索拉非尼聯合貝伐單抗對小鼠宮頸癌細胞株U14移植瘤抑制作用的研究

吳林珍 魯建央 孫亞青 胡志英

子宮頸癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，居女性惡性腫瘤死亡的第2位[1]，在我國，更是居女性惡性腫瘤死亡的首位[2-3]。隨著對腫瘤細胞生長的分子調控機制的研究不斷深入，針對惡性腫瘤的分子靶向治療已經成為現代腫瘤學研究的熱點。索拉非尼作為一種多靶點激酶抑制劑，已被用于多種惡性腫瘤的治療；貝伐單抗作為單靶點藥物也已被應用于肺癌等的一線治療方案。本實驗通過建立615小鼠宮頸癌細胞株U14移植瘤動物模型，聯合使用索拉非尼和貝伐單抗后觀察宿主瘤體變化，檢測移植瘤組織中血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和 B 細胞淋巴瘤/白血病-2基因相關X蛋白（B-cell lymphoma-2 associated X，Bax）基因的表達，探討兩藥協同抗腫瘤的作用，旨在為這種新型生物化療模式的臨床應用提供理論依據。

1 材料和方法

1.1 實驗動物和儀器 宮頸癌細胞株U14（中國醫學院科學院）；615小鼠（上海西普爾-必凱實驗動物有限公司）；索拉菲尼片（德國拜耳公司，規格：0.2 g/片，批號：H20110599）；貝伐單抗注射液（上海自羅氏制藥有限公司，規格：100 mg/支，濃度 25 mg/ml，批號：S20100068）；生物安全柜（美國 Thermo公司，1300A2）；均質機（法國Bertin公司）；冷凍高速離心機（美國Thermo公司）；ABI StepOnePlus PCR儀（美國Bio-Rad公司）；超低溫冰箱（美國Thermo公司）；微量核酸測定儀（美國 Thermo公司，nanodrop）；PCR儀（美國 Bio-Rad公司）；制冰機（日本Panasonic公司，SIM-F140AY65-PC）；移液器（德國 Eppendorf公司，Research）；RNA 提取試劑盒（日本TaKaRa公司，AHF1991D）；RT反轉錄試劑盒（日本TaKaRa公司，RR036A）；SYBR Green熒光定量PCR染料（日本TaKaRa公司，AK9301）。本實驗依托浙江中醫藥大學動物實驗中心完成。

1.2 小鼠荷瘤模型的制備

1.2.1 小鼠宮頸癌細胞株U14復蘇 從液氮保存罐中取出裝有宮頸癌細胞株U14的凍存管，立即放入37℃水浴中，快速搖晃，直至凍存液完全融化。……