不同pH 對(duì)海灣扇貝胚胎發(fā)育及幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響*

劉 洋 于瑞海 張 哲 田傳遠(yuǎn) 錢嘉文

(中國(guó)海洋大學(xué) 海水養(yǎng)殖教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 青島 266003)

近年來(lái)，化石燃料的大量使用，導(dǎo)致CO2過(guò)度排放，氣溫升高、全球變暖、海洋酸化等問(wèn)題隨之出現(xiàn)。海水酸化最終會(huì)引起海洋系統(tǒng)內(nèi)一系列化學(xué)變化，從而影響到大多數(shù)海洋生物的生理、生長(zhǎng)、繁殖、代謝和生存(Haugan et al, 1996)。研究表明，在pH 較低的海水中，貝類、甲殼類和棘皮動(dòng)物等鈣質(zhì)生物外殼增厚，其作為餌料的價(jià)值也隨之下降(Caldeira et al,2005)。最新研究表明，地球正在經(jīng)歷近3 億年來(lái)最大規(guī)模的CO2排放，海洋生物與海洋生態(tài)系統(tǒng)將面臨日益加劇的海洋酸化威脅(Ove et al, 2010)。

我國(guó)是世界上最大的水產(chǎn)養(yǎng)殖國(guó)，雙殼貝類作為海水養(yǎng)殖重要經(jīng)濟(jì)種類之一，同樣面臨pH 下降帶來(lái)的威脅(何盛毅等, 2010)。目前，對(duì)厚殼貽貝(Mytilus crassitesta lischlk)、馬氏珠母貝(Pinctada martensii)、太平洋牡蠣(Crassostrea gigas) 及青蛤(Cyclina sinensis)的研究表明，酸化海水導(dǎo)致雙殼貝類胚胎發(fā)育滯緩及幼蟲(chóng)生長(zhǎng)緩慢等(Zheng et al, 2014; 劉文廣等, 2012; 秦艷杰等, 2013)。另外，王曉琴等(2019)研究發(fā)現(xiàn)，pH 變化會(huì)對(duì)貽貝的礦化、生長(zhǎng)和生理過(guò)程造成不同程度的影響。海水pH 變化對(duì)海灣扇貝(Argopecten irradia)幼貝的研究表明，偏酸環(huán)境和偏堿環(huán)境均會(huì)使幼貝附著力下降，觸手不伸出，兩殼緊閉，甚至錯(cuò)殼(張明亮等, 2011)。

海灣扇貝原產(chǎn)于美國(guó)東海岸，引進(jìn)我國(guó)已30 多年，主要在我國(guó)北方沿海養(yǎng)殖，已成為我國(guó)主要扇貝養(yǎng)殖品種之一。本研究以海灣扇貝為對(duì)象，分析探討pH 下降對(duì)海灣扇貝早期胚胎發(fā)育及幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響，評(píng)估pH 下降對(duì)貝類養(yǎng)殖業(yè)的影響，旨在為貝類養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)在未來(lái)應(yīng)對(duì)海洋酸化威脅提供科學(xué)數(shù)據(jù)，為中國(guó)海洋環(huán)境保護(hù)相關(guān)措施的制定提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 親貝采集及幼蟲(chóng)孵化

海灣扇貝親貝于2018 年3 月26 日取自山東省萊州市長(zhǎng)漁水產(chǎn)有限公司。親貝在室內(nèi)人工促熟，海水溫度為22℃～23℃，采用陰干升溫流水刺激法催產(chǎn)。待卵子排放后，洗卵并開(kāi)始用于pH 影響實(shí)驗(yàn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

本實(shí)驗(yàn)以正常海水(pH 8.0～8.2)作為對(duì)照組，設(shè)置4 個(gè)pH 梯度(分別為7.6～7.7、7.3～7.4、7.0～7.1 和6.7～6.8)，每組設(shè)3 個(gè)重復(fù)。

實(shí)驗(yàn)期間，受精完成后，按上述pH梯度轉(zhuǎn)移至10 L水體的塑料桶內(nèi)進(jìn)行充氣培養(yǎng)，水溫為22℃～23℃，日常管理與親貝促熟期間一致；期間投喂球等鞭金藻(Isochrysis galbana)；為避免充氣影響各組的pH 值，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和調(diào)節(jié)pH 值，以減少實(shí)驗(yàn)誤差。

1.3 pH 對(duì)海灣扇貝胚胎發(fā)育的影響

將受精卵迅速均分至預(yù)先設(shè)置的各實(shí)驗(yàn)組10 L小桶中，密度為8 ind./ml (取50 ml 定量海水于顯微鏡下觀察，多次測(cè)量的平均值作為受精卵密度)；受精卵發(fā)育到D 形幼蟲(chóng)時(shí)，從各實(shí)驗(yàn)組取10 ml 樣品，滴加碘液固定，在顯微鏡下測(cè)量殼高、殼長(zhǎng)，觀察并計(jì)算畸形率、孵化率等指標(biāo)。

1.4 pH 對(duì)海灣扇貝幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響

取育苗場(chǎng)中發(fā)育至30 h 的D 形幼蟲(chóng)，均分至預(yù)先設(shè)置的各實(shí)驗(yàn)組10 L 小桶中，密度為3 ind./ml，測(cè)量各實(shí)驗(yàn)組初始平均殼高。實(shí)驗(yàn)第1～8 天，分別取樣測(cè)量幼蟲(chóng)的殼高，通過(guò)與初始值對(duì)比，計(jì)算生長(zhǎng)速率，每組測(cè)量重復(fù)3 次。測(cè)量各實(shí)驗(yàn)組密度，計(jì)算各實(shí)驗(yàn)組的存活率。

1.5 pH 對(duì)海灣扇貝眼點(diǎn)幼蟲(chóng)附著的影響

取育苗場(chǎng)中海灣扇貝眼點(diǎn)幼蟲(chóng)，均分至預(yù)先設(shè)置的各實(shí)驗(yàn)組10 L 小桶中，密度為3 ind./ml，當(dāng)眼點(diǎn)幼蟲(chóng)比例>50%時(shí)，投放附著基(聚乙烯網(wǎng)片)，分別于3、5、7 d 后，測(cè)量各實(shí)驗(yàn)組眼點(diǎn)幼蟲(chóng)附著變態(tài)率。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

海灣扇貝胚胎發(fā)育和幼蟲(chóng)生長(zhǎng)各階段胚胎畸形率(Deformity rate, DR, %)、孵化率(Hatching rate, HR,%)、存活率(Survival rate, SR, %)和綜合評(píng)價(jià)指數(shù)(Comprehensive evaluation index, CEI)的計(jì)算公式：

式中，Dt為實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)畸形D 形幼蟲(chóng)密度；St為實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)D 形幼蟲(chóng)總密度；F 為實(shí)驗(yàn)起始時(shí)受精卵密度；Lo為實(shí)驗(yàn)起始時(shí)幼蟲(chóng)密度；Lt為實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)幼蟲(chóng)密度；He、Hc分別為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的孵化率；Te、Tc分別為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的孵化時(shí)間；De、Dc分別為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的畸形率。

采用SPSS 19.0 軟件對(duì)各組幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)指標(biāo)進(jìn)行單因素方差(One-way AVONA)分析，顯著性水平設(shè)為P<0.05。

2 結(jié)果

2.1 不同pH 對(duì)海灣扇貝胚胎發(fā)育的影響

在不同pH 條件下，海灣扇貝胚胎孵化率、D 形幼蟲(chóng)畸形率以及生長(zhǎng)情況見(jiàn)表1、圖1 和圖2。

從表1 和圖1 可以看出，不同pH 對(duì)海灣扇貝孵化率、畸形率以及孵化時(shí)間均有顯著影響(P<0.05)。在孵化率方面，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組均差異顯著(P<0.05)，pH 7.6～7.7 時(shí)，孵化率為43.75%，僅為對(duì)照組的一半；在畸形率方面，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組同樣差異顯著(P<0.05)，pH 6.7～6.8 時(shí)高達(dá)48.39%，而對(duì)照組僅為4.76%，相差近10 倍，并且隨著pH 的降低，畸形率不斷升高；孵化時(shí)間方面，孵化時(shí)間隨著pH 的下降呈現(xiàn)遞增趨勢(shì)，當(dāng)pH 下降至6.7～6.8 時(shí)，孵化時(shí)間相比對(duì)照組延長(zhǎng)了8 h。

為評(píng)估pH 對(duì)海灣扇貝胚胎發(fā)育的綜合影響，引入綜合評(píng)價(jià)指數(shù)。從表1 可以看出，酸化程度越大，對(duì)海灣扇貝胚胎發(fā)育的影響越大。從圖2 可以看出，對(duì)照組殼長(zhǎng)、殼高明顯高于各實(shí)驗(yàn)組，差異顯著(P<0.05)；且各實(shí)驗(yàn)組殼長(zhǎng)與殼高隨著pH 的降低明顯下降，pH 7.0～7.1 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相差近12 μm。

圖1 不同酸化程度下30 h 時(shí)孵化率和畸形率Fig.1 Hatching rate and deformity rate at different acidification level for 30 h

2.2 不同pH 對(duì)海灣扇貝D 形幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響

圖2 不同酸化程度下30 h 時(shí)各組D 形幼蟲(chóng)的殼長(zhǎng)和殼高Fig.2 Shell length and shell height of D larvae in each group at different acidification level for 30 h

不同pH 條件下，海灣扇貝D 形幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育見(jiàn)圖3 和圖4。從圖3 可以看出，不同pH 條件下，D 形幼蟲(chóng)對(duì)照組存活率均高于實(shí)驗(yàn)組，且差異顯著(P<0.05)。4 d 內(nèi)，pH 7.6～7.7 實(shí)驗(yàn)組存活率下降幅度較小，而pH 7.3～7.4、pH 7.0～7.1、pH 6.7～6.8 實(shí)驗(yàn)組下降幅度較大，但各組內(nèi)仍差異顯著(P<0.05)，僅在第4 天時(shí)，pH 7.3～7.4 與pH 7.0～7.1 兩組差異不顯著(P>0.05)；第4 天時(shí)，pH 6.7～6.8 實(shí)驗(yàn)組存活率達(dá)到最低，為39.1%。

表1 不同酸化程度下孵化時(shí)間、畸形率和孵化率差異Tab.1 Differences in hatching time, deformity rate and hatching rate under different acidification level

圖3 不同酸化程度下D 形幼蟲(chóng)存活率Fig.3 Survival rate of D-larvae at different acidification level

從圖4 可以看出，不同pH 條件下，D 形幼蟲(chóng)期間對(duì)照組生長(zhǎng)速率均顯著高于實(shí)驗(yàn)組(P<0.05)。4 d 內(nèi)，pH 7.6～7.7組生長(zhǎng)速率均顯著高于其他實(shí)驗(yàn)組(P<0.05)；第1 天，除pH 7.0～7.1 與pH 6.7～6.8 兩組間差異不顯著(P>0.05)外，其余各組間均差異顯著；第2 天，pH 7.3～7.4、pH 7.0～7.1 兩組間差異不顯著(P>0.05)，其余各組間均差異顯著；第4 天時(shí)，實(shí)驗(yàn)組pH 6.7～6.8 生長(zhǎng)速率最慢，僅為5.5 μm/d，而對(duì)照組生長(zhǎng)速率均保持在10 μm/d 以上。

圖4 不同酸化程度下D 形幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)速率比較Fig.4 Growth rate of D-larvae at different acidification level

2.3 不同pH 對(duì)海灣扇貝殼頂幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響

從圖5 可以看出，不同pH 條件下，殼頂幼蟲(chóng)期對(duì)照組存活率與實(shí)驗(yàn)組差異顯著(P<0.05)。幼蟲(chóng)發(fā)育至第7 天，pH 下降0.7～0.8 及更多時(shí)，存活率下降幅度較大，存活率均在20%以下；幼蟲(chóng)發(fā)育至第8 天，實(shí)驗(yàn)組pH 7.0～7.1 和pH 6.7～6.8 的存活率分別為6.1%和5.6%。實(shí)驗(yàn)組pH 7.6～7.7 與其他實(shí)驗(yàn)組相比，雖保持較高存活率，但幼蟲(chóng)發(fā)育至第8 天時(shí)，存活率僅為38.7%，而對(duì)照組存活率仍保持較高水平，為75.2%。從圖6 可以看出，殼頂幼蟲(chóng)期各組生長(zhǎng)速率均差異顯著(P<0.05)，殼頂幼蟲(chóng)發(fā)育期內(nèi)，生長(zhǎng)速率均隨pH 下降而降低。發(fā)育至第8 天時(shí)，pH 7.3～7.4組及以下的生長(zhǎng)速率極低，基本呈生長(zhǎng)停滯狀態(tài)。

圖5 不同酸化程度下殼頂幼蟲(chóng)存活率比較Fig.5 Survival rate of umbo larvae at different acidification level

圖6 不同酸化程度下殼頂幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速率Fig.6 Growth rate of umbo larvae at different acidification level

2.4 不同pH 對(duì)海灣扇貝眼點(diǎn)幼蟲(chóng)附著的影響

不同pH 條件下，各組海灣扇貝眼點(diǎn)幼蟲(chóng)附著率情況見(jiàn)圖7。從圖7 可以看出，除第7 天，pH 7.0～7.1組比 pH 7.3～7.4 組附著率高，二者差異不顯著(P>0.05)，在第3 天和第5 天時(shí)，幼蟲(chóng)附著率均隨pH的下降而降低，且對(duì)照組與各實(shí)驗(yàn)組間差異顯著(P<0.05)。第7 天時(shí)，對(duì)照組附著率最高達(dá)到88.7%，而pH 6.7～6.8 實(shí)驗(yàn)組附著率僅為31.7%。

圖7 不同酸化程度下各組海灣扇貝眼點(diǎn)幼蟲(chóng)附著率Fig.7 Larval adhesive rate of gulf scallop larvae at different acidification level

3 討論

目前，全球海洋酸化正以前所未有的速度快速發(fā)展，據(jù)統(tǒng)計(jì)，海洋酸化已達(dá)到1400 萬(wàn)年來(lái)未見(jiàn)的水平。環(huán)境的惡化對(duì)經(jīng)濟(jì)貝類的早期生長(zhǎng)發(fā)育影響巨大，且直接關(guān)乎人工育苗的成敗，環(huán)境的改變能夠很大程度地影響幼蟲(chóng)的孵化以及生長(zhǎng)存活(Goulletquer et al, 2002; Simon et al, 2006; Gazeau et al, 2011)。海水pH 作為重要的環(huán)境因子之一，國(guó)內(nèi)外對(duì)此研究較少，而主要集中于海水鹽度、餌料、溫度以及重金屬方面(劉文廣等, 2014; James et al, 2005)。

3.1 pH 對(duì)海灣扇貝胚胎發(fā)育的影響

研究表明，pH 對(duì)海灣扇貝胚胎發(fā)育的孵化率、畸形率及孵化時(shí)間均有顯著影響。在孵化率方面，與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)，且隨著pH 的降低，孵化率反而有上升趨勢(shì)，pH 6.7～6.8 實(shí)驗(yàn)組的孵化率達(dá)到60.0%，比pH 7.6～7.7 實(shí)驗(yàn)組高出17.0%，這種情況可能是因?yàn)榕咛グl(fā)育早期僅依靠自身卵黃發(fā)育，外界環(huán)境對(duì)其影響較小所致(劉文廣等, 2012; 尼貝肯,1991)。何盛毅等(2011)對(duì)馬氏珠母貝的研究顯示，pH=7.7 時(shí)，D 形幼蟲(chóng)孵化率[(16.6±12.0)%]顯著低于對(duì)照組[(44.8±7.4)%]，且畸形率[(48.2±9.1%)]比對(duì)照組高3 倍；蔡娟等(2016)對(duì)青蛤的研究顯示，低pH值和高pH 時(shí)，胚胎發(fā)育沒(méi)有明顯滯后，但pH 7.4 組與pH 9.0 組的原腸期胚體轉(zhuǎn)動(dòng)速度較對(duì)照組慢；另外，Kurihara 等(2008)研究pH 7.4 的酸化海水對(duì)太平洋牡蠣和紫貽貝(M. edulis)胚胎發(fā)育的影響，表明胚胎發(fā)育基本不受酸化海水的影響；Gazeau 等(2010)通過(guò)研究紫貽貝發(fā)現(xiàn)，pH 為7.6 條件下，其D 形幼蟲(chóng)孵化率[(24.0±4.0)%]，比對(duì)照組(pH=8.1)條件下低[(12.7±0.9)%]，這些結(jié)果與本研究結(jié)果基本一致，說(shuō)明pH 的降低對(duì)海灣扇貝胚胎孵化具有較大影響。

在畸形率方面，D 形幼蟲(chóng)畸形率在紫貽貝(Gazeau et al, 2010)、太平洋牡蠣(Kurihara et al, 2008)及中間球海膽(Strongylocentrotus intermedius)(秦艷杰等, 2013)中都出現(xiàn)過(guò)。本研究發(fā)現(xiàn)，畸形率隨pH 的下降呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，最高達(dá)到48.4%。Kurihara 等(2008)研究發(fā)現(xiàn)，太平洋牡蠣幼蟲(chóng)也會(huì)出現(xiàn)明顯的畸形，pH 為7.4 時(shí)，畸形率高達(dá)80%，這比海灣扇貝幼蟲(chóng)表現(xiàn)的更為明顯。秦艷杰等(2013)對(duì)中間球海膽的研究顯示，實(shí)驗(yàn)組長(zhǎng)腕幼蟲(chóng)畸形均不同程度地表現(xiàn)為腕短小、萎縮、腕骨針折斷、骨針彎曲變形等。這些研究結(jié)果均表明，D 形幼蟲(chóng)的正常生長(zhǎng)對(duì)外界酸性條件非常敏感，如果海洋酸化持續(xù)加劇，海灣扇貝幼蟲(chóng)將面臨巨大的威脅(王有基等, 2014; Victoria et al,2008)。

胚胎發(fā)育過(guò)程中，pH 下降對(duì)其孵化時(shí)間也有顯著影響。結(jié)果顯示，在pH 為6.7～6.8 時(shí)，發(fā)育至D形幼蟲(chóng)的時(shí)間為29 h，而對(duì)照組僅為21 h。蔡娟等(2016)對(duì)青蛤(Cyclina sinensis)的研究報(bào)道了相似的結(jié)果，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，pH 7.4 組匍匐期發(fā)育時(shí)間延遲約48 h，單水管期發(fā)育時(shí)間延遲約68 h，囊胚期纖毛輪轉(zhuǎn)動(dòng)慢于對(duì)照組，且一直延續(xù)至擔(dān)輪幼蟲(chóng)。這可能是因?yàn)榕咛テ谕耆┞队谒峄h(huán)境中，使幼蟲(chóng)改變了攝食渠道，從外界獲取食物、環(huán)境適應(yīng)能力差異導(dǎo)致(劉文廣等, 2012; 尼貝肯, 1991)。相反，Kurihara 等(2009)研究發(fā)現(xiàn)，地中海貽貝(Mytilus galloprovincialis)胚胎發(fā)育過(guò)程基本不受酸化海水的影響，同樣，可能是胚胎發(fā)育早期僅依靠于自身的卵黃發(fā)育，外界環(huán)境對(duì)其影響較小所致(劉文廣等, 2012;尼貝肯, 1991)。

3.2 pH 對(duì)海灣扇貝幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的影響

存活率是反映貝類幼蟲(chóng)對(duì)環(huán)境耐受性的重要指標(biāo)(尼貝肯, 1991)。當(dāng)環(huán)境條件不適應(yīng)時(shí)，可能會(huì)抑制貝類幼蟲(chóng)的鈣化過(guò)程，導(dǎo)致其生長(zhǎng)緩慢，甚至死亡(Kurihara et al, 2009)。結(jié)果顯示，隨著pH 的降低，存活率也同時(shí)下降。Dove 等(2007)對(duì)巖牡蠣(Saccostrea glomerata)的研究發(fā)現(xiàn)，被酸化的河口地區(qū)牡蠣死亡率高且生長(zhǎng)速度慢。Watson 等(2009)對(duì)巖牡蠣的研究中也發(fā)現(xiàn)同樣的結(jié)果，在pH 下降0.3 的情況下，存活率下降了43.0%；在pH 下降0.5 的情況下，存活率下降了72.0%，這與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相近。

影響幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的因素包括環(huán)境因素、自身發(fā)育階段因素以及幼蟲(chóng)的耐受性等(Gatos et al, 1998)。海水pH 作為重要的環(huán)境因子之一，加之海洋酸化的加速，對(duì)于幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)發(fā)育是一個(gè)巨大的挑戰(zhàn)。海洋酸化由于CO2的過(guò)度溶解，會(huì)打破海水中碳酸鈣溶解平衡，而碳酸鈣作為形成貝類貝殼及海洋生物骨骼的重要物質(zhì)，pH 下降會(huì)阻礙某些生物形成碳酸鈣的能力，進(jìn)而影響該生物的生長(zhǎng)、繁育(Gatos et al, 1998)。對(duì)于雙殼貝類，Green 等(2004)研究發(fā)現(xiàn)，在pH 為7.4 的條件下，太平洋牡蠣幼蟲(chóng)發(fā)育緩慢，鈣化程度降低，并且個(gè)體多數(shù)出現(xiàn)少殼缺殼現(xiàn)象；Gazeau 等(2010)在紫貽貝的研究中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)pH 下降0.25～0.34時(shí)，在2 d 和13 d 時(shí)的殼高分別下降了4.5%和6.0%；當(dāng)pH 下降0.5 時(shí)，15 d 時(shí)的殼厚下降了12.0%。本研究結(jié)果與前述研究結(jié)果基本相同，這說(shuō)明酸化海水對(duì)于幼蟲(chóng)的影響仍然存在，并且幼蟲(chóng)的耐受性相比之前大幅下降。同樣，在對(duì)馬氏珠母貝(何盛毅等, 2011)的研究中發(fā)現(xiàn)，D 型幼蟲(chóng)生長(zhǎng)緩慢，且畸形率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對(duì)照組；在Green 等(2004)對(duì)幼年硬殼蛤(Mercenaria mercenaria)研究發(fā)現(xiàn)，在文石不飽和水體中死亡率顯著增加，外殼在2 周內(nèi)全部溶解。研究表明，導(dǎo)致海洋生物生長(zhǎng)發(fā)育緩慢可能是因?yàn)槠浼?xì)胞滲透壓發(fā)生改變，為了維持體內(nèi)的酸堿平衡，必然會(huì)轉(zhuǎn)移部分用于其他生理過(guò)程的能量進(jìn)行反饋補(bǔ)償性代謝，影響了生物其他的正常生理活動(dòng)，導(dǎo)致生長(zhǎng)發(fā)育變慢(湛垚垚等, 2013)。這些研究結(jié)果均表明，酸化海水對(duì)貝類的生長(zhǎng)發(fā)育影響巨大。Cooley 等(2009)預(yù)測(cè)，到2060 年，海洋酸化將會(huì)給美國(guó)貝類產(chǎn)業(yè)帶來(lái)嚴(yán)重影響，將造成14 億美元的經(jīng)濟(jì)損失。

3.3 pH 對(duì)海灣扇貝眼點(diǎn)幼蟲(chóng)附著的影響

當(dāng)眼點(diǎn)幼蟲(chóng)比例>50%時(shí)，需要投放附著基，此時(shí)是貝類由浮游幼蟲(chóng)向稚貝轉(zhuǎn)變的重要發(fā)育階段。當(dāng)環(huán)境發(fā)生變化時(shí)，幼蟲(chóng)會(huì)出現(xiàn)附著延長(zhǎng)或者不附著等，甚至死亡(張濤等, 2001)。本研究結(jié)果顯示，隨著pH 的降低，附著率降低，第7 天時(shí)，對(duì)照組附著率最高達(dá)到88.7%，而pH 6.7～6.8 實(shí)驗(yàn)組附著率僅為31.7%。Welladsen 等(2010)對(duì)合浦珠母貝(Pinctada fucata)研究顯示，pH 7.8 和7.6 酸性條件下，足絲的生產(chǎn)數(shù)量和總長(zhǎng)度與對(duì)照組相比，沒(méi)有明顯差異，但在pH 7.6 條件下，珠母貝足絲明顯比對(duì)照組細(xì)。另外，Donnell 等(2013)研究發(fā)現(xiàn)，高濃度CO2條件下，貽貝足絲韌性下降，與對(duì)照組相差40.0%。結(jié)果表明，pH 下降會(huì)削弱雙殼貝類的附著能力。

4 結(jié)語(yǔ)

通過(guò)研究不同pH 條件下海灣扇貝胚胎發(fā)育及幼蟲(chóng)生長(zhǎng)情況，證明pH 下降對(duì)雙殼貝類的影響巨大，說(shuō)明海水酸化的不斷加劇，將嚴(yán)重影響海洋中的生物，尤其是甲殼類、無(wú)脊椎生物的生存。總之，pH下降問(wèn)題涉及各海域海洋生物及生態(tài)系統(tǒng)，尤其是近岸海域。需開(kāi)展進(jìn)一步研究，尋找不同貝類在遺傳及生理等水平上對(duì)酸化海水的響應(yīng)及適應(yīng)情況，積極采取應(yīng)對(duì)措施，構(gòu)筑海洋生態(tài)屏障。