豬傳染性胃腸炎疫苗抗體免疫效果評價

湯永蓉 陳 彬

（寶應縣畜牧獸醫站，江蘇揚州 225800）

0 引言

豬傳染性胃腸炎是由豬傳染性胃腸炎病毒引起的一種急性、高度接觸性腸道傳染病，臨床上以發熱、嚴重嘔吐、劇烈腹瀉和高度脫水為特征，各個年齡的豬都可感。冬春寒冷季節易多發，因其潛伏期很短，一般12～18h，有的為1～8d，多數病例2～4d，發病較為突然，傳播迅速，數日內可蔓延至全群，是嚴重危害豬群的原發性疾病之一，嚴重制約了規模化養豬場的經濟效益。目前，對該病還沒有特效的治療藥物，疫苗免疫是預防該病的最安全、最有效的手段，也能使豬群獲得很好的抗體免疫效果，并且無副作用。

為了驗證豬傳染性胃腸炎疫苗對生豬的安全性和免疫效果，此次選擇了本地4家規模豬場，開展豬傳染性胃腸炎疫苗抗體試驗。試驗結果證明，豬傳染性胃腸炎疫苗的免疫效果較好，隨后在基層范圍內進行推廣應用，均取得了好評。

1 試驗原理

試劑盒系由預包被豬傳染性胃腸炎病毒重組N蛋白的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成，應用酶聯免疫法（ELISA）原理檢測豬血清、血漿樣本中豬傳染性胃腸炎病毒抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本，經溫育后若樣品中含有豬傳染性胃腸炎病毒抗體，則將與酶標板上抗原結合，經洗滌除去未結合的其他成分后；再加入酶標記物，與酶標板上抗原抗體復合物發生特異性結合；再經洗滌除去未結合的酶標記物，在孔中加TMB底物液，與酶反應形成藍色產物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關；加入終止液終止反應后，產物變為黃色；用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值，即可知樣品是否含有豬傳染性胃腸炎病毒抗體。

2 試驗材料與方法

2.1 材料

2.1.1 試驗動物 用于試驗觀察疫苗免疫安全性和免疫效果測定的4個豬群分別由寶應縣欣宇禽畜產銷專業合作社、揚州市瀛寶農牧科技發展有限公司、寶應縣華盛生態生豬養殖場、寶應縣正旺畜禽養殖場4個示范基地提供的母豬群50頭、100頭、50頭、80頭。所選擇的豬群均為豬傳染性胃腸炎疫苗非免疫豬群，健康、生長良好，被檢血清樣品共314份。

2.1.2 檢測試劑 豬病毒性胃腸炎抗體Elisa試劑盒（規格480T/盒，西班牙Ingenasa，由南京華恩生物科技科技有限公司提供）。

2.1.3 主要儀器設備 酶標分析儀、離心機、采血器、可調微量移液器、一次性吸頭、去離子水、恒溫箱。

2.1.4 試驗用疫苗 豬傳染性胃腸炎疫苗（上海海利生物技術股份有限公司生產），批準文號：獸藥生字（2016）090201097。

2.2 試驗方法

2.2.1 疫苗接種 將試驗疫苗用生理鹽水稀釋為含1頭份/ml，后海穴注射1ml。

2.2.2 采血 第1、2、3、4豬群疫苗免疫前及免疫后7、14、30d各采血1次。豬前腔靜脈采血，3～4ml/頭，分離血清，冷藏或冷凍備用。

2.2.3 抗體效價測定 按照“豬傳染性胃腸炎診斷技術標準”（NYT548-2002）試驗操作進行，使用酶標分析儀，當樣品A450值大于臨界值，判為陽性；當樣品A450值小于臨界值，判為陰性。

3 試驗結果

3.1 安全性試驗結果

經注射疫苗后，對試驗豬群進行連續觀察2周（精神狀態、采食量、糞便、尿液以及豬群的發病死亡率），按照說明注射劑量注射的4個試驗豬群均無異常情況發生，表明疫苗對豬群免疫是安全的，而且疫苗引起的副反應較小。

3.2 免疫效果測定結果

免疫前及免疫后抗體陽性率統計表

通過免疫、監測、消毒等防控措施的落實，根據試驗數據進行統計分析，制作了抗體陽性率統計表。由上表可見，免疫后抗體上升的較快，7d抗體平均合格率達80%以上，監測到免疫后30d，抗體平均合格率達到90%以上。

4 小結與討論

（1）試驗結果表明，在免疫7d后抗體上升的較快，維持的時間也長，同時取得了很好的免疫效果，起到了有效的保護作用。

（2）豬場不能完全依賴疫苗，更加不能抱有僥幸心理不免疫，應該結合實際情況，建立符合自身完善的免疫監測制度，制定科學的免疫程序，合理的飼養管理模式。豬傳染性胃腸炎的免疫效果及發病情況與飼養管理的好壞密切相關，只有在良好的環境控制下，才能真正發揮疫苗的免疫保護作用。養殖密度小、飼養環境優良、免疫措施到位、生物安全措施管控嚴格的豬場，豬傳染性胃腸炎的免疫效果相對較好，豬傳染性胃腸炎感染與流行的機率也相應減小。

（3）本次免疫試驗的4個豬群均未出現免疫副反應，說明豬傳染性胃腸炎疫苗安全性高、副反應小，在我縣基層推廣具有可行性。