液體活檢在三陰性乳癌基因突變檢測中的應(yīng)用效果探索

中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊(duì)第九八九醫(yī)院（471003）聶靜

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月～2019年1月我院收治的經(jīng)病理診斷確診的62例三陰性乳癌基因突變患者，年齡為42～69歲，平均年齡為（55.5±4.9）歲，其中23例為患者為Ⅰ期，29例患者為Ⅱ期，7例患者為III期，3例患者為Ⅳ期。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)病理診斷均符合三陰性乳癌基因突變的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]；未患有其他惡性腫瘤疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：入院前接受過其他治療；未具有完整的臨床資料?；颊呒覍僭诹私庀鄳?yīng)的研究方式后簽署知情同意書；使用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對患者進(jìn)行分析處理。

1.2 方法 患者入院后第二日，告知其晨起空腹，抽取其4ml靜脈血，檢測步驟為樣本前處理、血液上機(jī)分離腫瘤細(xì)胞、ctc測序。運(yùn)用美國Cyncenio公司研發(fā)的CTC捕獲分離技術(shù)對CTC突變情況進(jìn)行檢測。運(yùn)用德國Qiagen QiAamp ccfDNA kit技術(shù)對患者外周血液中的DNA進(jìn)行提取，使用紅細(xì)胞裂解液對樣本中紅細(xì)胞進(jìn)行裂解，以提取cfDNA。

1.3 觀察指標(biāo) 患者CTC突變與cfDNA突變檢出結(jié)果；cfDNA與ctc的敏感度與特異性。

附表 cfDNA與ctc的敏感度與特異性（例）

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS13.0處理數(shù)據(jù)，使用x2檢驗(yàn)和t檢驗(yàn)方法，計(jì)量資料采用均數(shù)方差表示，兩組間比較，采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用百分率表示且用x2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患者CTC突變與cfDNA突變檢出結(jié)果經(jīng)檢測可知，在62例患者中，共檢測出50例患者至少存在一種突變，其余12例患者未檢測出任何突變。其中32例突變患者在連續(xù)2次采集的血標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)突變；17例患者在連續(xù)2次采集的標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)相同的突變；3例患者在連續(xù)2次采集的標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)CTC與cfDNA均產(chǎn)生突變。

2.2 cfDNA與ctc的敏感度與特異性 經(jīng)McNemer檢驗(yàn)與Kappa值分析后可知，CTC與cfDNA的一致性較差，見附表。

3 討論

三陰性乳癌是一種常見的臨床腫瘤疾病，依據(jù)本項(xiàng)研究結(jié)果顯示，80.65%的患者能夠檢測出基因突變現(xiàn)象，并且TP53、PIK3CA、EGFR等類型的檢出率最高。近年來EGFR為三陰性乳癌研究的熱點(diǎn)，在該腫瘤疾病中，EGFR的陽性表達(dá)與腫瘤組織的分級具有密切關(guān)聯(lián)，并且通過檢測EGFR的表達(dá)量，能夠在一定程度上輔助臨床醫(yī)生對患者的預(yù)后進(jìn)行判斷[2]。相比于未出現(xiàn)復(fù)發(fā)的患者而言，出現(xiàn)復(fù)發(fā)的患者可在較大程度上檢測出CTC或cfDNA突變情況[3]。依據(jù)相關(guān)的臨床研究可知，CTC與cfDNA檢測源攜帶不同的突變信息，若能夠?qū)ι鲜鰞煞N突變情況進(jìn)行共同檢測，則能夠更加完整與準(zhǔn)確的反映出患者的基因突變情況，以便能夠?qū)颊叩膹?fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行更加準(zhǔn)確的評估[4]。

依據(jù)相關(guān)學(xué)者的研究表明，其選取1419例接受新輔助化療前的三陰性乳癌患者，利用空心針對乳腺組織進(jìn)行穿刺后獲得組織樣本，對樣本進(jìn)行綜合分析后可知，患者的病理完全緩解率與增殖相關(guān)基因發(fā)生突變存在密切關(guān)聯(lián)。該學(xué)者在樣本組織中共篩選出60個(gè)具有預(yù)測價(jià)值的突變基因，其中38個(gè)基因與細(xì)胞增殖具有密切關(guān)聯(lián)。通過該研究的結(jié)果可知，對患者的基因突變情況進(jìn)行檢測能夠有效的明確患者的復(fù)發(fā)情況，并對患者的預(yù)后進(jìn)行良好的判斷。

綜上所述，本文認(rèn)為液態(tài)活檢對于三陰性乳癌基因突變檢測具有重要作用，能夠有效的明確患者的疾病復(fù)發(fā)與癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移情況；同時(shí)也能夠通過基因突變情況明確三陰性乳癌的生物學(xué)特點(diǎn)，從而能夠?yàn)榕R床治療提供一定的借鑒。但臨床相關(guān)人員仍然需要加強(qiáng)研究，以便獲得更加準(zhǔn)確的研究，從而能夠?yàn)槿幮匀榘┑脑\療提供更加可靠保障。