腦脊液細胞染色分類在有核細胞計數偏低時的臨床價值

曲大偉 原平玫

【摘 要】：目的本文主要針對腦脊液有核細胞計數偏低時細胞染色分類對臨床的參考價值進行分析研究。方法選取2016年6月到2019年10月期間有核細胞計數<20×106/L的腦脊液標本113例，細胞染色分類結果與患者的臨床資料進行分析。結果發現17例標本存在異常細胞，其中胃癌轉移細胞29.4%（5/17），肺癌轉移細胞23.5%（4/17），淋巴瘤細胞17.6%（3/17），乳腺癌轉移細胞5.9%（1/17），白血病幼稚細胞11.8%（2/17），吞噬細胞（有含鐵血黃素）11.8%（2/17）;淋巴細胞分類升高（>80%）有34例，單核細胞升高（>45%）18例，1例出現嗜酸性粒細胞高（>5%）。腦膜轉移癌細胞染色分類法檢出異常細胞的陽性率為71.4%（10/14）明顯高于頭顱CT/MRI檢查21.4%（3/14），有差異顯著統計學意義（P=0.021）。結論腦脊液細胞計數<20×106/L時仍需要進行細胞染色分類，特別是對于懷疑腦膜轉移癌、淋巴瘤侵犯中樞和中樞神經系統白血病患者，而且細胞染色分類法早期診斷作用可能優于CT/MRI檢查。

【關鍵詞】：腦脊液;細胞染色分類;計數偏低;異常細胞

【中圖分類號】R446.14【文獻標識碼】A【文章編號】1672-3783（2020）07-21--01

引言

結核性腦膜炎（簡稱結腦），是由結核分枝桿菌感染引起的腦膜、脊膜的慢性非化膿炎癥，嚴重時可侵犯腦血管、腦實質及脊髓，有很高的致殘率和病死率，其預后與早期診斷和及時抗結核治療密切相關。因此，尋找快速、敏感性高、特異性強、操作簡單的結腦早期診斷方法，一直是結腦研究中亟待解決的問題。本研究觀察腦脊液細胞學的動態變化，并對腦脊液進行玻片離心改良抗酸染色檢測，旨在探討2種方法在結腦早期診斷中的臨床價值。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取煙臺業達醫院2016年6月至2019年10月期間住院采集的有核細胞計數均在20×106/L以下的腦脊液標本113例。同步通過住院信息系統收集患者的臨床病例資料，通過LIS系統收集同一份腦脊液標本的葡萄糖、氯化物、血清腺苷脫氨酶（ADA）和總蛋白等生化檢驗結果。

1.2 方法

1.2.1 染色前處理

對腦脊液玻片離心制片：用吸水紙做夾層，用專用甩片固定夾子依次按順序固定玻片與吸水紙及專用離心漏斗，放置甩片機上，滴入新鮮腦脊液0.3-0.Sml（不超過O.SmI），400RPM離心4min，制成待檢載玻片，晾千。固定：4%中性甲醛滴加在已經離心處理過的載玻片上，覆蓋全片，固定15分鐘，用蒸餾水溫和沖洗，室溫待千。破膜處理：將固定好的玻片置于玻璃槽中，用新鮮配制的0.2%Triton-X100浸泡，剛剛沒過玻片為宜，置于4℃冰箱30分鐘，取出玻片，PBS緩沖液沖片，室溫待千。

1.2.2 腦脊液細胞的收集

是腦脊液細胞學檢查的前提和重要環節，只有收集到大量形態完整的細胞才能進行染色和分類診斷。目前腦脊液細胞的收集技術以細胞玻片離心沉淀法應用較廣，其效果較理想。國產化的有FMU-5型腦脊液細胞玻片沉淀器、FCS型離心沉淀儀和合資的Cytospin細胞玻片離心沉淀儀等。上述各型收集器各自優點和不足。無論使用哪一種細胞收集器，必須符合一下要求：1.能夠收集標本中較多的細胞，損失少;2.腦脊液量不需太多;3.收集過程既要快速又不損害細胞的形態和結構，細胞分布均勻，清晰;4.標本范圍小，便于觀察;5.能夠耐受各種固定劑和染色劑;6.要求設備簡單，便于操作，離心時間，速度和加速度可自控，且運轉穩定不受電壓變化影響;7.嚴格按照各型離心儀操作程序，特別注意離心儀不宜起動過猛或初速過快。由于這種突然的外力作用，常易導致腦脊液細胞的相互撞擊或（和）撞向沉淀管的管壁，而造成不同程度的細胞破壞和變形。

2 結果

2.1 常見細胞染色分類情況和細胞形態細胞染

色后分類發現17例異常細胞，其中最常見的是轉移癌細胞，胃癌轉移細胞有5例，占29.4%（5/17），肺癌轉移細胞4例，占23.5（4/17）;其次為淋巴瘤細胞3例，占17.6（3/17）。常見的轉移性癌細胞、淋巴瘤細胞和腦膜白血病細胞形態見圖1。113例患者中，淋巴細胞分類升高（>80%）有34例;單核細胞升高（>45%）有18例，1例出現嗜酸性粒細胞升高（>5%）。

2.2 細胞染色分類法與影像學檢查

實體惡性腫瘤、淋巴瘤和白血病患者做細胞染色分類檢查檢出異常細胞的陽性率均高于相近時間段的頭顱CT/MRI檢查。特別是對于實體惡性腫瘤，細胞染色分類檢查檢出異常細胞的陽性率為71.4%（10/14）明顯高于CT/MRI檢查發現占位性病變的陽性率21.4%（3/14），兩種檢查方法有顯著統計學意義（P=0.021）。

3 討論

腦脊液細胞學檢測是一種定量與定性方法相結合的診斷技術，其結果中包含的信息不單純是有無炎癥或有無腫瘤，神經科醫師應結合患者臨床表現，深入分析腦脊液細胞學檢測結果，方可從中獲得更多有價值的診斷信息。我國臨床腦脊液細胞學檢測的總體水平較高，與我們緊密結合臨床的診斷方法不無關系。40年前，我國的腦脊液細胞學實驗室檢測首先是由神經科前輩引進和開展的，目前國內主要的腦脊液細胞學實驗室多設立在神經科，許多腦脊液細胞學診斷是由神經科醫師執行的。臨床與腦脊液細胞學緊密結合的診斷方法和學術方向是我們的歷史傳統與現實優勢，值得保持與發揚。同時，為了普及這一實用且價廉的診斷方法，促進其學術和技術水平的提高，期望臨床檢驗科和病理科的更多同仁積極地參與此項工作。

參考文獻

[1] 龐曉川，李琳，王永香，等.液基細胞制片聯合巴氏染色觀察實體瘤腦膜轉移患者腦脊液中腫瘤細胞形態學特點[J].中國老年學雜志，2018，38（16）：3874-3878.

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