通過精液排毒，有研究發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)感染的公牛在接種病毒42天后從精液中分離到了活病毒，159天后仍檢測到了病毒DNA。

2.3 易感動(dòng)物

LSDV 具有高度的宿主特異性，主要感染牛和水牛。 在實(shí)驗(yàn)條件下病毒潛伏期為4～14 天，《OIE 陸生動(dòng)物衛(wèi)生法典》 規(guī)定潛伏期為28天。 發(fā)病率是10%～20%，死亡率一般是1%～5%。 康復(fù)牛可獲得終生免疫。

本病不感染人。

2.4 傳播途徑

2.4.1 非媒介傳播

早期試驗(yàn)研究和臨床研究證據(jù)表明，LSDV 并不通過牛-牛的直接接觸而產(chǎn)生有效的傳播， 有人將發(fā)病牛和健康牛混養(yǎng)， 結(jié)果并未造成傳播，但是有趣的是，山羊痘病毒屬的另外兩個(gè)成員山羊痘病毒和綿羊痘病毒的主要傳播方式卻是直接接觸。 但近期的觀點(diǎn)認(rèn)為，LSDV 的直接接觸傳播可能只是引起一些比較輕微的亞臨床癥狀， 還需要有足夠數(shù)量的試驗(yàn)動(dòng)物和現(xiàn)代更加敏感的檢測方法進(jìn)一步驗(yàn)證。

LSDV 可通過多種間接接觸途徑產(chǎn)生傳播， 包括攝入污染的飼料和飲水、共用污染的針頭等。

本病可通過胎盤垂直傳播，也有報(bào)道稱病毒可能可以通過母牛的乳汁、 或小牛接觸母牛損傷的乳房和乳頭而傳播。 感染公牛的精液帶毒， 可通過自然交配或人工授精傳播。

2.4.2 節(jié)肢動(dòng)物媒介傳播

主要通過節(jié)肢動(dòng)物蚊、蠅、蠓、虻、 蜱等叮咬傳播。 Sohier C,Haegeman A 等（2019）證實(shí)了廄螯蠅和馬蠅傳播作用， 家蠅也可能在病毒傳播中起到非常重要的作用，但還需要試驗(yàn)進(jìn)行證明。匯總2006～2019 年共13 年間歐亞地區(qū)發(fā)生的LSD 疫情發(fā)現(xiàn)（見圖1），該病具有明顯的季節(jié)性特征， 常見于吸血節(jié)肢動(dòng)物活躍的月份。

3 臨床癥狀

臨床表現(xiàn)差異很大， 跟動(dòng)物的健康狀況和感染的病毒量有關(guān)。 典型的臨床表現(xiàn)見圖2、圖3 所示。

體溫升高，可達(dá)41℃以上。精神抑郁、厭食和消瘦，有鼻炎、結(jié)膜炎癥狀，大量分泌唾液，體表淋巴結(jié)腫大，奶牛產(chǎn)奶量顯著下降。 體溫開始升高后的48 小時(shí)內(nèi)，在頭部、頸部、四肢、乳房、生殖器和會陰部會出現(xiàn)直徑2～5 厘米的皮膚結(jié)節(jié)。 這些結(jié)節(jié)是局限性的堅(jiān)硬圓形凸起的，深入到皮膚、皮下組織、有時(shí)甚至是肌肉組織中。 結(jié)節(jié)觸診時(shí)有時(shí)有疼痛表現(xiàn)， 結(jié)節(jié)的數(shù)量和大小可能表現(xiàn)出很大差異。 小的結(jié)節(jié)可能會自動(dòng)消失，不會造成任何危害。 大的結(jié)節(jié)可能會破潰，吸引蠅蛆，反復(fù)結(jié)痂，遷延數(shù)月不愈， 大結(jié)痂脫落后會在皮毛上留下深洞等永久性瘢痕。 在口腔和消化道的黏膜組織以及氣管和肺中可能會出現(xiàn)囊泡、 糜爛和潰瘍。 四肢和身體的其他腹側(cè)部分（如贅肉、胸部、陰囊和外陰）可能會出現(xiàn)水腫，導(dǎo)致牛不愿移動(dòng)。 公牛可能會永久或暫時(shí)不育， 母牛可能會流產(chǎn)或數(shù)月不發(fā)情。 嚴(yán)重感染牛只因消瘦、繼發(fā)性肺炎、乳房炎、皮膚結(jié)節(jié)部位壞死創(chuàng)傷等，恢復(fù)極為緩慢。

表1 牛結(jié)節(jié)性皮膚病與其他病的鑒別診斷

4 病理變化

消化道和呼吸道內(nèi)表面有結(jié)節(jié)病變。 淋巴結(jié)腫大出血。 心臟腫大，心肌外表充血、出血，呈現(xiàn)斑塊狀瘀血。肺臟腫大血點(diǎn)。腎臟表面有出血點(diǎn)。 氣管黏膜充血出血（見圖4），氣管內(nèi)有大量黏液。 肝臟腫大，邊緣鈍圓。 膽囊腫大，為正常2～3 倍，外壁有出血斑。 脾臟腫大出血，質(zhì)地變硬。 胃黏膜出血。 小腸彌漫性出血。睪丸（見圖5）和膀胱也可能有病理損傷。

5 診斷

5.1 鑒別診斷

嚴(yán)重的結(jié)節(jié)性皮膚病癥狀很明顯，但是溫和型病例易與以下疾病發(fā)生混肴：牛偽結(jié)核性皮膚病、牛皰疹性乳頭炎（牛皰疹病毒2 型）、嗜皮菌病、牛皮蠅感染等，應(yīng)注意鑒別診斷（詳見表1）。

5.2 實(shí)驗(yàn)室診斷

根據(jù)臨床癥狀不難對該病做出初診，但確診還需實(shí)驗(yàn)室診斷。實(shí)驗(yàn)室診斷方法主要有血清學(xué)檢測和病原鑒定。

5.2.1 血清學(xué)檢測

血清學(xué)檢測不能對山羊痘病毒屬的三種病毒綿羊痘病毒、 山羊痘病毒、結(jié)節(jié)性皮膚病病毒加以區(qū)分。病毒中和試驗(yàn)是目前檢測山羊痘病毒屬抗體的標(biāo)準(zhǔn)方法。蛋白質(zhì)免疫印跡法雖然敏感度高特異性強(qiáng)，但費(fèi)用昂貴難以操作。抗體酶聯(lián)免疫反應(yīng)（ELISA）方法目前已經(jīng)比較成熟，用于山羊痘病毒屬抗體檢測的商用試劑盒已被開發(fā)并投放市場。

5.2.2 病原鑒定

PCR 是成本便宜又快速的鑒定方法，皮膚結(jié)節(jié)、結(jié)痂、唾液、鼻分泌物和血液都是適用于PCR 檢測的樣品。病毒分離（PCR 鑒定后為確認(rèn)病毒的存在而做）耗時(shí)長成本高，但能確定樣品中是否含有活的病毒。 電子顯微鏡成像鏡檢可用于鑒定經(jīng)典的痘病毒病毒體結(jié)構(gòu) （病毒呈磚塊狀或短管狀， 大小約為290×270 納米），但不能區(qū)分具體的屬或種。

6 防控

6.1 各國控制經(jīng)驗(yàn)

從歐洲、 西亞等地區(qū)牛結(jié)節(jié)性皮膚病流行情況看， 成功控制和消除牛結(jié)節(jié)性皮膚病， 依賴于對指示病例的盡早診斷和鑒定， 以及后續(xù)迅速的大面積的免疫接種。 歐洲發(fā)病國家全部采用“免疫+撲殺”的防控策略，且多數(shù)采取全面撲殺政策，使疫情得到了快速有效控制。 使用數(shù)學(xué)模型比較了全部撲殺 （殺死所有受臨床影響的牛和未受影響的其他牛）和部分撲殺（僅殺死受臨床影響的牛）政策的有效性。 研究發(fā)現(xiàn)，全部撲殺和部分撲殺對消除感染的效力是相似的。

6.2 疫苗免疫

目前免疫所用疫苗按來源分主要有兩種，均是減毒活疫苗。 一種是同源疫苗，LSDV 減毒活疫苗株，如“Neethling” 株LSD 減毒活疫苗；一種是異源疫苗， 綿羊痘或山羊痘病毒減毒活疫苗株， 有研究稱山羊痘減毒活疫苗的效果優(yōu)于綿羊痘減毒活疫苗。 由于動(dòng)物痘病毒結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性以及生物學(xué)和免疫學(xué)的特殊性， 其疫苗研發(fā)主要側(cè)重于減毒活疫苗研究， 但越來越多的研究證明使用減毒活疫苗存在毒株重組的危害。 如研究人員在俄羅斯庫爾干州發(fā)現(xiàn)了減毒活疫苗南非KSGP O-240 毒株和野毒毒株NI-2490 株的重組新毒株。 目前滅活疫苗的研究較少，Jihane Hamdia 等（2020 年）進(jìn)行了滅活疫苗研究的報(bào)道， 但當(dāng)前還沒有可供臨床使用的滅活疫苗。

6.3 我國LSD 預(yù)防控制措施

本病進(jìn)入我國時(shí)間不長， 應(yīng)當(dāng)引起高度重視，防止疫情蔓延。 主要措施包括：加強(qiáng)對疾病的宣傳，提高認(rèn)識。 對發(fā)生疑似或確診病例的地區(qū)，要按照傳染病防治法規(guī)要求，按照“早快嚴(yán)小”的原則，堅(jiān)決實(shí)行封鎖、隔離和撲殺。 開展易感牛群的免疫， 對疫區(qū)周圍高危地區(qū)使用弱毒疫苗進(jìn)行緊急免疫接種。 控制傳播媒介，尤其是蟲源性傳媒。 在夏秋季節(jié)，要做好牛舍的管理，防止蚊蠅等害蟲進(jìn)入舍內(nèi)， 并要做好環(huán)境害蟲的藥物驅(qū)殺。