黃酮類化合物抗酒精性肝損傷作用及機(jī)制研究進(jìn)展

歐陽(yáng)香，程虹毓，胡偉瓊，單佳鈴，王 陸，朱繼孝

( 江西中醫(yī)藥大學(xué) 1.中藥資源與民族藥研究中心，2.人文學(xué)院，江西 南昌 330004)

酒精性肝病(alcoholic liver disease，ALD)對(duì)人體的身心健康影響極為嚴(yán)重，早期常表現(xiàn)為脂肪肝(alcoholic fatty liver, AFL)，AFL可進(jìn)一步加重為酒精性肝炎(alcohol hepatitis, AH)、酒精性肝纖維化(alcoholichepatic fibrosis, AHF)和酒精性肝硬化(alcoholic cirrhosis, AC)，嚴(yán)重酗酒者可誘發(fā)廣泛的肝細(xì)胞壞死甚至肝功能衰竭[1]。隨著人民生活水平日益提高，我國(guó)飲酒人群也在不斷擴(kuò)大，20世紀(jì)80年代初到90年代初，北方的嗜酒人群在一般人群中的比例從0.21%升至14.30%，增長(zhǎng)了近70倍。21世紀(jì)初，在南方及中西部省份流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果中顯示，中國(guó)飲酒人群占一般人群的比例增至30.9%～43.4%。針對(duì)酒精性肝病的治療存在多種方式，包括戒酒、營(yíng)養(yǎng)支持、藥物治療、聯(lián)合治療、手術(shù)治療以及中醫(yī)治療等。藥物治療有西藥(如美他多辛)和中藥(包括復(fù)方、單味藥和中藥某些單體成分)，盡管對(duì)酒精性肝病都能起到一定的治療效果，但是目前為止針對(duì)酒精性肝病的治療并沒(méi)有明顯的特效藥[2]。

黃酮類化合物(flavonoids)，別名黃堿素，黃酮體，是一類重要的植物次生代謝產(chǎn)物，在天然植物的根莖葉及花果中普遍存在。在結(jié)構(gòu)上被定義為是以黃酮 (2-苯基色原酮) 為基本母核而衍生的一類黃色色素，主要分為二氫黃酮、黃酮、黃烷醇、二氫黃酮醇、黃酮醇、異黃酮、花青素、查耳酮以及其他酮類[3]。黃酮類化合物是一種毒副作用極小的天然抗氧化劑，具有抗氧化、抗菌、抗腫瘤等多種藥理活性，在臨床應(yīng)用方面有很大的價(jià)值。近幾年國(guó)內(nèi)外的研究發(fā)現(xiàn)黃酮類化合物具有抗酒精性肝損的作用，本文通過(guò)整理國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)對(duì)酒精性肝損傷發(fā)病機(jī)制、參與酒精性肝損傷的多種發(fā)病因素和黃酮類化合物的抗酒精性肝損傷作用機(jī)制進(jìn)行綜述，為抗酒精性肝損傷的藥物篩選提供一定的理論依據(jù)。

1 酒精性肝損傷的發(fā)病機(jī)制

長(zhǎng)期大量飲酒易引發(fā)肝臟疾病，主要在于乙醇在機(jī)體內(nèi)進(jìn)行氧化代謝產(chǎn)生一系列誘導(dǎo)肝損傷的級(jí)聯(lián)反應(yīng)。一方面，乙醇經(jīng)乙醇脫氫酶氧化系統(tǒng)(alcohol dehydrogenase, ADH)和乙醛脫氫酶(acetaldehyde dehydrogenase, ALDH)氧化代謝過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量的活性氧自由基。另一方面，乙醇的氧化代謝反應(yīng)通過(guò)微粒體氧化代謝系統(tǒng)(microsomal ethanol oxidase system, MEOS)和過(guò)氧化物酶體中過(guò)氧化氫酶系統(tǒng)，產(chǎn)生包括超氧化陰離子在內(nèi)的活性氧自由基，導(dǎo)致活性氧自由基積累形成肝損傷。活性氧在誘導(dǎo)肝損傷過(guò)程中起著關(guān)鍵性作用，因?yàn)槠淇蓪?duì)膜脂質(zhì)產(chǎn)生攻擊，進(jìn)而導(dǎo)致脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，造成肝損傷；此外，乙醇的氧化代謝使得細(xì)胞內(nèi)還原型輔酶Ⅰ與氧化型輔酶Ⅰ的比例升高，這使得脂肪酸的氧化受到抑制和脂肪酸合成增加，肝臟脂肪酸積累誘導(dǎo)肝臟脂肪變性。另外，乙醇氧化代謝使腸道通透性增加，導(dǎo)致血漿內(nèi)毒素水平升高，從而激活肝臟巨噬細(xì)胞產(chǎn)生活性氧自由基、促炎細(xì)胞因子、黏附分子等，這些細(xì)胞因子可通過(guò)激活多種信號(hào)通路誘導(dǎo)酒精性肝損傷。綜上所述，酒精性肝損傷發(fā)病機(jī)制氧化應(yīng)激、脂肪酸積累、肝臟巨噬細(xì)胞的激活和多種細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等多種因素。

1.2 內(nèi)毒素和肝庫(kù)普弗細(xì)胞酒精代謝導(dǎo)致腸道通透性增加，血漿中脂多糖水平顯著升高，內(nèi)毒素LPS激活肝庫(kù)普弗細(xì)胞，釋放細(xì)胞因子介導(dǎo)肝損傷，大量臨床研究已經(jīng)證實(shí)，內(nèi)毒素介導(dǎo)肝臟庫(kù)普弗細(xì)胞活化已成為酒精性肝損傷發(fā)病機(jī)制的一種關(guān)鍵因素。正常生理狀態(tài)下只有少量的腸源性內(nèi)毒素透過(guò)腸道粘膜屏障進(jìn)入門靜脈循環(huán)到肝臟，進(jìn)入肝臟的少量?jī)?nèi)毒素也可被肝臟巨噬細(xì)胞清除維持著正常的生理功能[5]。而有研究結(jié)果表明，酒精的作用改變了腸道微生物穩(wěn)態(tài)導(dǎo)致內(nèi)毒素血癥，主要表現(xiàn)在革蘭氏陰性菌在腸道過(guò)度繁殖，益生菌在數(shù)量上下降；而且酒精氧化代謝產(chǎn)物乙醛也破壞了腸粘膜屏障功能，使腸道通透性增加，腸道細(xì)菌或其產(chǎn)物與組分通過(guò)上皮細(xì)胞粘膜層到達(dá)肝臟，以此誘導(dǎo)肝臟損傷[6]。除此之外，內(nèi)毒素通過(guò)激活Kupffer細(xì)胞，產(chǎn)生受體CD14和介質(zhì)，如巨噬細(xì)胞炎性蛋白-2(macrophage inflammatory protein-2，MIP-2)或細(xì)胞間粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1 ,ICAM-1)，其結(jié)合多形核中性粒細(xì)胞介導(dǎo)炎癥反應(yīng)。并且?guī)炱崭ゼ?xì)胞還會(huì)產(chǎn)生其他介質(zhì)，如前列腺素E2(prostaglandin E2, PGE2)或腫瘤壞死因子-α (tumor necrosis factor-α，TNF-α)和α-羥乙基自由基引起肝細(xì)胞損傷[7]。內(nèi)毒素血癥在酒精性肝損傷的發(fā)病機(jī)制中可能起著關(guān)鍵性的作用，酒精誘導(dǎo)內(nèi)毒素血癥的一個(gè)原因是腸道失調(diào)，即腸道微生物群組成的改變。有研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)結(jié)腸中的粘膜相關(guān)微生物群組成在長(zhǎng)期大量飲酒會(huì)發(fā)生改變，并且隨著乳酸桿菌、金屬鋅和益生菌(燕麥)的加入通過(guò)調(diào)節(jié)腸道微生物穩(wěn)態(tài)均可改善酒精性肝損傷，這進(jìn)一步說(shuō)明腸道失調(diào)對(duì)酒精性肝損傷的重要影響。此外，腸道通透性增加也有助于酒精性肝損傷的發(fā)展，作為酒精性肝損傷的發(fā)病機(jī)制的另外一種因素。

1.3 細(xì)胞凋亡與自噬細(xì)胞焦亡是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)并證實(shí)的一種新的程序性細(xì)胞死亡方式，其特征為依賴于半胱天冬酶-1 (caspase-1)，并伴有大量促炎癥因子的釋放。caspase-1介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的機(jī)制在于將IL-1β和IL-18從前體形式轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒祗w并分泌至細(xì)胞外，引起一系列炎癥反應(yīng)；此外，caspase-1可切割GSDMD(gasdermin D)，觸發(fā)細(xì)胞焦亡。隨著對(duì)酒精性肝損傷發(fā)病機(jī)制研究的深入，研究者發(fā)現(xiàn)細(xì)胞焦亡也是酒精性肝病發(fā)生、發(fā)展關(guān)鍵機(jī)制。因?yàn)榫凭赏ㄟ^(guò)增加硫氧還蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interactingprotein，TXNIP) 在肝臟中的表達(dá)來(lái)促進(jìn)caspase-1介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡通路，誘導(dǎo)肝臟炎癥反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致肝臟的病理變化[8]。

自噬是一個(gè)吞噬自身細(xì)胞質(zhì)蛋白或細(xì)胞器并使其包被進(jìn)入囊泡，并與溶酶體融合形成自噬溶酶體，降解其所包裹的內(nèi)容物的過(guò)程。乙醇暴露于肝臟中，經(jīng)過(guò)一系列的代謝反應(yīng)導(dǎo)致肝臟中脂質(zhì)和蛋白質(zhì)代謝發(fā)生變化。自噬受到肝臟乙醇代謝的顯著影響，乙醇代謝增強(qiáng)了肝細(xì)胞中自噬體的形成，卻抑制了溶酶體的功能。過(guò)高的自噬蛋白水平可增強(qiáng)飲酒者肝細(xì)胞中的丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)的感染性，并且溶酶體功能的抑制使蛋白質(zhì)降解產(chǎn)生負(fù)面影響，增加了脂肪積累的可能性[9]。因此，HCV和酒精修飾的自噬顯然在HCV感染的消耗酒精的患者中增強(qiáng)病毒復(fù)制，細(xì)胞內(nèi)病毒積累和脂肪變性進(jìn)展中起作用。

1.4 巨噬細(xì)胞表型變化和表觀遺傳改變飲酒可導(dǎo)致腸道通透性增加，并導(dǎo)致細(xì)菌衍生脂多糖從腸道轉(zhuǎn)移到肝臟，從而激活免疫反應(yīng)，在此過(guò)程中，巨噬細(xì)胞在酒精性肝病的發(fā)病機(jī)制中起著至關(guān)重要的作用。巨噬細(xì)胞在酒精的刺激下被激活和極化為M1和M2兩種不同的表型，被募集到損傷的肝臟組織中。活化的巨噬細(xì)胞不僅能在不同的條件下保持組織的完整性,而且可通過(guò)在不同的肝臟疾病中釋放豐富的促炎因子和趨化因子來(lái)破壞組織。如M1巨噬細(xì)胞可以分泌豐富的促炎細(xì)胞因子，如IL-6和 TNF-α，從而促進(jìn)肝臟損傷；而M2巨噬細(xì)胞可合成IL-10和TGF-β等抗炎細(xì)胞因子，重塑組織損傷，加速修復(fù)過(guò)程；然而，持續(xù)的傷口愈合和未解決的肝損傷可能導(dǎo)致肝纖維化。并且有研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，慢性乙醇喂養(yǎng)可誘導(dǎo)兩個(gè)肝間質(zhì)巨噬細(xì)胞亞群的募集，在調(diào)節(jié)肝臟炎癥和組織修復(fù)中發(fā)揮不同甚至相反的作用，這也證明了酒精性肝病發(fā)生發(fā)展中巨噬細(xì)胞表型的變化起著重要的作用。因此，這就為緩解酒精性肝病提供了新的治療靶點(diǎn)[10]。

表觀遺傳是指DNA序列不發(fā)生變化，但基因表達(dá)卻發(fā)生了可遺傳的改變；這種改變是除了遺傳信息以外的其他可遺傳物質(zhì)發(fā)生的改變。表觀遺傳改變包括組蛋白修飾，如乙酰化和磷酸化的變化、DNA的低甲基化和miRNAs的改變。而這些修飾可以由酒精誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激誘導(dǎo)，導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄機(jī)制的改變和基因表達(dá)異常。具體表現(xiàn)在肝臟在酒精的刺激下，組蛋白和DNA修飾發(fā)生變化，和包含組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶、組蛋白去乙酰化酶和去乙酰化酶在內(nèi)的組蛋白乙酰化相關(guān)的酶，以及甲基化酶(如DNA甲基轉(zhuǎn)移酶)的改變[11]。迄今為止的研究表明，酒精暴露于肝臟組織中可能是通過(guò)氧化應(yīng)激，表現(xiàn)出調(diào)節(jié)乙酰化，磷酸化和甲基化的組蛋白，調(diào)節(jié)染色質(zhì)重塑和基因表達(dá)。而染色質(zhì)修飾和miRNA改變將會(huì)導(dǎo)致免疫細(xì)胞功能障礙和炎癥細(xì)胞因子的產(chǎn)生。酒精介導(dǎo)的表觀遺傳機(jī)制對(duì)于設(shè)計(jì)新的基于表觀遺傳的療法來(lái)改善ALD是至關(guān)重要的。

1.5 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑

1.5.1自然殺傷T細(xì)胞(NKT)介導(dǎo)酒精性肝損傷 自然殺傷T細(xì)胞(natural killer T cell，NKT)是重要調(diào)節(jié)因子和效應(yīng)子功能的介質(zhì)，其利用Fas和TNF-α誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[12]。有研究證實(shí)，過(guò)多的酒精攝入導(dǎo)致肝臟中自然殺傷T細(xì)胞增加，增強(qiáng)了肝細(xì)胞對(duì)細(xì)胞介導(dǎo)裂解的高度敏感性。在酒精代謝過(guò)程中，活化的自然殺傷T細(xì)胞通過(guò)涉及酒精應(yīng)激的肝細(xì)胞上Fas和TNF-α的伴隨信號(hào)的機(jī)制誘導(dǎo)嚴(yán)重的肝損傷。

1.5.2Ca2+信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 長(zhǎng)期大量飲酒后，酒精在肝臟中的代謝產(chǎn)物乙醛除了對(duì)肝細(xì)胞直接產(chǎn)生毒性外，其還可誘導(dǎo)肝細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+濃度發(fā)生變化。有研究發(fā)現(xiàn)酒精代謝中間產(chǎn)物乙醛處理后的肝細(xì)胞，胞內(nèi)游離Ca2+濃度隨乙醛濃度增加而升高，而線粒體跨膜電位隨乙醛濃度增加而降低，并且肝細(xì)胞發(fā)生嚴(yán)重的損傷。這也說(shuō)明酒精中間代謝產(chǎn)物乙醛導(dǎo)致嚴(yán)重的肝細(xì)胞極性紊亂，誘導(dǎo)肝細(xì)胞損傷形成肝臟疾病[13]。

1.5.3IL-6/STAT3炎癥信號(hào)通路 IL-6/轉(zhuǎn)錄激活因子3(signal transducer and activator of transcription，STAT3)炎癥信號(hào)通路在酒精性肝病中被激活促進(jìn)炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致肝臟的不同程度的病理變化。有研究發(fā)現(xiàn)酒精攝入后，IL-6/STAT3信號(hào)通路得以被激活，促進(jìn)炎癥反應(yīng)。其機(jī)制在于酒精的攝入后降低miR-29b的表達(dá)，miR-29b靶向作用于STAT3，通過(guò)負(fù)調(diào)控作用上調(diào)了STAT3的表達(dá)水平，激活了IL-6/STAT3炎癥信號(hào)通路，促進(jìn)炎癥反應(yīng)從而加重酒精性肝損傷[14]。

1.5.4TLR4信號(hào)通路 Toll樣受體4(toll like receptor 4, TLR4) 及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑涉及到重要激酶白介素1受體相 關(guān)激酶(interleukin-1 receptor-associated kinase, IRAK)、絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)和轉(zhuǎn)錄因子核因子-κB (nuclear factor kappa B, NF-κB)、TNF-α等細(xì)胞因子。而乙醇可導(dǎo)致Kupffer細(xì)胞對(duì)LPS的反應(yīng)增強(qiáng)，引起炎癥因子的大量產(chǎn)生;在TLR4信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中, CD14表達(dá)增多，同時(shí)，IRAK以及MAPK家族成員ERK1/2和p38的活化程度及其相互間的作用增強(qiáng)，使重要的轉(zhuǎn)錄因子如NF-kB活化增強(qiáng)，最終使TNF-α等炎癥因子增多，從而造成肝臟的進(jìn)一步損傷[15]。

1.5.5PERK/eIF2α通路 PERK/eIF2α信號(hào)通路參與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress，ERS)介導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡過(guò)程，正常情況下內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的轉(zhuǎn)錄因子PERK以無(wú)活性的狀態(tài)與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶GPR78結(jié)合，ERS發(fā)生時(shí)大量未折疊蛋白或錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)發(fā)生堆積(即非折疊蛋白反應(yīng))，GRP78則從PERK上解離而改為與非折疊蛋白結(jié)合，引起 PERK反向自身磷酸化。磷酸化的PERK催化底物elF2α發(fā)生磷酸化，磷酸化elF2 α(pelF2α)能激活一種轉(zhuǎn)錄因子，誘導(dǎo)GRP78、GRP94等內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶蛋白表達(dá)增加及caspase-12的活化,啟動(dòng)細(xì)胞凋亡程序誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡。有研究證實(shí),長(zhǎng)期攝入酒精使elF2α蛋白發(fā)生明顯磷酸化,同時(shí)PERK/elF2α通路的下游信號(hào)分子 GRP78/Bip、GRP94、caspase-12和caspase-3發(fā)生過(guò)度活化，導(dǎo)致肝細(xì)胞凋亡[16]。因此PERK/eIF2α通路在酒精性肝細(xì)胞凋亡機(jī)制中發(fā)揮著重要的作用，參與了酒精性肝病的發(fā)生發(fā)展，為后續(xù)預(yù)防治療酒精性肝病提供一定的理論依據(jù)。

2 黃酮類化合物抗酒精性肝損傷作用機(jī)制

黃酮類化合物因其具有很強(qiáng)的抗氧化活性，使得黃酮類化合物藥物治療酒精性肝病越來(lái)越顯現(xiàn)出它們的臨床價(jià)值。黃酮類化合物抗酒精性肝損傷的作用機(jī)制涉及抗氧化應(yīng)激、調(diào)節(jié)肝臟脂質(zhì)的代謝、抑制肝臟炎癥反應(yīng)等方面。

在酒精誘導(dǎo)肝細(xì)胞損傷模型中，研究發(fā)現(xiàn)紫薯黃酮和黃酮類單體化合物黃芩素均可有效降低酒精等肝毒性物質(zhì)對(duì)肝細(xì)胞的毒性，其機(jī)制表現(xiàn)在不同濃度的紫薯黃酮干預(yù)后能有效增強(qiáng)總抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、過(guò)氧化氫酶(catalase,CAT)及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)等抗氧化酶的活性，降低氧化產(chǎn)物(H2O2)的含量，黃芩素通過(guò)誘導(dǎo)抗氧化核轉(zhuǎn)錄因子(nuclear factor erythroid-2 related factor 2, Nrf2)的轉(zhuǎn)錄激活機(jī)制起到抗氧化的作用[17]。黃酮類單體化合物三羥異黃酮也能通過(guò)抗氧化應(yīng)激對(duì)酒精性肝損傷具有預(yù)防和治療的作用，三羥異黃酮干預(yù)治療后發(fā)現(xiàn)能明顯升高GSH、SOD、ADH和ALDH等酶的活性，且能降低CYP2E1 酶的活性[18]。另外，以酒精誘導(dǎo)小鼠肝損傷模型，大量研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)槲皮素在治療酒精性肝損傷模型方面有很好的治療效果。其機(jī)制主要與誘導(dǎo)I型血紅素氧化酶(heme oxygenase-1，HO-1)間接抑制乙醇誘導(dǎo)CYP2E1的表達(dá)和活性，激活MAPK/Nrf2信號(hào)通路上調(diào)HO-1的表達(dá)；減輕溶酶體損傷、上調(diào)自噬體與溶酶體融合關(guān)鍵蛋白LAMP2A的表達(dá)來(lái)減輕酒精誘導(dǎo)的自噬抑制等方面有關(guān)[19]。并且有研究基于酒精性肝損傷模型，用木犀草素干預(yù)治療發(fā)現(xiàn)也具有顯著的治療效果，其作用機(jī)制主要表現(xiàn)在降低自由基生成，減輕脂質(zhì)過(guò)氧化，提高SOD酶活性。因此,大量研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)黃酮類化合物對(duì)酒精性肝損傷有著很好的治療作用，并且通過(guò)多種不同的作用機(jī)制發(fā)揮著作用。

2.2 抑制肝臟炎癥反應(yīng)肝臟炎癥反應(yīng)作為酒精性肝損傷一種常見(jiàn)的肝臟病理變化，它的發(fā)生通過(guò)兩種途徑誘導(dǎo)產(chǎn)生：一是由脂肪肝階段進(jìn)一步發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化加重為酒精性肝炎，二是通過(guò)內(nèi)毒素和氧化應(yīng)激介導(dǎo)酒精性肝炎。在肝臟炎癥反應(yīng)中，細(xì)胞因子起著關(guān)鍵性的作用，由于抗炎細(xì)胞因子和促炎細(xì)胞因子在酒精的作用下使原本二者的平衡受到破壞，偏向于促炎細(xì)胞因子的釋放。致炎細(xì)胞因子TNF-α、IL-6、IL-8等，抗炎細(xì)胞因子包括IL-10、脂連素和TGF-β等。酒精在氧化代謝過(guò)程中誘導(dǎo)產(chǎn)生的氧化應(yīng)激和內(nèi)毒素都可激活NF-κB，使促炎細(xì)胞因子(如：TNF-α)釋放介導(dǎo)炎癥反應(yīng)。涉及到的機(jī)制是內(nèi)毒素誘導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)以CD14介導(dǎo)的TLR4激活和隨后激活NF-κB結(jié)合活性和來(lái)自庫(kù)普弗細(xì)胞中還原的NADPH的自由基也可激活NF-κB結(jié)合活性使炎性細(xì)胞因子TNF-α含量增加和環(huán)加氧酶-2(cyclooxygenase,COX-2)活性升高。

研究發(fā)現(xiàn)，在乙醇誘導(dǎo)大鼠肝損傷模型中，柚皮素治療后能明顯降低血清天冬氨酸和丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶的活性，鐵的水平，以及鐵蛋白、TNF-α、IL-6、NF-κB、COX-2、MIP(細(xì)胞間粘附因子)等蛋白的表達(dá)，明顯改善了酒精性肝炎癥狀[20]。其作用機(jī)制通過(guò)對(duì)TNF-α、IL-6、NF-κB、COX-2、MIP-2、iNOS和CD14等與炎癥相關(guān)分子和蛋白的抑制發(fā)揮其抗酒精性肝炎活性[21]。芒果苷給藥治療發(fā)現(xiàn)也有很好的抗炎作用效果，它能夠促進(jìn)肝細(xì)胞修復(fù)、調(diào)節(jié)肝細(xì)胞炎癥因子TNF-α、IL-6水平和NF-kB的mRNA表達(dá)，以此起到抗炎的作用。也有研究表明兒茶素通過(guò)抑制信號(hào)通路關(guān)鍵組分NF-kB的激活，從而發(fā)揮其抗酒精性肝病的治療效果。鄭今花等[22]基于酒精性脂肪肝小鼠模型，二氫槲皮素干預(yù)后其作用機(jī)制與降低了組織中TG含量和NLRP3等炎癥相關(guān)蛋白表達(dá)，抑制了肝臟組織脂肪積累及伴有的炎癥反應(yīng)有關(guān)。另外，有研究發(fā)現(xiàn)，類黃酮類單體化合物花青素和黃酮木脂素類化合物水飛薊素均能有很好的抗炎效果，其作用機(jī)制分別與抑制促炎信號(hào)通路減輕酒精誘導(dǎo)的肝損傷和抗氧化應(yīng)激，抑制TNF-α等細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)的大量產(chǎn)生有關(guān)。毛橘紅總黃酮提取物干預(yù)治療可有效降低炎性細(xì)胞因子TNF-α、TGF-β1和IL-6的含量，對(duì)慢性酒精性肝損傷具有一定的保護(hù)作用。崔團(tuán)等[23]基于大鼠慢性酒精性肝損傷模型，對(duì)小鼠以葛根總黃酮灌胃給藥處理，發(fā)現(xiàn)葛根總黃酮處理之后能顯著降低CD68、TNF-α、TLR2及TLR4的蛋白表達(dá)水平，因?yàn)楦鸶傸S酮抑制了內(nèi)毒素受體TLR4、TLR2進(jìn)而抑制庫(kù)普弗細(xì)胞活化，從而發(fā)揮抗酒精性肝損傷的作用。NF-κB介導(dǎo)多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)誘導(dǎo)酒精性肝損傷，即NF-κB的激活，進(jìn)一步向下游信號(hào)級(jí)聯(lián)，包括TNF-α、NO和ROS。

2.3 調(diào)節(jié)肝臟脂質(zhì)的代謝正常生理情況下肝臟中脂肪酸的合成與代謝處于一種穩(wěn)態(tài)平衡，長(zhǎng)期大量飲酒的情況下，乙醇代謝通過(guò)多種機(jī)制使肝臟脂肪酸大量積累形成脂肪肝。脂肪肝的特征表現(xiàn)為脂滴、甘油三酯和膽固醇的在肝臟中大量積累，其發(fā)病機(jī)制涉及到CYP2E1、固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(sterol-regulatory element binding proteins，SREBPs)、過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisome proliferators-activated receptors，PPARs)和MAPK等多種相關(guān)因子。乙醇誘導(dǎo)CYP2E1表達(dá)和活性水平的增加，在底物的作用下其衍生出的ROS抑制了肝細(xì)胞的自噬作用，導(dǎo)致脂質(zhì)積累。SREBPs作為脂質(zhì)合成酶乙酰CoA羧化酶(acetyl CoA carboxylase，ACC)、脂肪酸合酶(fatty acid synthase，F(xiàn)AS)表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)控著肝臟脂質(zhì)和膽固醇的合成。 PPARs是核受體超家族成員，包括 PPARα、PPARβ/δ和PPARγ三種亞型，其作用廣泛，包括調(diào)節(jié)脂質(zhì)的代謝等。其中PPARα在調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝發(fā)揮著重要的作用，主要表現(xiàn)在調(diào)節(jié)脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)和氧化以及膽固醇的代謝。因?yàn)榫凭T導(dǎo)肝臟脂肪酸過(guò)多積累激活了PPARα，其對(duì)肝臟脂肪酸結(jié)合蛋白，過(guò)氧化物酶體脂肪酰輔酶A氧化酶等促進(jìn)脂肪酸氧化的酶的表達(dá)有一定的調(diào)控作用。另外，MAPK在調(diào)節(jié)肝臟脂質(zhì)代謝中也起重要作用，主要表現(xiàn)在抑制脂肪酸和膽固醇合成，從而促進(jìn)脂肪在肝臟中的積累。

胡成穆等[24]利用酒精性脂肪肝大鼠模型，施加豹皮樟總黃酮以探究其對(duì)AFL大鼠肝細(xì)胞脂肪變性的影響。結(jié)果顯示，豹皮樟總黃酮能明顯增加脂肪肝細(xì)胞存活率，顯著降低ALT、AST、TG以及脂肪分化相關(guān)蛋白、PPARγ mRNA和蛋白表達(dá)量。其作用機(jī)制可能是通過(guò)改善肝細(xì)胞活性、減少肝細(xì)胞內(nèi)TG生成、抑制ADRP表達(dá)及調(diào)控肝細(xì)胞PPARγ的表達(dá),從而改善AFL大鼠肝細(xì)胞的脂肪變性。此外，王峰等[25]通過(guò)連續(xù)給藥芹菜素治療酒精性肝損傷小鼠，利用蛋白免疫印記法檢測(cè)，結(jié)果顯示可顯著上調(diào)肝組織中的PPARα/γ和肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶-1蛋白表達(dá)，下調(diào)SREBP-1c、FAS、二脂酰甘油酰基轉(zhuǎn)移酶、CYP2E1和NF-κB的蛋白表達(dá)，從而能夠減輕肝臟組織的脂肪變性，其作用機(jī)制是通過(guò)改善PPAR-α介導(dǎo)的脂質(zhì)代謝通路，對(duì)酒精引起的肝臟損傷起著保護(hù)作用。儲(chǔ)金秀等[18]研究發(fā)現(xiàn)黃酮苷類單體化合物蘆丁能明顯降低酒精性肝損傷模型小鼠肝重指數(shù)和AST、MDA水平，增強(qiáng)SOD活性，其作用機(jī)制在于抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)而起到抗肝損傷的作用。

3 總結(jié)與展望

ALD嚴(yán)重影響著人類身心健康，但目前治療酒精性肝病并沒(méi)有所謂的特效藥，主要由于酒精性肝病發(fā)病機(jī)制的復(fù)雜性，大量研究結(jié)果顯示大多涉及到單個(gè)致病因素或者多個(gè)因素協(xié)同作用。參與酒精性肝損傷發(fā)生和發(fā)展的作用機(jī)制涉及到炎癥信號(hào)通路、肝細(xì)胞凋亡通路以及氧化應(yīng)激反應(yīng)等在內(nèi)的多種因素。而中藥中黃酮類化合物成分作為一種天然產(chǎn)物能有效緩解酒精性肝損傷，能通過(guò)多種機(jī)制調(diào)控酒精性肝損傷的發(fā)生和發(fā)展，起到緩解酒精性肝病的效果。來(lái)源于不同中藥的總黃酮或不同的黃酮類單體化合物其作用機(jī)制也各不相同，主要通過(guò)抗氧化應(yīng)激、抑制肝臟炎癥反應(yīng)、調(diào)控肝臟脂質(zhì)代謝等多種途徑緩解酒精性肝損傷。

雖然目前已在體內(nèi)外證實(shí)多種黃酮類化合物可以有效治療酒精性肝損傷，但大多為實(shí)驗(yàn)室研究，對(duì)其毒理學(xué)研究尚未大量展開(kāi)，目前也仍無(wú)有效藥物上市。因此，需加強(qiáng)在其安全性方面的研究，同時(shí)加快臨床前和臨床要求，爭(zhēng)取早日有安全有效、作用機(jī)制明確的黃酮類藥物上市。