莖直黃芪亞急性毒性對藏豬血細胞影響研究

劉忠艷 西洛白瑪 董海龍 吳慶俠

（西藏農牧學院，西藏林芝 860000）

莖直黃芪（Astragalus strictus Grahex Benth）在西藏俗稱“通查、通扎”（藏音譯），屬瘋草類豆科黃芪屬有毒植物，主要分布于西藏東部及南部、云南西北部（德欽）等地，是我國西部草地瘋草主要優勢種之一[1-2]。瘋草（locoweed）是豆科黃芪屬和棘豆屬有毒植物的統稱，是世界范圍內分布最為廣泛、危害畜牧業發展最為嚴重的有毒植物之一，也是我國主要有毒植物優勢種。瘋草主要毒性成分是吲哚里西啶類生物堿——苦馬豆素，能競爭性抑制機體α-甘露糖苷酶的活性，從而導致出現甘露糖貯積癥[3]。主要危害馬和羊，較少關于豬瘋草中毒的報道。

藏豬（Sussscrofa）屬于高原型地方豬種，主要分布在中國西南部青藏高原，是林芝市主要動物品種。本試驗將莖直黃芪干草粉按比例混入藏豬基礎飼料進行亞急性毒性試驗，通過觀察莖直黃芪對藏豬生長發育、主要血液學指標的影響，評價其對藏豬的亞急性毒性作用，將為深入探討黃芪屬植物毒性及作用機制、以及科學合理的開發利用供重要理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 樣品材料

莖直黃芪地上部分全草，2019年9月采于西藏林芝市米林縣，風干并粉碎后備用。試驗動物為5～6周齡藏豬6只，購于林芝市藏豬養殖場。

1.1.2 主要儀器

XFA6130動物血液細胞分析儀（南京普朗醫用設備有限公司）。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗分組與攻毒

將6只藏豬窩重隨機分為2組，分籠飼養，自由采食和飲水。Ⅰ組為對照組，飼喂基礎飼料（玉米粉）；Ⅱ為試驗組，飼喂60%莖直黃芪+40%基礎飼料。

1.2.2 臨床癥狀觀察

每天記錄藏豬每天的采食量，每周末稱量各組藏豬體重，通過平均周增重計算公式平均周增重=（末重－始終）/飼喂時間，計算各組藏豬平均周增重。

觀察并記錄各試驗組藏豬的飲食、行為活動及其它臨床癥狀等變化。

1.2.3 主要血液學指標的測定

分別于第7d，14d，21d，28d，30d，隨機取各組藏豬，前腔靜脈采血2ml，測定紅細胞數、白細胞數和血紅蛋白含量。

1.2.4 統計學分析

數據采用平均值±標準差表示，應用SPSS13.0軟件對數據進行顯著性t檢驗和一維方差統計分析。

2 試驗結果與分析

2.1 藏豬采食量及體重測定

試驗組藏豬前4 d采食量均呈下降趨勢，4 d后采食量開始回升。Ⅱ組采食量波動較大外，Ⅰ組在試驗期間采食量變化不大，Ⅱ組在第2周采食量下降明顯。

攻毒第1周各兩組藏豬體重均顯著上升，其中Ⅱ組藏豬體重上升最明顯。第2周后Ⅱ組藏豬體重直線下降，Ⅰ組藏豬體重持續增加，至第5周試驗結束時，Ⅱ組藏豬體重均低于試驗前體重（圖1）。

如表1所示，與對照組相比，各試驗組藏豬平均日增重量隨飼料中莖直黃芪含量的升高而體重增加，Ⅰ組則呈線性增長，Ⅱ組藏豬體重負增長。試驗組與對照組相比均有顯著差異（P＜0.05）；但組間差異不顯著（P＞0.05），試驗組出現明顯中毒跡象。

表1 莖直黃芪對藏豬體重的影響

圖1 莖直黃芪對藏豬體重影響

2.2 臨床癥狀

飼喂期間Ⅰ組無明顯癥狀。飼喂前5 d，Ⅱ組藏豬采食量明顯下降，后逐步恢復。第27 d，Ⅱ組出現輕微中毒癥狀，表現為間歇性精神沉郁和躁動不安，頭部及四肢呈神經性震顫。試驗組藏豬伴有不同程度的精神沉郁、被毛倒立、無光澤、喜歡扎堆、反應遲鈍等現象，直至試驗結束，試驗組藏豬中毒癥狀未加重。

2.3 血液學指標的變化

2.3.1 紅細胞計數（RBC）

試驗結果見圖2，莖直黃芪能顯著引起藏豬血液紅細胞數量顯著降低，與對照組相比均有統計學意義（P＜0.05）。前三周Ⅱ組均在正常范圍之內，第三周之后直線下降與對照組及其他試驗組比較均有顯著性差異（P＜0.05）；第2周試驗組和對照組均在正常范圍內，與對照組及其他試驗組比較均有顯著性差異（P＜0.05）；第4周均在正常范圍內，與對照組比較有顯著性差異（P＜0.05）；至第5周，試驗組均顯著下降，試驗組和對照組各組血液紅細胞總數程曲線變化，且組間差異顯著（P＜0.05）。

2.3.2 白細胞總數（WBC）

試驗結果見圖3，莖直黃芪能顯著引起藏豬血液白細胞數量呈現先升高后降低的變化趨勢，第4周為上升幅度最大，與對照組比較有顯著性差異（P＜0.05），其次是第3周、四周和五周變化較顯著，越接近正常值范圍內；第2周后各試驗組白細胞數量呈降低趨勢，直至第5周試驗結束。

圖2 莖直黃芪對藏豬RBC的影響

圖3 莖直黃芪對藏豬WBC的影響

2.3.3 血紅蛋白濃度的變化

試驗結果見圖4，莖直黃芪對藏豬血紅蛋白濃度有顯著的影響，第1周實驗組血紅蛋白濃度下降，第2周、第3周上升至正常范圍之內，第4周和第5周試驗組的血紅和蛋白濃度上升之正常范圍之上；對照組在正常范圍內浮動。

3 討論

莖直黃芪主要毒性成分是苦馬豆素，由于其結構與α-甘露糖苷酶椅形結構相似，故能競爭性抑制其生物活性，從而使中毒機體細胞甘露糖聚集而發生空泡變性。動物采食莖直黃芪后出現慢性中毒，主要表現為站立不穩、轉圈、共濟失調等神經癥狀，并伴隨有流產、死胎，甚至死亡[4-5]，本試驗中，試驗藏豬在飼喂第27d出現中毒癥狀，相較于其它動物出現臨床癥狀較輕微，未表現出典型的共濟失調等中毒癥狀，表明藏豬對莖直黃芪具備一定的耐受性。試驗過程中，試驗組藏豬體重在前期明顯增加，這可能與莖直黃芪具備較高營養價值有關[6]。從血液學指標來看，莖直黃芪在前期對試驗藏豬紅細胞計數影響較小，后期導致紅細胞計數下降。同時能顯著降低試驗藏豬白細胞總數水平，其作用機制還需進一步試驗分析。

圖4 莖直黃芪對藏豬血紅蛋白影響