兩個野生蜜環菌菌株鑒定及菌絲體培養研究

杜忠偉，胡志強，亢學平，李健，王旭，王鑫

(延邊朝鮮族自治州農業科學院，吉林 延邊 133000)

蜜環菌(Arimillariamellea)，屬于擔子菌亞門，傘菌亞綱，傘菌目，白蘑科，蜜環菌屬，是一種可以食用菌的大型真菌，廣泛分布于北半球的溫帶地區。菌絲體是蜜環菌的營養器官，在不良的環境條件下形成菌索，人工培養主要是對菌索的培養。蜜環菌與天麻存在共生關系，通過菌索入侵天麻，并為天麻的無性繁殖提供營養物質。因此蜜環菌的質量對天麻產品質量和產量產生重要的影響。目前全世界己鑒定的蜜環菌生物種近40 種，選育優良的蜜環菌菌株是發展天麻產業的前提和基礎，我們針對東北地區的常見蜜環菌進行采集，對其中兩種進行了比較試驗，為蜜環菌菌種選育提供基礎資料。

1 材料和方法

1.1 研究材料

將采集到的兩個蜜環菌菌株編號為AM1和AM2。

AM1采集地：吉林省延邊和龍市八家子泉水洞林場，采集時間：2019年9月3日，闊葉林樹根部。

AM2采集地：吉林省延邊和龍市八家子泉水洞林場，采集時間：2019年9月12日，針葉林樹根部。

母種培養基：選擇使用PDA加富培養基進行菌種培養，培養溫度為25 ℃。

圖1 野生采集的蜜環菌子實體(注：A,C:AM1;B,D:AM2)

1.2 試驗方法

1.2.1 培養基制作及接種。制作PDA加富培養基：先稱取木屑6 g，麩皮20 g，用適量水調勻，再加入1000 mL水煮制，待煮沸時開始記時，保持30 min后過濾，將過濾好的溶液加入到制作好的PDA培養基中，混合加熱后，倒入試管中，高溫高壓(121 ℃，30 min)滅菌，擺斜面、冷卻，將等量的菌種在超凈工作臺上接種至培養基中間位置。

1.2.2 菌絲體培養。將接完種的試管標記好后放入25 ℃的恒溫培養箱培養，萌發后測量菌索生長速度，觀察培養基的顏色變化，及兩個菌株的長勢。

2 試驗結果

2.1 形態學鑒定

通過形態學的描述比較，利用顯微鏡觀察孢子的形態特征，檢索真菌志和相關資料進行鑒定。

AM1:子實體簇生，菌蓋直徑3～8 cm，初期成半球形，后期平展，顏色深棕色，表面有毛狀鱗片，菌肉白色，菌褶初期白色后期黃棕色，延生。菌柄長5～10 cm，圓柱形，頂部至基部顏色由白色變為灰白色，在基部有黃色菌絲，具有菌環。擔孢子呈橢圓形，無色，(8～10) μm ×(5～7) μm,非淀粉質。

經形態學鑒定AM1為奧氏蜜環菌(Arimillariaostoyae)。

AM2:子實體生于闊葉林樹干根部或有樹根的地上，簇生，菌蓋直徑3～8 cm，扁球形至平展，黃白色至黃色，中間部位有鱗片，菌肉白色，菌褶黃白色，延生，稀疏，不等長。菌柄細長，長度3～10 cm，直徑3～10 mm，中空，延生，從上至下顏色變深成黃褐色，擔孢子呈橢圓形至卵圓形，(8～10) μm×(5～7) μm，光滑，無色，非淀粉質。至混合均勻鑒定AM2為假蜜環菌(Arimillariatabescens)。

經形態學鑒定兩株蜜環菌為不同種。

2.2 菌絲體培養

兩種蜜環菌在PDA加富培養基中的生長狀態存在明顯的差別，AM1菌索生長較快，長勢好，菌索粗壯，產生的黑色色素較多。AM2菌索生長較慢，長勢差，菌索較細，培養基表面白色菌絲較多。

圖2 菌絲體(菌索)培養

表1 兩株蜜環菌在相同培養基下生長情況比較

3 結論與討論

目前，蜜環菌主要用于種植天麻、豬苓等藥材，人工培養蜜環菌菌材為天麻及豬苓等提供營養。天麻、豬苓種植是個靈活、實用、投入低、效益高的產業，適宜于城鎮居民下崗、失業者、打工回鄉創業者等不同社會群體生產發展，天麻、豬苓等種植可利用廢棄資源、閑置空地，有利于生態環境的保護，創造了良好的經濟效益和社會生態效益。而蜜環菌菌種質量直接影響天麻、豬苓等的質量和產量，蜜環菌菌索粗壯，長速快說明蜜環菌活力及侵染能力強，能夠很好的為豬苓及天麻提供營養，在選擇蜜環菌時主要看其菌索的活力，活力強則天麻、豬苓產量高，品質好。通過對兩種蜜環菌AM1和AM2的鑒定及培養驗證，能夠選擇出菌索粗壯，生長快速的蜜環菌。AM1和AM2用來作為天麻、豬苓栽培的菌材制作種源，需要進一步的試驗研究。