薛天星
中圖分類號:S858.31? ? ?文獻標識碼:C? ? ?文章編號:1673-1085(2020)9-0027-03
在不采取防控措施的雞群中,腫瘤病不僅發病率高、死亡率高,而且有多種不同的病毒可誘發腫瘤。此外,每一種病毒誘發腫瘤的組織器官分布和細胞類型還表現出相當的多樣性。在典型病例,不同病毒誘發的腫瘤有一定的特征,但在現場看到的腫瘤病例,卻常常不那么典型;另一方面,即使是同一種病毒,在不同品種、不同年齡、不同免疫或感染狀態下不同個體發生的腫瘤差異也可能非常大。
在雞群中,最常見的致腫瘤性病毒有3種,即馬立克氏病病毒(MDV)、雞白血病病毒(ALV)和雞網狀內皮組織增殖病毒(REV)。此外,由雞戊型肝炎病毒誘發的肝脾、腺胃腫大以及肝、脾、腎變性或壞死,通稱為雞大肝大牌病,也很容易被雞場的獸醫技術人員或飼養員誤判為腫瘤。因此,雞群中腫瘤病的鑒別診斷,一直困擾著禽病診斷實驗室及禽病專家。在雞群中不僅常常存在著這幾種病毒不同組合的二重感染,甚至還可能同時存在這3種病毒。這不僅給鑒別診斷帶來困難,也使預防控制措施變得更為復雜。為了確定腫瘤問題的發生原因及找到解決的方法,必須依賴于準確的鑒別診斷。
1? 診斷要點
在進行人和大動物腫瘤病的鑒別診斷時,針對的是臨床個例,只要確定腫瘤發生的器官位置及細胞類型就可完成診斷目的。但對規模化飼養的雞群來說,必須要弄清引發腫瘤的病因,即究竟是哪種病毒引發的腫瘤。只有這樣才可能闡明究竟在養雞生產的哪一個代次、哪一個環節出了問題,從而為預防下一批雞的腫瘤病提供具體措施。但在雞群中由MDV、REV、ALV誘發的腫瘤既有差別,又易混淆,因此必須從不同角度收集資料,通過綜合比較才能做出比較客觀、有說服力的結論。
2? 流行病學資料
腫瘤開始出現及發病高峰時病雞的年齡,對于不同病毒引發雞的腫瘤的鑒別有重要參考價值。一般來說,MDV誘發的腫瘤可以從2月齡開始,偶爾在1月齡就可出現,但腫瘤死亡的高峰多在3~4月齡左右。MDV誘發的腫瘤發病率隨MDV疫苗免疫質量不同而可能有很大差異。
經典的A、B、C、D亞型ALV誘發的淋巴樣腫瘤多在6月齡以后才會出現,但一般死亡率不會太高,國內近20年中很少見有5%以上的死亡率。ALV-J引發的骨髓樣細胞瘤發生得較早一點,在開產前的16~18周齡就可開始,但發病死亡的高峰是在開產后,嚴重的每周死亡率可達1%,并持續數周。
單純由REV引發腫瘤的自然發病并不常見,發病多在6月齡以后,我國雞群中近幾年見到的多因為雛雞接種的弱毒疫苗中污染REV所致。在這種情況下,腫瘤發生較早,發病率也高,但究竟是MDV腫瘤還是REV腫瘤還需實驗室檢測。
3? 病理剖檢變化
MDV、REV和A、B、C、D亞型ALV誘發的淋巴樣細胞瘤,均可出現在不同的臟器,在形態大小和數量上也是多種多樣,很難鑒別診斷。但是,由ALV-J引發的骨髓樣細胞瘤比較有特征性,大多數病雞都表現為肝顯著腫大,肝臟上有無數呈彌漫性分布的針頭或針尖大小的白色腫瘤結節。病雞一旦出現這種病理變化,一般就可作出ALV-J引發骨髓樣細胞瘤的判斷。因為迄今為止還很少由其他亞型ALV或由MDV和REV引發腫瘤時會出現這種病理變化。但是,要注意與肝變性引發的白色斑點相區別。在ALV-J誘發的腫瘤病病雞的脾臟也常常腫大并顯出腫瘤結節。這時,要注意與雞戊型肝炎引發的大肝大脾相區別。后者主要是炎性細胞浸潤或壞死、充血引起的大肝大脾,嚴重時還迸發肝破裂出血。
此外,近幾年,在蛋雞腳爪、翅等處皮膚常發現一些出血不止的血管瘤,這很可能是由不同亞型的ALV引起的。
4? 病理組織學觀察
這是腫瘤病鑒別診斷的重要依據之一,特別是根據用蘇木素-伊紅染色(H.E染色)的組織切片進行觀察,可初步判斷是否是腫瘤性病變還是其他病變。但是在雞的腫瘤中,由MDV、REV和A、B、C、D亞型ALV誘發的腫瘤多為淋巴細胞瘤。MDV誘發的主要是細胞大小不均一的T淋巴細胞瘤,而ALV誘發的是大小相對均一的B淋巴細胞瘤,REV誘發的腫瘤既可以是T淋巴細胞瘤也可能是B淋巴細胞瘤。這使得最常見的淋巴細胞瘤的病因鑒別更為復雜。相對而言,由ALV-J引發的骨髓樣細胞瘤的組織學病理變化比較有特征性,即可見大量的、單一的骨髓樣細胞瘤細胞,這類細胞形態較大,其細胞質中有嗜酸性顆粒。雖然A、B、C、D亞型ALV也可能引發類似的骨髓樣細胞瘤,但比較少見,在發病雞群中比例不會很高;另一方面,要注意把骨髓樣細胞瘤浸潤與中性粒細胞的炎性細胞浸潤相區別。因為中性粒細胞在形態大小上與骨髓樣細胞瘤細胞非常類似,在細胞質中也有嗜酸性顆粒。例如,在雞戊型肝炎病毒引發的肝腫大,在一定發病時期,就可能見到中性粒細胞的炎性浸潤。
一般來說,骨髓樣細胞瘤中的細胞成分很均一,而在炎性浸潤時,除了中性粒細胞外,還可能有其他不同類型的炎癥細胞,如淋巴細胞、單核細胞等。當然,在臨床上還可能見到其他不同細胞類型的腫瘤,但其發病率不高,很少大批發生。從生產角度考慮,不大可能也不需要逐一完成鑒別診斷。雖然病理組織學觀察很重要,也很有鑒別診斷價值,但目前大多數禽病專家已認識到,單一靠HE染色病理組織學切片的觀察結果不足以作出確鑿的鑒別診斷。
5? 病理切片的免疫組織化學法檢測
利用MDV、REV或ALV特異性的單克隆抗體或單因子血清,對腫瘤組織切片免疫組化染色顯示病毒特異性抗原有助于判斷引發腫瘤的病因。但這一方法的技術難度較大,目前還沒有普遍采用;另一方面,利用腫瘤細胞特定的細胞類型的表面標志蛋白的特異性抗體做免疫組化,也是正在研究中的新方法。
6? 病毒的分離鑒定
將腫瘤組織懸液或疑似腫瘤病雞血漿接種雞胚成纖維細胞分離病毒,是確定患有腫瘤的雞群中有哪種腫瘤性病毒感染的最直接依據。
如果我們對一群雞檢測了一定數量的個體和樣品,如果某腫瘤病病毒的檢出率比較高,可判斷為該群雞發生腫瘤的主要傳染性病原。
7? 作出判定
以上5個方面的資料和結果只是為鑒別診斷提供了客觀的科學依據,而最終的結論還是由禽病專家根據個人經驗和國內外學術界的普遍接受的學術觀點作出判斷。這里特別要強調的一點是:對雞的腫瘤病,我們面對的是一個群體,而且是一個動態的群體。由于在雞群中可能存在著MDV、REV和ALV不同病毒組合的二重感染甚至三重感染,在同一群體個體與個體間是不盡相同的。我們不能僅憑一、兩只病雞的樣品的觀察或檢測結果就對全群作出結論性的判斷。對一群雞在一個發病時期內至少要全面檢測6~10只雞的相關樣品,必須根據檢出的比例關系作出判斷。
8? 防治措施
在雞常見的這3種病毒性腫瘤病中,MDV主要是由孵化廳或雞場的早期橫向感染引起,而REV和ALV則主要是由種雞的垂直傳播及早期橫向感染引起(特別是在出殼后1~2 d運輸過程中發生,也可能由接種了污染有REV或ALV的弱毒疫苗特別是馬立克氏病疫苗或禽痘疫苗引起)。
目前市場上提供的液氮保存的CV1988/ Rispens株細胞結合苗對我國雞場中現行的MD流行毒株的保護性免疫效果應該是很好的。如果仍然出現MDV引發的腫瘤問題,則有以下3種可能性:①疫苗中有外源性病毒特別是REV污染;②雛雞中有免疫抑制性病毒(如REV、ALV或傳染性貧血病毒)早期感染。這兩種可能都會抑制疫苗的效果;③疫苗的保管使用中存在問題。顯然,在對這3種病毒性腫瘤的預防控制實際上是相互關聯的。
對REV和ALV感染目前還沒有疫苗預防,主要靠凈化種源來減少感染,但這一點恰恰是我國養雞業最忽視的一個方面。目前,我國自繁自養的種雞群(包括各種地方品系的肉用型雞,也包括一部分多年前引進、現自繁自養的蛋用型雞)中,幾乎都存在著不同程度的REV和不同亞型ALV的感染。雖然多數種雞場發生垂直感染的比例很低,但病毒垂直感染的發生是不均勻的。有些種群的特定批次,可能會出現很高的垂直感染率。少量的垂直感染在運輸用的包裝箱中可引起很高的橫向感染率。近幾十年中、國際大型種雞公司,一直長期堅持對種雞群的外源性ALV的檢測和凈化工作。因此,直接進口的種雞,不論蛋用型和肉用型雞,其外源性ALV感染率是很低的。我國自繁自養的種雞群也必須盡快實施對ALV的檢測和凈化,對REV的垂直感染,現在沒有達到種群凈化的水平最重要的是控制弱毒疫苗的污染。