賓川縣2014年-2018年艾滋病HIV抗體檢測蛋白免疫印跡法（WB）條帶特征分析

楊桂霞

摘要：目的：探討賓川縣2014年-2018年艾滋病HIV抗體檢測WB確證條帶特征。方法：2014年-2018年賓川縣疾病預防控制中心檢測的HIV-1抗體陽性樣本共332例，采用酶聯免疫吸附法（ELISA-麗珠、梅里埃）和快速檢測法（RT）開展HIV抗體初次篩查。使用WB法確證檢測HIV-1初篩結果為陽性的標本。分析人口學特征、HIV-1抗體陽性樣本帶型。結果：（1）共332例HIV-1抗體陽性病例，男225例，女107例;<20歲5例，20-39歲119例，40-59歲155例，≥60歲53例;文盲14例;小學153例;初中141例;中專及高中17例;大專及以上5例;不詳2例;未婚79例，已婚190例，離異及喪偶63例。2014年-2018年各年年間的性別比例、年齡特征、受教育程度、婚姻狀況等無明顯差異，P>0.05。（2）gag核心蛋白帶型p17陽性數315例（94.88%），p24陽性數331例（99.70%）;pol反轉錄酶蛋白帶型p31陽性數292例（87.95%），p51陽性數330例（99.40%），p66陽性數331例（99.70%）;env膜蛋白帶型gp41陽性數299例（90.06%），gp120陽性數325例（97.89%），gp160陽性數332例（100.00%）。結論：賓川縣HIV-1抗體陽性主要集中在20-59歲、小學和初中文化水平、已婚男性人群，應當對該類人群進行積極干預;WB帶型全條型病例多，提示許多HIV病毒感染者可在活躍期被發現。

關鍵詞：艾滋病HIV抗體檢測;WB確證條帶;特征

【中圖分類號】R415 ??【文獻標識碼】A ??【文章編號】1673-9026（2020）06-229-02

我國艾滋病低流行，截至2018年，艾滋病病毒感染病例正在逐年增加[1]。其中，高危人群為男男性行為人群。本研究探討賓川縣2014年-2018年艾滋病HIV抗體檢測WB確證條帶特征。

1.資料與方法

1.1基本資料

2014年-2018年賓川縣疾病預防控制中心檢測的HIV-1抗體陽性樣本共332例，樣本源來自我中心自愿咨詢檢測及賓川縣各醫療機構送檢的待查樣本。

1.2方法

采用酶聯免疫吸附法（ELISA-麗珠、梅里埃）和快速檢測法（RT）開展HIV抗體初次篩查。使用WB法確證檢測HIV-1初篩結果為陽性的標本。試劑包括：ELISA試劑，珠海麗珠、梅里埃;WB試劑，MP生物醫學亞太私人有限公司。實驗儀器包括：全自動蛋白免疫印跡儀。

配制試劑：將1體積的濃縮洗滌緩沖液（20X） 加入到19倍體積的雙蒸餾水中，充分混勻。把1體積的濃縮樣品稀釋緩沖液加入到9倍體積的蒸餾水中，充分混勻，每20毫升加入1g封閉粉，充分混勻。按1：1000比例配好封閉緩沖液稀釋酶結合物。

試驗步驟：

用鑷子小心取出需要的試劑膜，分別放入孵育板槽內。每槽內加入2 ml 稀釋的洗滌緩沖液，在室溫下（25±3）℃將孵育板置搖床上振蕩孵育至少5min，以吸引器吸出緩沖液。在每槽中加入2ml 配好的封閉緩沖液，分別加入20ul患者血清和強陽性、弱陽性、陰性對照。蓋上蓋子，于室溫下（25±3） ℃在搖床上過夜（16～20 h） 振蕩孵育。小心掀開蓋子以避免濺出或樣品交叉，以吸引器吸出反應液。每槽中加入 2 ml 的洗滌緩沖液，每次置搖床上振蕩5min。棄洗液，再重復兩次。每槽中加入2ml酶結合物工作液，蓋上蓋子，于室溫下（25±3）℃在搖床上振蕩孵育 30 min。仔細打開蓋子，吸出酶結合物溶液，按步驟6洗滌3次。每槽中介入2ml底物液，蓋上蓋子，于室溫下（25±3）℃在搖床上振蕩孵育15min。小心打開蓋子，吸出底物，以雙蒸餾水洗滌3次，以終止反應。用鑷子小心取出試劑膜，放在濾紙上，吸干水分，觀察并記錄結果。

注：結果判斷：《全國艾滋病檢測技術規范》（2019版本）

1.3觀察指標

分析人口學特征、HIV-1抗體陽性樣本帶型。

1.4統計學方法

采用SPSS20.0統計學軟件進行統計分析，對正態分布的數據進行t檢驗，對非正態分布的數據進行卡方檢驗，采用平均數±標準差的形式表示數據的分布趨勢，P<0.05表示數據的比較差異具有統計學意義。

2.結果

2.1分析人口學特征

共332例HIV-1抗體陽性病例，男225例，女107例;<20歲5例，20-39歲119例，40-59歲155例，≥60歲53例;文盲14例;小學153例;初中141例;中專及高中17例;大專及以上5例;不詳2例;未婚79例，已婚190例，離異及喪偶63例。2014年-2018年各年年間的性別比例、年齡特征、受教育程度、婚姻狀況等無明顯差異，P>0.05。（如表1）

2.2分析HIV-1抗體陽性樣本帶型

gag核心蛋白帶型p17陽性數315例（94.88%），p24陽性數331例（99.70%）;pol反轉錄酶蛋白帶型p31陽性數292例（87.95%），p51陽性數330例（99.40%），p66陽性數331例（99.70%）;env膜蛋白帶型gp41陽性數299例（90.06%），gp120陽性數325例（97.89%），gp160陽性數332例（100.00%）。（如表2）

3.討論與結論

蛋白印跡試驗（WB）帶型特征的影響因素復雜，包括：個體自身的HIV結構蛋白濃度、抗原性強度、產生抗體的時間、個體對抗原成分的反應敏感度、對抗原的免疫應答等等[2-3]。本研究顯示，共332例HIV-1抗體陽性病例，男225例，女107例;<20歲5例，20-39歲119例，40-59歲155例，≥60歲53例;文盲14例;小學153例;初中141例;中專及高中17例;大專及以上5例;不詳2例;未婚79例，已婚190例，離異及喪偶63例。2014年-2018年各年年間的性別比例、年齡特征、受教育程度、婚姻狀況等無明顯差異，P>0.05。gag核心蛋白帶型p17陽性數315例（94.88%），p24陽性數331例（99.70%）;pol反轉錄酶蛋白帶型p31陽性數292例（87.95%），p51陽性數330例（99.40%），p66陽性數331例（99.70%）;env膜蛋白帶型gp41陽性數299例（90.06%），gp120陽性數325例（97.89%），gp160陽性數332例（100.00%）。

綜上所述，賓川縣HIV-1抗體陽性主要集中在20-59歲、小學和初中文化水平、已婚男性人群，應當對該類人群進行積極干預;WB帶型全條型病例多，提示許多HIV病毒感染者可在活躍期被發現。

參考文獻

[1]黃小娟，曹明玉，辛艷泓， 等.155例HIV抗體陽性者ELISA與WB結果分析[J].中國艾滋病性病，2017，23（5）：458-460.

[2]吳可可，謝愛蓉，王建， 等.利用logistic回歸模型對艾滋病病毒抗體不確定者轉歸分析[J].疾病監測，2018，33（10）：839-843.

[3]張秀娟，張蕾，李霞.HIV-1抗體不確定者跟蹤監測結果分析[J].中國衛生檢驗雜志，2015，25（14）：2396-2398.