GeneXpert MTB/RIF分子檢測在肺結核診斷中的實用性

徐紅梅　趙軍

【摘要】目的：探討GeneXpertMTB/RIF分子檢測在肺結核診斷中的實用性。方法：選取2018年4月到2019年10月我院收集的隴南市（八縣一區）疑似肺結核的患者標本，共183份，對標本進行抗酸染色及結核分枝桿菌（MTB）培養;GeneXpertMTB/RIF系統分子檢測;同時抽取38份樣本，對其進行Hain（線性探針/芯片）檢測，并對檢測結果進行觀察。結果：肺結核患者標本的陽性檢出份數為157份，檢出率為85.79%;經RIF檢測顯示，共檢測出14株耐藥株，檢出率為7.65%。結論：GeneXpertMTB/RIF分子檢測在肺結核診斷中具有較高的實用性，能夠獲得較高的疾病診斷率。

【關鍵詞】GeneXpertMTB/RIF分子檢測;肺結核;診斷價值

【中圖分類號】R249【文獻標志碼】A

【文章編號】1005-0019（2020）15-070-01

肺結核是一種常見的慢性感染性疾病，能夠對諸多臟器產生不良累及，臨床中主要依據結核病實驗室診斷，包括抗酸染色與MTB培養等方式[1]。然而抗酸染色檢查的過程較為復雜，并且陽性率較低，同時MTB培養較易受到感染，并且檢測時間較長，因而導致肺結核無法獲得有效的診斷[2]。隨著檢測技術的不斷發展，目前臨床中多使用GeneXpertMTB/RIF分子檢測方式[3]。本研究將探討GeneXpertMTB/RIF分子檢測在肺結核診斷中的實用性。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2018年4月到2019年10月我院收集的隴南市（八縣一區）疑似肺結核的患者標本，共183份，其中男女各129份與54份，年齡為32-67歲，平均年齡為（45.5±4.9）歲。

1.2肺結核的診斷標準胸部影像學檢查符合以下指標中至少1項：①結核菌素皮膚試驗反應≥15mm或存在丘疹、水泡、雙圈;②存在肺結核可疑癥狀;③血清抗結核抗體呈陽性。

1.3納入標準①均為疑似肺結核;②均獲得家屬的完全同意。

1.4排除標準①無法積極配合完成檢測;②患有其他呼吸感染性疾病。

1.5方法（1）結核分枝桿菌（MTB）培養。使用40d/L的NaOH對183份樣本進行處理，之后將其接種至酸性羅氏培養基上，將孵育溫度調整至35℃，連續8周每周對MTB生長情況進行嚴密管檢查，陽性的判定標準為酸性羅氏培養基斜面有MTB菌落生長，否則則為陰性;并按照菌落數量所占斜面面積多少分為1+、2+、3+、4+。

（2）Hain（線性探針/芯片）檢測。利用超聲波水浴破壞細菌，提取DNA;應用熱啟動Taq酶擴增目的DNA片段;將PCR擴增產物與試紙條上固定的探針進行雜交顯色;利用酶顯色反應對結果進行判讀。以羅氏培養與藥敏試驗作為“金標準”，檢測HAIN技術下藥物的耐藥程度、敏感程度分別計算其敏感度、特異度。

（3）GeneXpertMTB/RIF系統分子檢測。分別抽取183份樣本的1ml痰樣本，使用GeneXpertMTB/RIF系統分子進行檢測，2h后觀察檢測結果。將MTBDNA拷貝的高低分為高、中、低、極低與未檢出5個量級作為MTB數量，將利福平檢測結果作為耐藥檢測結果。

1.6觀察指標

Hain檢測與GeneXpertMTB/RIF系統分子檢測結果。

2結果

Hain檢測與GeneXpertMTB/RIF系統分子檢測結果

肺結核患者標本的陽性檢出份數為157份，檢出率為85.79%;經RIF檢測顯示，共檢測出14株耐藥株，檢出率為7.65%;經Hain檢測顯示，有2份未檢出，而GeneXpert全部檢出。

3討論

肺結核是一種十分常見的臨床疾病，由于其病情較長，病情較重，因而若能夠在患病早期并予以及時正確的診斷，能夠在較大程度上控制該疾病的傳播，并且能夠及時為患者提供良好的治療，進而提升其健康水平。目前臨床中主要將細菌學檢查作為診斷該疾病的金標準，主要分為痰涂片與培養等方式;然而對于痰涂片方式而言，其檢驗質量在較大程度上取決于標本質量，同時無法獲得較高的陽性檢出率;對于培養方式而言，由于需要對標本進行5-8周的培養，因此使得檢測時間明顯滯后[4]。因此為獲得較高的陽性檢出率，則需要使用一種更加有效的方式進行檢測。

GeneXpertMTB/RIF分子檢測是近年來新興的一種檢測方式。該種檢測技術主要是以半巢式實時定量PCR技術為基礎，并且對PCR檢測步驟進行了良好的整合，從而完全實現了自動化的檢測目標，并且整個檢測全過程不超過2h便可完成。該種檢測技術具有操作簡便、耗時較短、較高的敏感度與特異度的特點，無需對患者造成不良任何不良損傷，因而具有較高的安全性;并且作為集MTB檢測與MTB利福平耐藥檢測于一體的新型檢測技術，因而具有較高的檢出率與較大的應用價值[5]。依據本研究的檢測結果顯示，采用GeneXpertMTB/RIF分子檢測技術后，陽性檢出率高達85.79%，并且經RIF檢測顯示，耐藥株的檢出率為7.65%;經Hain檢測顯示，有2份未檢出，而GeneXpert全部檢出。這足以說明GeneXpertMTB/RIF分子檢測技術具有較高的應用價值。

綜上所述，本研究認為GeneXpertMTB/RIF分子檢測在肺結核診斷中具有較高的實用性，能夠獲得較高的疾病診斷率，可作為肺結核診斷的首選檢測方式。然而通過相關臨床研究顯示，GeneXpertMTB/RIF雖然對涂陽培陽的樣本陽性檢出率較高但對涂陰培陰的檢出率仍較低，因此仍按需要加強對該種方式的研究。

參考文獻

[1]陳子芳，孫義軍，孫本海，etal.GeneXpertMTB/RIF系統在肺結核診斷及利福平耐藥檢測中的應用價值[J].中華臨床感染病雜志，2014，7（4）：351-353.

[2]陳子芳，孫本海，霍麗麗，王建，陳琦.GeneXpertMTB/RIF技術在結核性胸膜炎診斷及利福平耐藥檢測中的價值[J].中國衛生檢驗雜志，2017，27（06）：819-821.

[3]田斌，王孝君，文嵐，郭彥昌.XpertMTB/RIF檢測系統對肺結核臨床診斷病例的應用價值[J].中國人獸共患病學報，2016，32（09）：798-801.

[4]張青，薛冰茹，李克誠.GeneXpertMTB/RIF系統對肺結核的診斷價值[J].檢驗醫學，2016，31（07）：599-602.

[5]牛海軍，王歌，李明虎.GeneXpertMTB/RIF檢測在肺結核診斷中的價值評估[J].中國防癆雜志，2017，39（8）：829-832.