高效液相色譜法測定化妝品中二苯酮-2含量的不確定度評定

朱曉雯，付金鳳

(常州市食品藥品監督檢驗中心，江蘇 常州 213000)

二苯酮-2是2,2’,4,4’-四羥基二苯酮(benzophenone-2)。它們被添加到食品包裝的生產中，以保護它免受紫外線的傷害，還會在某些化妝品中添加[1]。二苯酮-2有卵黃蛋白原誘導作用[2]，通過血腦屏障，但其在腦結構中的濃度遠低血液[3]。二苯酮-2的危害還不明確，目前我國僅在《化妝品安全技術規范》(2015年版)中有二苯酮-2的檢測方法，未定限量。

1 實 驗

1.1 材料與試劑

乙腈為色譜純；二苯酮-2(批號：170614，純度：99.9%)，北京曼哈格生物科技有限公司；供試樣品為水潤防曬霜，廠家Manx。

1.2 儀器與設備

島津液相色譜儀LC-20AD，日本島津公司；XP105，瑞士梅特勒-托利多集團。

1.3 方法色譜條件與系統適用性試驗

C18柱(250 mm×4.6 mm×5 m)，以乙腈和水為流動相梯度洗脫，檢測波長335 nm，流速1.0 mL/min，柱溫30 ℃。

1.4 對照品溶液制備

精密稱取二苯酮-2對照品0.1 g(精確到0.00001 g)，用乙腈溶解稀釋定容，得1000 μg/mL標準儲備液，再將上述溶液稀釋至1、2、4、8、20、100、150 μg/mL的標準系列溶液。

1.5 供試品溶液的制備方法

稱取樣品0.1 g(精確到0.0001 g)于50 mL容量瓶中，加乙腈+水(90+10)約45 mL，超聲30 min后定容，4500 rpm離心30 min。取上清作為供試品溶液。

1.6 測定方法

進樣10 μL，依據上述色譜條件，以保留時間定性，用外標法計算含量。

1.7 數學模型

式中：w—化妝品中二苯酮-2的質量分數，%；p—從標準曲線中得到二苯酮-2的濃度，μg/mL；V—試樣定容體積，mL；m—試樣的量，g。

1.8 不確定度因素分析

根據《測量不確定度評定與表示》[4]，從標準品制備、樣品預處理到測量數學模型分析，二苯酮-2測定結果的不確定度來源分析見圖1。

圖1 不確定度來源分析Fig.1 Source analysis of uncertainty

2 標準不確定度評定

2.1 樣品制備過程引入的不確定度

2.1.1 樣品稱量過程

2.1.2 樣品稀釋過程

將上述不確定度合成，得到的相對標準不確定度為：

2.2 標準品溶液制備過程引入的不確定度

2.2.1 標準品稱量過程

十萬分之一天平最大誤差：±0.1 mg。按矩形分布，取k=3，則稱取0.1 g標準品引入的相對不確定度為：

2.2.2 配制標準系列的玻璃容器

校準溶液配制過程中使用的玻璃量具(A級)，有相應的允差。按照矩形分布考慮，k=3，玻璃容器的相對不確定度分量如表1所示。

表1 玻璃容器引入的不確定度Table 1 Uncertainty introduced byglass container

二苯酮-2稱樣量為101.84 mg，標準系列濃度為：1.02、2.03、4.07、8.14、20.35、101.74、152.61 μg/mL，過程中引入的相對不確定度分別0.00471、0.00376、0.00376、0.00378、0.00426、0.00218、0.00164，取最大值，urel(v0)=0.00471。

2.3 高效液相色譜儀引入的不確定度

2.4 樣品預處理引入的不確定度

式中：s為標準偏差；FRec為平均回收率；n為實驗次數。

2.5 合成相對標準不確定度

表2 不確定度分量表Table 2 Uncertainty component table

綜合上述不確定度分量，相對合成相對標準不確定度為：

=0.0122

實驗測得平均樣品含量為1.02 mg/g，合成標準不確定度為1.02×0.0122=0.012 mg/g。

2.6 擴展不確定度

置信區間95%，包含因子k=2，擴展不確定度為0.012×2=0.024 mg/g，平均樣品含量為1.02 mg/g，實驗結果的不確定度為1.02±0.012 mg/g (k=2)。

3 結 論

本研究全面的分析了化妝品中二苯酮-2測定的不確定度來源。從結果可知，主要來源是標準品定容和樣品的重復性帶來的不確定度。在實際測試過程中，校準玻璃量器，控制實驗室溫濕度及定期對儀器維護能夠進一步提高測試結果的準確性和可靠性。