腸道活菌制劑對慢性阻塞性肺疾病急性加重患者的療效

楊 超，杜俊毅，蒲 丹，許小靚，陳 敏，劉 翱

（1）昆明市第一人民醫(yī)院甘美醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學科；2）檢驗科，云南昆明 650224）

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）簡稱慢阻肺，是呼吸系統(tǒng)常見病、多發(fā)病之一，其發(fā)病機制尚不完全明確，目前治療方法多集中在對癥治療，缺乏有效的病因治療。研究發(fā)現(xiàn)COPD 患者體內存在腸道菌群微生態(tài)失衡現(xiàn)象，可促進COPD 的發(fā)生發(fā)展。故本文通過外源性補充腸道活菌制劑，探討其在AECOPD 患者中的治療效果。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

采用隨機抽樣的方法選擇2019 年5 月至10月昆明市第一人民醫(yī)院甘美醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學科60 名AECOPD 住院患者為研究對象，隨機分為對照組和治療組各30 例。所有研究對象均符合慢性阻塞性肺疾病全球倡議（2018 版）中AECOPD 的診斷標準[1]。肺心病以外的其他心臟病、消化道疾病、嚴重的肝腎功能不全、腦血管意外、嚴重的感染、合并自身免疫系統(tǒng)疾病、支氣管哮喘、對活菌制劑過敏的患者均排除在外。本研究通過昆明市第一人民醫(yī)院甘美醫(yī)院倫理委員會批準，所有研究對象均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 對照組僅給予抗感染、止咳化痰平喘等常規(guī)治療，治療組在常規(guī)治療的基礎上，給予腸道活菌調劑制劑（雙歧桿菌乳桿菌三聯(lián)活菌片、4 片/次、3 次/d；復方嗜酸乳桿菌片、2片/次、3 次/d）口服。

1.2.2 觀察指標 治療2 周后，比較兩組間呼吸困難（MMRC）評分、FEV1%pre、大便菌群球桿比失衡發(fā)生率、大便中雙歧桿菌屬及乳酸桿菌屬、住院天數(shù)之間的差異，分析腸道活菌制劑的治療安全性。

1.2.3 主要技術方法 MMRC 評分根據(jù)改良英國醫(yī)學研究委員會呼吸困難量表。成人大便菌群中球菌：桿菌約為25%:75%[2]，故將大便菌群中球菌大于25%定義為存在大便菌群球桿比失衡。大便雙歧桿菌、乳酸桿菌Ct 值均采用熒光-PCR 法測定，所需雙歧桿菌核酸擴增檢測試劑盒、乳酸桿菌核酸擴增檢測試劑盒購自于廣州維伯鑫生物科技股份有限公司、糞便基因組DNA 提取試劑盒購自于北京天根生化科技有限公司，根據(jù)試劑操作說明逐步進行大便標本處理、DNA 提取、試劑配制、加樣、PCR 擴增等步驟，分別測得大便雙歧桿菌、乳酸桿菌Ct 值。研究發(fā)現(xiàn)每個模板Ct 值與該模板的起始拷貝數(shù)的對數(shù)存在線性關系，起始拷貝數(shù)越多，Ct 值越小，反之亦然[3]，故測定大便雙歧桿菌、乳酸桿菌Ct 值可間接反映大便雙歧桿菌、乳酸桿菌菌落拷貝數(shù)。

1.3 統(tǒng)計學處理

所有數(shù)據(jù)用SPSS 統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。其中正態(tài)分布的計量資料用均數(shù)±標準差（）表示，同組間比較采用配對t檢驗，不同組間比較采用成組t 檢驗。率的比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 一般資料

對照組，男29 例、女1 例，年齡（70.37±7.76）歲，合并肺心病、心衰患者9 例；治療組，男27 例、女3 例，年齡（74.30±9.86）歲，合并肺心病、心衰患者11 例；兩組在性別、年齡、合并肺心病、心衰患者例數(shù)、FEV1%pre、MMRC 方面均差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組研究對象一般資料（）Tab.1 General data of two groups of subjects （）

表1 兩組研究對象一般資料（）Tab.1 General data of two groups of subjects （）

2.2 兩組大便球桿比失衡發(fā)生率比較

經(jīng)比較發(fā)現(xiàn)，兩組治療前大便菌群中球桿比失衡發(fā)生率無統(tǒng)計學差異（χ2=0.111，P=0.739）；對照組治療后大便菌群中球桿比失衡發(fā)生率較治療前增加，但差異無統(tǒng)計學意義（χ2=2.052，P=0.152）；治療組治療后大便菌群中球桿比失衡發(fā)生率較治療前下降，但差異無統(tǒng)計學意義（χ2=2.963，P=0.085）；治療組治療后大便菌群中球桿比失衡發(fā)生率較對照組治療后明顯下降，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=10.417，P=0.001），見表2。

表2 兩組在大便球桿比失衡發(fā)生率方面的比較（n）Tab.2 Comparison of the occurrence rate of imbalance in the ratio of ball and club in stool between two groups（n）

2.3 兩組MMRC 評分、FEV1%pre、大便中雙歧桿菌及乳酸桿菌之間的比較

治療組、對照組治療后MMRC 分別較治療前下降，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。治療組、對照組治療后FEV1%pre 分別較治療前升高，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。治療組治療后大便雙歧桿菌及乳酸桿菌Ct 值較治療前均下降，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；對照組治療后大便雙歧桿菌及乳酸桿菌Ct 值較治療前均升高，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；治療組與對照組治療后大便雙歧桿菌及乳酸桿菌Ct 值差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。治療組治療前后的MMRC、大便雙歧桿菌及乳酸桿菌Ct 值的差值與對照組治療前后差值之間均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表3。

2.4 兩組住院天數(shù)的比較

治療組的住院天數(shù)為（10.97±2.41）d，對照組的住院天數(shù)為：（12.83±3.49）d，治療組的住院天數(shù)短于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（t=2.407、P=0.019，P＜0.05）。

2.5 腸道活菌制劑的安全性

治療組2 例患者入組時有腹脹不適，考慮與肺心病、胃腸淤血有關，通過常規(guī)+腸道活菌調劑制劑治療后腹脹癥狀均緩解。治療組所有患者在腸道活菌制劑治療過程中未出現(xiàn)腹瀉、腹痛、惡心、嘔吐等不良事件。

表3 兩組在MMRC 評分、FEV1%pre、大便中雙歧桿菌屬及乳酸桿菌屬之間的比較（）Tab.3 Comparison of MMRC score,FEV1% pre,Bifidobacterium and Lactobacillus in stool between two groups（）

表3 兩組在MMRC 評分、FEV1%pre、大便中雙歧桿菌屬及乳酸桿菌屬之間的比較（）Tab.3 Comparison of MMRC score,FEV1% pre,Bifidobacterium and Lactobacillus in stool between two groups（）

注：Ct 表示每個反應管內的熒光信號到達設定的閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。同組治療前后比較，*P ＜0.05；兩組治療后相比，#P ＜0.05；d1=治療組治療后-治療前，d2=對照組治療后-治療前，d1 與d2 之間相比，△P ＜0.05。

3 討論

COPD 是一種累及全身的疾病，其發(fā)病率及死亡率逐年升高，現(xiàn)居全球死亡原因的第四位，預計2020 年將上升至全球第3 位[4]。

腸道微生態(tài)是機體重要的微生態(tài)系統(tǒng)，對機體起著營養(yǎng)吸收、腸黏膜的增生和保護、屏障功能、免疫調控等重要作用[5]。但既往研究發(fā)現(xiàn)COPD 患者腸道內益生菌雙歧桿菌及乳酸桿菌數(shù)量較正常人明顯減少[6]，COPD 患者體內存在腸道菌群微生態(tài)失衡現(xiàn)象，發(fā)生機制可能有:機體免疫力低下導致腸道粘膜屏障作用減弱、繼發(fā)感染，引起內毒素血癥；長期使用及濫用抗生素使原有腸道菌群正常生態(tài)組合發(fā)生改變，引起菌群失調；慢阻肺患者因合并肺心病、右心衰竭導致胃腸道淤血，從而破壞腸道微生態(tài)[7-9]。甚至有研究顯示COPD 發(fā)生腸道菌群失調的比率高達40.26%[9]。反過來腸道菌群失衡又通過腸道致病菌移位、釋放腸道內毒素及炎性介質、導致機體免疫功能下降等機制[10]來促進COPD 的發(fā)生發(fā)展。二者互為因果，相互促進，相互影響。

目前調整腸道菌群失衡的主要方法包括：合理使用抗生素、中藥調理、添加活菌制劑、營養(yǎng)調理等。以往研究發(fā)現(xiàn)口服腸道益生菌可降低肺囊性纖維化患者急性加重頻率[11]、降低呼吸機相關肺炎的發(fā)病率、預防上呼吸道感染[12]。然而，調節(jié)COPD 腸道微生態(tài)的研究與應用目前尚處于起步階段，有關益生菌防治COPD 的研究尚未獲得比較明確的結論。有研究發(fā)現(xiàn)復合乳酸菌膠囊對AECOPD 有抗感染、改善食欲的作用[13]。另外腸道內雙歧桿菌、乳酸桿菌能產(chǎn)生抗菌物質清除病原菌，擾病原菌營養(yǎng)的獲取和黏附，從而達到限制病原菌的生存及致病作用[14]。故本研究選取雙歧桿菌乳桿菌三聯(lián)活菌片及復方嗜酸乳桿菌片作為腸道活菌制劑，探討其在AECOPD 患者中的治療效果。

通過研究發(fā)現(xiàn)：治療組治療后大便菌群中球桿比失衡發(fā)生率較對照組治療后明顯下降；治療組治療后MMRC 較治療前下降、FEV1%pre 較治療前升高；治療組的住院天數(shù)短于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義，說明腸道活菌制劑治療AECOPD患者，具有降低患者大便菌群中球桿比失衡發(fā)生率、降低患者MMRC 評分、改善患者肺功能、縮短患者住院時間的作用。

如前所述，Ct 表示PCR 檢測中每個反應管內的熒光信號到達設定的閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)，Ct值越小，標本拷貝數(shù)越多，可間接反映大便菌落數(shù)。本研究發(fā)現(xiàn)治療組治療后大便雙歧桿菌及乳酸桿菌Ct 值較治療前、較對照組治療后均下降，治療組治療前后大便雙歧桿菌、乳酸桿菌Ct 值的差值均較對照組治療前后差值降低，差異有統(tǒng)計學意義，說明腸道活菌制劑劑具有增加AECOPD患者腸道益生菌的作用，且療效優(yōu)于常規(guī)治療。

此外本研究對腸道活菌制劑的安全性也做了分析，顯示治療組患者口服雙歧桿菌乳桿菌三聯(lián)活菌片與復方嗜酸乳桿菌片后均未出現(xiàn)腹脹、腹瀉等腸道不良反應，且原有2 例患者腹脹癥狀緩解，安全性好。這與既往研究結果相仿[15]。但在使用腸道活菌制劑的同時，需防止出現(xiàn)益生菌定植、過度生長等風險[13]。

總之本研究發(fā)現(xiàn)腸道活菌治療具有調節(jié)AECOPD 患者腸道菌群、改善患者呼吸困難評分、改善患者肺功能、縮短患者住院時間的治療作用，且臨床使用較安全。目前隨著二代基因測序技術的出現(xiàn)，打破了使用傳統(tǒng)檢測方法研究腸道菌群的格局，利用新技術進一步闡明腸道活菌制劑治療AECOPD 患者的機制，將成為以后工作的重點。