賀 揚 王 均 吳孟春 茍 印 楊旭紅
(內江師范學院,“長江上游魚類資源保護與利用”四川省重點實驗室,四川 內江 641100)
2019年7月,四川省內江某養殖場的鯉出現大量死亡,患病魚體表現為眼球凹陷、皮膚腫脹、鰓絲潰爛。為確診引起該病的病原,給預防和治療該病提供參考,筆者對自然發病的病魚進行了細菌分離、病毒PCR檢測、寄生蟲檢測。現將有關工作總結如下。
養殖場的鯉魚發病,同池飼養的鯽魚未出現發病癥狀。病魚體長15~20 厘米,發病率高達60%~70%,病死率高達100%,池塘水溫25℃。病魚體色加深、昏昏欲睡、食欲減退;頭頂顱骨軟組織下陷,眼球凹陷,體表黏液增多;剖檢可見病魚鰓絲邊緣蒼白、腫脹,肝臟明顯出血,脾、腎腫大發黑(圖1)。

圖1 發病癥狀
1.寄生蟲檢測 分別采集病魚體表黏液和鰓,制作黏液刮片和鰓絲壓片,顯微鏡下(×200)發現鰓和黏液中均有孢子蟲,蟲體呈橢圓形,中心有一圓形光亮小點(圖2)。
2.細菌檢測 無菌操作條件下,取病魚的肝臟、腎臟、脾臟劃線接種到BHI平板中,28℃培養24~48小時,未見細菌生長。
3.病毒PCR 檢測 取病魚鰓、腎臟提取組織DNA,參照《水生動物疾病診斷手冊》中推薦的鯉浮腫病毒(Carp edema virus,CEV)和錦鯉皰疹病毒(Koi herpes virus,KHV)的PCR 診斷方法,進行PCR 檢測。巢式PCR 檢測CEV,可擴增到大小約180 bp 的特異性條帶。CEV 的PCR 產物測序分析發現,其與GenBank中CEV同源性高達100%,進化樹與CEV 聚為一支,而檢測KHV 未出現任何條帶。因此,表明鯉魚感染了CEV。

圖2 黏液刮片和鰓絲壓片檢測
CEV是嚴重威脅鯉健康的重要病原,同池飼養的鯽、鰱等不患病。CEV可引起鯉皮膚侵蝕性、出血性損傷,并伴隨皮下組織腫脹,因此得名為“鯉浮腫病”。CEV也可引起錦鯉出現昏昏欲睡、潛于水底等癥狀,故該病又稱作“錦鯉昏睡病”。
此病的發病水溫為15~25℃,養殖條件惡化、捕撈應激等可誘發,死亡率達80%~100%。此病發病癥狀與錦鯉皰疹病毒病相似,單從臨床癥狀很難區分,診斷時需進行鑒別。目前尚無CEV疫苗,無法根治此病。因此,疫區不建議飼養鯉魚,非疫區需謹慎引種。在發病水溫應減少魚的應激,加強飼養管理,增強魚的抵抗力。引入新魚時可先在15~25℃下飼喂30 天以上,放苗前用0.5%鹽水浸泡魚苗具有一定防御效果。發病后建議及時撈出并隔離發病魚,同時魚池、用具消毒,防止水質惡化,使用免疫增強劑增強魚體抵抗力、添加抗生素防止繼發感染。