黃芪對肝纖維化大鼠肝組織TIMP-1、MMP-1表達水平的影響

陳源

【摘要】目的 探析黃芪對肝纖維化大鼠肝組織TIMP-1、MMP-1表達水平的影響。方法 篩選20只正常大鼠與60只伴有肝纖維化的大鼠，20只正常大鼠為正常組，60只伴有肝纖維化的大鼠隨機分為黃芪組、模型組、秋水仙堿組，黃芪組、模型組和秋水仙堿組進行腹腔無菌豬血清注射，每周2次，持續注射12周，正常組與模型組每日將蒸餾水進行灌服，黃芪組與秋水仙堿組將相應的藥物進行灌服，同時采用生化、放射免疫等方法觀察大鼠的肝功能。結果 結果分析：黃芪組能夠良好的降低肝纖維化大鼠血清CIV與HA，TIMP-1明顯較低，MMP-1明顯較高。結論 纖維化大鼠采用黃芪能夠較好的改善TIMP-1、MMP-1表達水平，能夠有效的增加肝組織種MMP-1的表達，降低TIMP-1的表達，能夠良好的抑制ECM的表達，臨床中的應用價值較高，可在臨床嘗試運用于相關疾病的治療。

【關鍵詞】黃芪;肝纖維化大鼠;TIMP-1;MMP-1

【中圖分類號】R285.5 【文獻標識碼】A 【文章編號】ISSN.2095.6681.2020.22..02

黃芪是中藥中比較常見的一種藥材，其主要功效是升陽固表、補中益氣，在臨床肝病中的應用較多，但就目前臨床中對黃芪的運用狀況來看，這一藥材在臨床中的應用還不是很完善，在部分病癥的治療中不能較好的發揮其藥效，因此在臨床中的整體應用效果較差。豬血清主要用于細胞培養，在實際臨床中建立豬血清誘導的免疫肝纖維化大鼠模型，采用黃芪灌服，然后觀察其肝功能指標與肝纖維化指標，了解黃芪對肝纖維化大鼠的抑制與作用機制。肝炎病毒是造成肝纖維化的主要原因，選用大鼠模型了解黃芪在臨床中對肝纖維化的治療狀況，能夠更好的了解黃芪對肝纖維化病理機制，研究臨床中黃芪的更多藥性，便于臨床治療中更加精確的進行用藥，以此提升其臨床治療效果[1-2]。大鼠肝纖維化模型在臨床中能夠更好的觀察藥物作用狀況，在臨床多種藥物的研究中均采用大鼠肝纖維化模型，在國際臨床藥物研究中，大鼠肝纖維化模型也受到公認。

1 資料與方法

1.1 一般資料

篩選60只肝纖維化大鼠和20只正常大鼠作為研究對象，20只正常大鼠為正常組，60只肝纖維化大鼠按照雙盲隨機方法分為黃芪組、模型組、秋水仙堿組，各組大鼠健康狀況對比沒有顯著差異，P>0.05，此次研究有意義。

豬血清（生產企業：上海信帆生物科技有限公司;進口貨號：XFA2207-56）;黃芪（生產企業：北京同仁堂;商品編號：2318050），采用清水煎煮，制成濃縮液，進行灌胃用藥;秋水仙堿（生產企業：西雙版納藥業有限責任公司;批準文號：國藥準字H53020871），與蒸餾水相融合，制成10 mg/L的溶液;血清丙氨酸氨基轉氨酶等試劑盒由北京北化康泰臨床試劑有限公司提供。

1.2 方法

將20只正常大鼠與60只肝纖維化大鼠作為研究對象，正常大鼠為正常組，肝纖維化大鼠隨機分為黃芪組、模型組、秋水仙堿組，每組20只，選用不同的籠子進行圈養。

除正常組以外，各組患者均創造無菌模型，黃芪組、模型組和秋水仙堿組進行腹腔無菌豬血清注射，每周2次，每次注射0.3 ml，持續注射12周，正常組與模型組每日將蒸餾水進行灌服，每次10 ml/kg，也進行持續12周治療，黃芪組與秋水仙堿組將相應的藥物進行灌服，黃芪組采用黃芪煎煮湯劑，每日1次，每次2.3 g/kg，連續12周治療，秋水仙堿組每日進行1次用藥，每次0.1 mg/kg[3]。

在持續用藥結束后進行麻醉，制備血清，將其肝臟分為3份，1份用氮液罐冷凍，1份用中性福爾馬林浸泡，最后1份留取足量肝組織進行勻漿制備。

在進行以上用藥的過程中觀察與記錄大鼠的狀況，對其具體的變化狀況進行分析，并對最終的治療結果進行數據檢測，分析黃芪的治療狀況[4]。

1.3 觀察指標

采用生化、放射免疫等方法觀察大鼠的肝功能，主要觀察指標未ALT、AST、ALP，肝纖維化大鼠進行血清HA、LN、CIV、PCⅢ檢測，觀察肝組織TIMP-1、MMP-1表達水平和膠原沉積狀況。

1.4 統計學方法

此次研究數據統計分析用SPSS20.0進行，計數資料以n（%）表示，行x2檢驗;計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗。有統計學意義參考P<0.05。

2 結 果

2.1 血清肝功能

與正常組對比，模型組ALP與ALT水平均較高，P<0.05，AST水平也較高，P<0.05，秋水仙堿組和模型組對比，秋水仙堿組的ALP、AST和ALT均沒有顯著差異，P<0.05，黃芪組與模型組比較，黃芪組的AST和ALT均顯著較高，P<0.05，ALP也顯著升高，P<0.05，數據見表1。

2.2 血清肝纖維化

與正常組比較，模型組的層粘連蛋白、血清透明質酸、Ⅲ型膠原蛋白和Ⅳ型膠原均顯著升高，在臨床中有顯著的差異P<0.05，秋水仙堿組的PCⅢ可顯著較低P<0.05，HA和LN降低，黃芪組的CIV和LN也明顯降低，P<0.05，數據見表2。

3 討 論

肝纖維化是細胞外基質降解與失衡產生的結果，肝臟基質金素蛋白酶能夠降解ECM，對主要成分Ⅰ型與Ⅲ型膠原蛋白降解有關鍵作用，基質金屬蛋白酶抑制因子對MMPs有顯著的抑制作用，在肝纖維化患者中能夠有效的抑制肝纖維化，臨床中相關的理論知識能夠良好的進行治療，但在實際臨床中還未進行相關的實踐，因此對其藥物治療的安全性還不能確定，本文中的大鼠模型試驗，主要用于觀察黃芪對肝纖維化大鼠TIMP-1和MMP-1表達水平的影響，進一步了解抗肝纖維化的作用機制[5]。

此次研究結果顯示：正常組ALT為（43.1±4.1）u/L，模型組為（67.1±13.1）u/L，秋水仙堿組為（70.1±7.9）u/L，黃芪組為（44.6±9.2）u/L;正常組AST為（110.1±36.2）u/L，模型組為（141.7±35.4）u/L，秋水仙堿組為（169.8±42.7）u/L，黃芪組為（96.8±26.5）u/L;正常組ALP為（70.2±26.1）u/L，模型組為（91.2±26.5）u/L，秋水仙堿組為（90.5±21.7）u/L，黃芪組為（71.4±17.6）u/L，與正常組對比，模型組ALP與ALT水平均較高，P<0.05，AST水平也較高，P<0.05，秋水仙堿組和模型組對比，秋水仙堿組的ALP、AST和ALT均沒有顯著差異，P<0.05，黃芪組與模型組比較，黃芪組的AST和ALT均顯著較高，P<0.05，ALP也顯著升高，P<0.05;正常組HA為（96.3±4.2）?g/L，LN為（120.8±7.9）?g/L，CIV為（99.1±17.1）?g/L，PCⅢ為（110.7±10.5）?g/L;模型組HA為（117.3±20.3）?g/L，LN為（139.1±17.2）?g/L，CIV為（130.4±26.3）?g/L，PCⅢ為（127.1±16.8）?g/L;秋水仙堿組HA為（94.8±12.9）?g/L，LN為（104.2±23.8?g/L）?g/L，CIV為（131.2±15.2）?g/L，PCⅢ為（114.5±26.1）?g/L;黃芪組HA為（86.1±15.1）?g/L，LN為136.1±18.1）?g/L，CIV為（101.6±13.6）?g/L，PCⅢ為（149.7±24.5）?g/L。與正常組比較，模型組的層粘連蛋白、血清透明質酸、Ⅲ型膠原蛋白和Ⅳ型膠原均顯著升高，在臨床中有顯著的差異P<0.05，秋水仙堿組的PCⅢ可顯著較低P<0.05，HA和LN降低，黃芪組的CIV和LN也明顯降低，P<0.05，從此次研究中的數據結果看，黃芪在肝纖維化大鼠中能夠良好的減少總膠原及Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ型膠原蛋白的病理性沉淀;黃芪對豬血清誘導的免疫肝纖維化大鼠有良好的機理與作用還未有相關的官方報道，此次研究結果數據可進行說明，但不能完全肯定其臨床病理機制[6]。

綜合來看：黃芪在肝纖維化大鼠模型中，獲取了部分的研究數據，但其臨床說服力比較有限，對具體的藥理機制還需要進行進一步的研究。

參考文獻

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