恩替卡韋分散片的制備及質量控制

謝明珠

摘? 要：目的：本文只要探究恩替卡韋分散片的制備工藝和成分質量控制。方法：恩替卡韋分散片制備的成分為交聯聚維酮、乳糖、微晶纖維素、聚維酮共同組成。利用HPLC色譜法檢驗恩替卡韋分散片的主要成分含量，以此鑒定藥片含量的質量。使用梯度洗脫法鑒定B、C、D、E四種已知處方雜質的構成。除了上述雜質外，還存在其他雜質的成分，鑒定這些雜質采用手性色譜柱完成對映異構體的有效分離。結果：通過對恩替卡韋分散片質量控制，明確了藥物的主要組成成分，對于4中雜質進行對映異構體的分離。結論：在本實驗中制備的散片處方符合藥理的基準，制備工藝操作簡便，通過梯度洗脫法能夠對散片存在的雜質高效分離，有效控制散片雜質純度降低。

關鍵詞：恩替卡韋分散片;制備;質量控制

在藥典記敘中表明恩替卡韋分散片是治療慢性乙肝的藥物，其組成結構為脫氧鳥嘌呤核苷類似物，能有效抑制病毒的增長，具備良好的藥效特征，在治療慢性乙肝的前景上具備臨床應用的效果。恩替卡韋分散片主要由美國藥物研究機構進行生產，具備較低的抗耐性，但是我國對于美國生產的恩替卡韋分散片，其含量成分沒進行過綜合的檢定，因此藥物成分包含諸多的雜質，影響藥物含量的純度。采用梯度洗脫法，分離對映異構體，對散片的質量進行合理的控制，有效解決雜質分離的問題，保證藥物臨床安全使用性能。

1 儀器和試藥

儀器：260型高效液相色譜儀、GHL150型高速混合制粒機、ZP15旋轉壓片機和SYH100型三維運動混合機。

試藥：雜質A對照品、雜質B對照品、雜質C對照品、雜質D對照品和雜質E對照品。

阿司帕坦、恩替卡韋原藥、恩替卡韋分散片、聚維酮K30、桃味香精。水使用的是娃哈哈純凈水，三乙胺、三氟乙酸、無水乙醇、正乙烷和乙腈都是色譜純。

2 方法與結果

2.1 恩替卡韋分散片的制備

2.1.1 輔料的相容性

將硬脂酸鎂、乳糖、PVPK30、PVPP、MCC101、桃味香精、阿司帕坦和恩替卡韋按照1：100：70：10：1：1：0.5來進行混合，并且將其分別的放置在高溫、高濕下，經過10h的考察之后就能夠發現，各種輔料都是在4min之前就出峰，而且不會受到任何因素的影響，輔料呈現穩定性，對于恩替卡韋是沒有任何的干擾的。

2.1.2 處方工藝

取0.5g恩替卡韋原藥，過80目篩，之后加入PVPP10g、MCC75g、乳糖100g，將其混勻，之后向里面加入粘合劑溶液，過24目篩制粒，在45℃左右進行干燥，之后過24目篩整粒。向里面加入香精和硬脂酸鎂，進行混勻處理，之后在80N壓力下來進行恩替卡韋分散片的制定，一共有1000片，而且每一片藥物會含0.5mg的恩替卡韋。

2.2 含量測定

2.2.1 色譜條件和系統適用性

根據2010版的中國藥典規定進行測定。色譜柱是WelchUltimateC18柱，流速是1.0ml·min-1，柱溫是30℃，流動相是乙腈-水-三氟乙酸（50∶950∶0.5），檢測波長是254nm，進樣量為100μL。拖尾因子按恩替卡韋峰計為0.8～1.5，理論板數按恩替卡韋峰計應≥30000。

（1）供試品溶液Ⅰ

取本品20片，研細，取適量粉末（相當于恩替卡韋0.5mg）置50mL量瓶中，加流動相適量，超聲15min，冷至室溫后定容，過濾，取續濾液即得。

（2）對照品溶液

精密稱取恩替卡韋對照品20mg置100mL量瓶中，加流動相適量，同上操作。移取2.5mL置50mL量瓶中，加流動相定容，得10μg·mL-1的對照品溶液。

2.2.2 有關物質測定

色譜條件篩選：關于恩替卡韋有關物質分析方法，文獻及上市品標準中均采用梯度洗脫方法，但又不盡相同，本研究將從以下幾方面確定有關物質的分析方法。

色譜柱的選擇：分別選用不同廠家不同型號的色譜柱（250mm×4.6mm，5μm），以施貴寶進口標準條件為例，以塔板數、對稱因子及分離度。系統適用性要求恩替卡韋峰對稱因子介于0.8～1.2，塔板數不低于30000，對比以上結果，選用WelchXBC18柱。

梯度條件的選擇：為驗證進口原料藥標準，施貴寶進口標準、正大天晴標準中梯度條件（見表1）對測定的影響，分別采用各條件下的流動相A為溶劑，將恩替卡韋原藥配成50μg·mL-1的供試品溶液Ⅱ，進樣測定。色譜圖見圖1：

從表1可以觀察出，進口原料藥、施貴寶、正大天晴的流動相組成和梯度程序。根據圖1有關物質摸索的HPLC色譜圖，觀察出進口原料藥在標準條件下，在梯度脫洗過程中，在15分鐘處有一個明顯的尖峰，對于雜質的分離難度較大，而正大天晴分離雜質出峰時間適中，在5分鐘處就開始分離雜質，但是分離梯度脫洗的時間較長，和進口原料藥相比，分離基線較為穩定，只在20分鐘后基線出現輕微波動。施貴寶的出峰時間在15分鐘-20分鐘，出峰的時間照比進口原料藥和正大天晴時間延長，但后期的基線同兩者比穩定。

在表1 條件梯度列表中，施貴寶和正大天晴，流動相的測定使用三氟乙酸，三氟乙酸作為離子分離試劑，其主要作用是改善峰型，調節離子保留時間的功能。參照施貴寶流動相的加入成分，在溶液中加入0.1%的三氟乙酸溶劑，則對照品雜質E的主峰分離度小于1.5，不能達到分離的標準。而參照正大天晴流動相進行雜質分離，填入三氟乙酸的比例為0.05%，對照品雜質E的主峰分離度大于1.5，分離雜質的純度符合分離的標準。

恩替卡韋分散片在酸堿性條件下可溶解，也可在水溶液條件下溶解，本實驗分別觀察0.01mol·L-1的鹽酸溶液和流動相A溶劑，A溶劑由乙腈水于三氟乙酸的混合溶劑，觀察溶劑對主峰的影響。通過實驗結果表明，流動相溶劑A和鹽酸溶都能將藥劑的主要成分提取出來，提取的含量分別為（98.8±0.10）%和（99.0±0.12）%，提取的溶液均為混合懸濁液體，通過濾網過濾，得到澄清溶液，但在鹽酸為溶劑的情況下，在4分鐘和6分鐘處，出現兩個溶劑干擾峰波，所以對于上述三種藥物雜質的分離，最好選取流動相溶劑A。

3 穩定性試驗

在對3批包裝樣品進行加速試驗，溫度和濕度控制在（25±2）℃和（60±10）%，藥品存放12個月，分貝在3、6、9、12月進行藥品穩定性取樣，檢查藥品的含量和有關物質對映異構體變化，結果如表2所示。

4 討論

總的來說，由于樣品的規格較小，在藥劑的制備上，首先考慮雜質混合均勻的問題，恩替卡韋分散片根據說明可在水中溶解，將藥物粉末進行粉碎，在60～70℃溶解度由2.4mg·mL-1提高至2.8mg·mL-1。在梯度脫洗試驗發現雜質分離存在難度，應加原藥進行過篩再混合，實驗通過延長混合時間提升藥劑含量均勻性。

參考文獻

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