五種消毒劑殺菌效果實驗

李燕 趙瑋 石海春 張孝蘭

摘? 要：本實驗選擇5種消毒劑分別對5種細菌殺菌效果進行評估，結(jié)果表明，衛(wèi)可稀釋至1600倍、聚醇醚碘稀釋至200倍、苯扎溴銨稀釋至5000倍、過氧乙酸稀釋至3000倍、戊二醛稀釋至100倍，作用10 min，可完全殺滅腸炎沙門氏菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌和綠膿桿菌。

關(guān)鍵詞：消毒劑;細菌;殺菌效果

中圖分類號：S859.79+9.1? ? ?文獻標識碼：B? ? ?文章編號：1673-1085（2020）9-0051-03

養(yǎng)雞場利用化學(xué)消毒劑對雞舍及其周圍環(huán)境進行消毒是做好生物安全措施的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[1]，化學(xué)消毒劑根據(jù)其作用機制和化學(xué)結(jié)構(gòu)，可以分為堿類、氯類、碘類、溴類、醛類、醇類、過氧化物類、酚類、季銨鹽類、雙胍類等，其作用機理主要是改變微生物結(jié)構(gòu)，干擾細胞代謝，導(dǎo)致微生物死亡[2-3]。

為反映不同種類消毒劑對不同致病菌的殺滅效果，本實驗采用細菌懸液定量法，選取生產(chǎn)中常用的5種消毒劑作為研究對象，分別就其對沙門氏菌、大腸桿菌、葡萄球菌、變形桿菌、綠膿桿菌等5種常見致病菌的殺菌效果和有效滅菌濃度進行研究，為生產(chǎn)場區(qū)選擇有效消毒液提供參考。

1? 材料

1.1? 菌株? 腸炎沙門氏菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌和綠膿桿菌，均為從雞場環(huán)境和孵化場毛蛋中分離到的菌株，用鑒別培養(yǎng)基純化，再用營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)后凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.2? 消毒劑? 衛(wèi)可、聚醇醚碘、苯扎溴銨、過氧乙酸和戊二醛。

1.3? 其它試劑和實驗材料? 營養(yǎng)肉湯、生理鹽水、18 mm×180 mm 帶塞試管、棉簽、100 μL吸頭、 1 mL吸頭、10～100 μL單道移液器、100～1000 μL單道移液器、5 mL單道移液器、超凈工作臺、37 ℃恒溫培養(yǎng)箱、麥氏比濁管、分光光度計、高壓滅菌鍋等。

2? 方法

2.1? 制備菌液? 將純化的細菌用滅菌棉簽涂布到瓊脂板上，24 h后用滅菌生理鹽水把菌苔洗下來，用麥氏比濁管法和分光光度計法調(diào)整細菌濃度為2×108 CFU/mL。

2.2? 消毒劑溶液的配制? 每種消毒劑按廠家提供的濃度，適當擴大或縮小稀釋倍數(shù)，用無菌純水對消毒液進行稀釋。

2.3? 懸液定量殺菌試驗[4]? 取4.5 mL各種濃度消毒液加到滅菌的6 mL離心管中，37 ℃預(yù)熱，然后將0.5 mL菌懸液加入預(yù)熱的消毒液中，立刻混合均勻并記時，同時設(shè)立陽性對照（0.5 mL菌懸液和4.5 mL生理鹽水）和陰性對照（5 mL生理鹽水），37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中分別作用10 min和30 min，吸取100 μL混合液均勻加入營養(yǎng)瓊脂平板中，37 ℃恒溫培養(yǎng)24 h，觀察結(jié)果并進行菌落計數(shù)。

3? 結(jié)果

檢測結(jié)果見表1。

在實驗室條件下，衛(wèi)可稀釋至1600倍、聚醇醚碘稀釋至200倍、苯扎溴銨稀釋至5000倍、過氧乙酸稀釋至3000倍、戊二醛稀釋至100倍，作用10 min，可完全殺滅5種細菌。低濃度的戊二醛作用10 min，仍有細菌生長，但是延長作用時間至30 min，可完全殺滅細菌，其他消毒液也有相同情況，說明延長消毒液作用時間可增強抑菌效果。菌落計數(shù)結(jié)果表明，相同濃度的消毒液對綠膿桿菌的殺滅效果低于其他4種細菌，可見屬于假單胞菌屬的綠膿桿菌抗藥性較強。

4? 討論

五種消毒劑中，衛(wèi)可主要成分是過硫酸氫鉀三鹽復(fù)合物，可以殺滅各種病原微生物，其代謝產(chǎn)物不會對人類和環(huán)境帶來影響，主要用于禽舍、空氣、飲水、畜禽等消毒。過氧乙酸屬于過氧化物類消毒劑，氧化性極強，因其腐蝕性強，要避免高濃度大劑量使用，使用過程中注意安全。聚醇醚碘是單質(zhì)碘、聚乙二醇和苯基醚復(fù)合物，刺激性、腐蝕性和毒性低，常用于皮膚甚至粘膜消毒;但是碘易揮發(fā)，見光易分解，需要密封、避光保存。苯扎溴銨是一種季銨鹽陽離子表面活性消毒劑，毒性低、無腐蝕性、性質(zhì)穩(wěn)定，主要用于器械、物體表面和手部消毒，忌與碘制劑、過氧化物和陰離子表面活性劑同用。戊二醛是活潑的烷化劑，其抗菌活性不受低溫影響，2%的堿性戊二醛溶液活性較強，能殺滅細菌繁殖體、真菌、芽胞，刺激性小，主要用于雞舍噴霧和器具浸泡消毒。

本實驗結(jié)果表明，按照廠家推薦的濃度，衛(wèi)可和過氧乙酸滅菌效果很好，聚醇醚碘和苯扎溴銨基本符合，戊二醛低濃度不能完全殺滅細菌，但可以通過延長作用時間來達到更好的殺菌效果。本實驗是在實驗室條件下進行的，而在實際應(yīng)用過程中會受到有機物、溫度、稀釋液等因素的影響[5]，建議消毒前先徹底清掃污物，還要注意稀釋液的酸堿度，根據(jù)不同消毒對象選擇不同種類消毒劑和使用濃度。同時，盡量避免消毒劑混合使用，可以交替使用消毒劑，降低單一消毒劑對致病菌的耐藥性[6]。

參考文獻：

[1]? 孫秀如，盧永勝，張梅芳，等.如何建立種雞場的生物安全體系[J].中國家禽，2008，11（2）：43-44.

[2]? 佟海山，陳遇英.我國獸用消毒劑的應(yīng)用現(xiàn)狀與對策[J].中國獸醫(yī)雜志，2017，53（9）：115-117.

[3]? 任凱，解猛，姜文漢，等.常用化學(xué)消毒劑的作用機理[J].中國衛(wèi)生工程學(xué)，2004，3（1）：55-56.

[4]? 徐利平，陳小萍.戊二醛消毒劑的安全性與臨床應(yīng)用[J].中國消毒學(xué)志，2005，22（1）：96-98.

[5]? 安云科.影響消毒劑效果的因素及選擇消毒藥的原則[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2012（1）：78-79.

[6]? 班海群， 李新武， 張流波.消毒劑的使用對細菌耐藥的潛在影響[J].中國消毒學(xué)雜志，2008，2（3）：308-312.