抗腫瘤治療前后消化道惡性腫瘤患者外周血淋巴細(xì)胞亞群變化分析

連宏

消化道惡性腫瘤發(fā)病率高,位于全球腫瘤發(fā)病率第二位,并且隨著經(jīng)濟(jì)水平的不斷提高以及群眾體檢意識(shí)的不斷普及,仍不斷逐年遞增,嚴(yán)重威脅人類的健康。導(dǎo)致腫瘤發(fā)生發(fā)展的因素非常多,其中,機(jī)體免疫狀態(tài)紊亂及免疫監(jiān)視效能的下降被認(rèn)為是其中重要原因之一［1］。維持免疫系統(tǒng)內(nèi)部環(huán)境穩(wěn)定的一個(gè)中心環(huán)節(jié)就是淋巴細(xì)胞亞群之間的平衡［2］。外周血淋巴細(xì)胞亞群會(huì)發(fā)生變化(包括總量、活性、功能等),其對(duì)多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展產(chǎn)生重要影響。有報(bào)道稱,可將外周血淋巴細(xì)胞比例監(jiān)測(cè)用于多種腫瘤的診斷中,如食管癌及胰腺癌等［3,4］。同時(shí)有報(bào)道指出,通過檢測(cè)腫瘤患者外周血淋巴細(xì)胞亞群,可以全方位了解患者機(jī)體免疫狀態(tài),對(duì)腫瘤疾病可精準(zhǔn)診斷,對(duì)臨床治療效果可全面觀察,進(jìn)而顯著改善預(yù)后情況［5］。此次研究旨在探討分析外周血淋巴細(xì)胞亞群在抗腫瘤治療前后的變化情況及其臨床檢測(cè)意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019 年5 月～2020 年5 月于本院腫瘤科住院的50 例消化道惡性腫瘤患者,均通過病理結(jié)果確診,生存時(shí)間均＞3 個(gè)月,并排除近期有使用過免疫增強(qiáng)劑患者。其中男36 例,女14 例；年齡26～76 歲,平均年齡(57.52±12.21)歲；腫瘤類型：結(jié)直腸惡性腫瘤26 例,胃惡性腫瘤14 例,肝惡性腫瘤2 例,胰腺惡性腫瘤8例；其中,接受分子靶向治療20例。見表1。

表1 50 例患者臨床資料分析(n)

1.2 方法 分別于抗腫瘤治療前、抗腫瘤治療后1 個(gè)月取患者的靜脈血,進(jìn)行T、B、NK 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)。抽取患者外周靜脈血約2 ml,放置于乙二胺四乙酸二鉀抗凝試管中,充分混勻后留置待測(cè)。用相應(yīng)的單克隆抗體進(jìn)行全血標(biāo)記后,使用流式細(xì)胞儀法對(duì)淋巴細(xì)胞進(jìn)行測(cè)定,均嚴(yán)格按照試劑盒要求進(jìn)行操作,所有抗體及試劑均購自美國(guó)BECKMAN COULTER 公司。

1.3 觀察指標(biāo) 對(duì)比患者治療前后CD3+、CD3+CD4+CD8-、CD3+CD8+CD4-、CD4+/CD8+、CD45ROCD19+、CD3-CD16/CD56+、CD3+CD16/CD56+。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用t 檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患者治療前后外周血T 淋巴細(xì)胞亞群水平比較 患者治療后的CD3+、CD3+CD4+CD8-、CD4+/CD8+水平均高于治療前,CD3+CD8+CD4-水平低于治療前,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表2 50 例患者治療前后外周血T 淋巴細(xì)胞亞群水平比較(±s)

表2 50 例患者治療前后外周血T 淋巴細(xì)胞亞群水平比較(±s)

注：與治療前比較,aP＜0.05

2.2 患者治療前后外周血B 淋巴細(xì)胞水平比較 患者治療后外周血B 淋巴細(xì)胞CD45RO-CD19+低于治療前,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表3。

表3 50 例患者治療前后外周血B 淋巴細(xì)胞水平比較(±s,%)

表3 50 例患者治療前后外周血B 淋巴細(xì)胞水平比較(±s,%)

注：與治療前比較,aP＞0.05

2.3 患者治療前后外周血NK 細(xì)胞水平比較 患者治療后外周血NK 細(xì)胞CD3-CD16/CD56+(14.45±6.31)%高于治療前的(12.42±3.49)%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；患者治療后外周血NK 細(xì)胞CD3+CD16/CD56+高于治療前,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表4。

表4 50 例患者治療前后外周血NK 細(xì)胞水平比較(±s,%)

表4 50 例患者治療前后外周血NK 細(xì)胞水平比較(±s,%)

注：與治療前比較,aP＜0.05

3 討論

消化道惡性腫瘤發(fā)病例數(shù)逐年遞增,基因突變、細(xì)胞調(diào)節(jié)功能改變都可能激活細(xì)胞的無限增殖,改變機(jī)體的免疫狀態(tài),誘導(dǎo)腫瘤的發(fā)生。淋巴細(xì)胞處于機(jī)體免疫系統(tǒng)與腫瘤相互作用的最前沿,在一定程度上,其組成和功能等可反映機(jī)體抗腫瘤的能力［6］。人外周血淋巴細(xì)胞亞群維持免疫狀態(tài)平衡,主要由三種細(xì)胞構(gòu)成：來自胸腺的T 淋巴細(xì)胞,來自骨髓的B 淋巴細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞(NK 細(xì)胞),在免疫系統(tǒng)的功能中起著核心作用。由于細(xì)胞的表型和功能的不同,T 淋巴細(xì)胞亞群包括成熟T 淋巴細(xì)胞(CD3+)、輔助/誘導(dǎo)T 淋巴細(xì)胞(CD3+CD4+CD8-)、細(xì)胞毒/抑制性T 淋巴細(xì)胞(CD3+CD8+CD4-)［7］。T 淋巴細(xì)胞經(jīng)過抗原或巨噬細(xì)胞活化后,某些B淋巴細(xì)胞(CD45RO-CD19+)可進(jìn)行分化,進(jìn)一步分化為漿細(xì)胞,產(chǎn)生和分泌特異性免疫球蛋白。既往觀點(diǎn)認(rèn)為NK 細(xì)胞(CD3-CD16/CD56+、CD3+CD16/CD56+)是一種離散的細(xì)胞溶解受體,可參與調(diào)節(jié)細(xì)胞生成過程、保護(hù)機(jī)體防止病毒感染和消除惡性細(xì)胞等多方面并發(fā)揮重要作用［8］。多項(xiàng)研究指出［9,10］,測(cè)定腫瘤患者外周血淋巴細(xì)胞亞群各指標(biāo)可以及時(shí)準(zhǔn)確地了解患者免疫功能變化,從而為臨床診治提供參考依據(jù),更好地明確治療方案,對(duì)評(píng)估治療效果及預(yù)后具有重要作用。

在本次研究中,重點(diǎn)觀察消化道惡性腫瘤抗腫瘤治療(包括化療和分子靶向治療)前后淋巴細(xì)胞亞群的變化,結(jié)果顯示,患者治療后的CD3+、CD3+CD4+CD8-、CD4+/CD8+水平均高于治療前,CD3+CD8+CD4-水平低于治療前,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。此結(jié)果與肺癌患者化療前后相一致［11］：抗腫瘤治療或可改變機(jī)體的免疫狀態(tài),表現(xiàn)為總T 淋巴細(xì)胞增多,CD4+/CD8+比值增高,即增加輔助/誘導(dǎo)T 細(xì)胞,減少細(xì)胞毒/抑制性T 細(xì)胞,增強(qiáng)機(jī)體對(duì)突變細(xì)胞的識(shí)別能力和消滅能力,或可減緩腫瘤生長(zhǎng)惡化。本研究中,患者治療后外周血B 淋巴細(xì)胞CD45RO-CD19+低于治療前,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。既往也有相關(guān)研究指出［12］,某些腫瘤患者的B 淋巴細(xì)胞相對(duì)計(jì)數(shù)(CD19+)與正常組對(duì)比本身差異即無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,有可能因?yàn)锽 細(xì)胞僅僅是具有初級(jí)體液免疫功能的淋巴細(xì)胞［13］,在惡性腫瘤疾病中影響較小,但仍需要結(jié)合患者治療方法等進(jìn)行進(jìn)一步研究。NK 細(xì)胞稱為自然殺傷細(xì)胞,分為兩種,一種負(fù)責(zé)非特異性免疫應(yīng)答,即CD3-CD16/CD56+；一種負(fù)責(zé)特異性免疫應(yīng)答,即CD3+CD16/CD56+,是體內(nèi)重要的免疫細(xì)胞,其誘導(dǎo)產(chǎn)生的白介素-2(IL-2)及干擾素(IFN)等免疫因子可以殺傷腫瘤細(xì)胞,不僅參與抗病毒感染,腫瘤和免疫調(diào)節(jié),還參與某些情況下自身免疫性疾病的發(fā)生［14］。既往有研究表示：外周血NK 細(xì)胞比例不僅是胃癌患者的輔助診斷標(biāo)記物,而且還和胃癌的惡性表型相關(guān)［15］；非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者外周血淋巴細(xì)胞亞群,尤其是NK 水平檢測(cè),對(duì)了解機(jī)體免疫功能、評(píng)估病情和指導(dǎo)臨床治療具有重要的臨床意義［16］。在本研究中,發(fā)現(xiàn)抗腫瘤治療后,負(fù)責(zé)非特異性免疫應(yīng)答的NK 淋巴細(xì)胞即CD3-CD16/CD56+增多,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),此與既往卵巢癌化療后對(duì)免疫功能影響的研究結(jié)果相似［17］,抗腫瘤治療后可能有效提高患者的NK 淋巴細(xì)胞水平,對(duì)增強(qiáng)治療效果,改善預(yù)后具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

綜上所述,與抗腫瘤治療前相比,消化道惡性腫瘤患者在抗腫瘤治療后外周血淋巴細(xì)胞亞群發(fā)生了一定變化,可能因?yàn)槟[瘤細(xì)胞會(huì)誘導(dǎo)形成抑制性的免疫微環(huán)境,通過抗腫瘤治療后腫瘤細(xì)胞量有所下降,抑制性免疫微環(huán)境得到改善。監(jiān)測(cè)腫瘤患者外周血淋巴細(xì)胞亞群或可以成為制定抗腫瘤治療方案、評(píng)估抗腫瘤治療療效的方法之一。然而各淋巴細(xì)胞亞群功能與消化道惡性腫瘤患者的預(yù)后直接相關(guān)的臨床研究仍較少,需要進(jìn)一步研究和驗(yàn)證。