2018～2019年北碚區禽流感外環境監測結果分析

楊聯偉，張 莉

（重慶市北碚區疾病預防與控制中心，重慶 400700）

人感染高致病性禽流感是由人類感染禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）所引起的人禽共患傳染病，自1997年在香港發現人感染禽流感之后，此病癥引起全世界衛生組織的高度關注。有文獻報道，人感染禽流感主要是由于接觸了感染病毒的禽鳥及其分泌物和排泄物。因此，禽類養殖、交易、宰殺等涉禽職業，以及涉禽環境都被認為是人感染禽流感病毒的危險因素。2017年重慶市部分區縣發現人感染禽流感H7N9病例，按應急工作要求，參照《職業暴露人群血清學和環境高致病性禽流感監測方案》（2011版），2018～2019年對北碚區活禽市場外環境中禽流感病毒及其亞型進行監測，檢測結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本采集

在北碚區城鄉活禽市場采集三類外環境標本（禽糞、籠具擦拭子、案板擦拭子），所有標本操作過程（采集、處理、運輸）嚴格按照《職業暴露人群血清學和環境高致病性禽流感監測方案》（2011版）進行。

1.2 標本檢測

從采集的外環境標本中提取病毒RNA后，以實時熒光定量PCR法同時檢測甲型禽流感病毒核酸及H5、H7、H9亞型，嚴格按試劑盒的操作說明進行體系配置、擴增和結果判定。

1.3 檢測方法及儀器

主要病毒核酸檢測試劑和儀器RNA提取試劑盒由江蘇碩世和廣州達安生物科技股份有限公司生產。主要檢測儀器設備為杭州安杰思AFD4800實時熒光定量PCR儀、低溫高速離心機、旋渦混合器、二級生物安全柜等。

1.4 統計學處理

監測數據錄入Excel 2007進行整理，用SPSS17.0統計軟件進行X2檢驗，α=0.05，以Р＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 活禽場所外環境監測結果

2018～2019年共采集并檢測三類外環境標本480份。檢出甲型通用病毒核酸陽性標本297份，陽性率61.88%。其中H7亞型病毒核酸陽性0份，陽性率為0.00%；H5亞型病毒核酸陽性60份，陽性率為12.50%；H9亞型病毒核酸陽性180份，陽性率為37.50%。

2.2 不同監測場所禽流感病毒檢出率

城區活禽場所禽流感病毒陽性率略高于鄉鎮活禽場所，無顯著差異（X2=0.073，P＞0.05）；城區活禽場所禽流感病毒H5亞型陽性率略高于鄉鎮，無顯著差異（X2=2.13，P＞0.05）；城鄉活禽場所禽流感病毒H7亞型陽性率均為0.00%，無統計學意義；城區活禽場所禽流感病毒H9亞型陽性率略高于鄉鎮，無顯著差異（X2=2.00，P＞0.05）。見表1。

2.3 不同類型標本禽流感病毒核酸檢測結果

從3種不同類型標本中均檢出禽流感病毒H5、H9亞型，檢出率從高至低分別為，案板擦拭子＞禽類籠具＞禽類糞便。三類外環境標本中禽流感病毒FluA檢出率有顯著差異（X2=7.34，P＜0.05）， 有統計學意義；三類外環境標本中AH5檢出率有顯著差異（X2=38.00，P＜0.05），有統計學意義；三類外環境AH9檢出率無顯著差異（X2=1.732，P＞0.05）。見表2。

2.4 不同年份外環境標本中禽流感病毒檢測結果

2018年外環境標本中禽流感病毒FluA、AH5、AH9檢出率均高于2019年，2018～2019年均未檢出AH7。2018～2019年外環境標本中禽流感病毒AH5亞型檢出率無顯著差異（X2=0.615，P＞0.05）；2018～2019年外環境標本中禽流感病毒AH9亞型檢出率無顯著差異（X2=0.12，P＞0.05）。見表3。

3 討論

北碚區從2017年9月起開展了外環境禽流感病毒的監測工作，主要采用實時熒光定量PCR的方法進行禽流感病毒病原學檢測，該方法具有靈敏度高、特異性強、速度快等優點。從2018～2019年北碚區禽流感外環境標本監測結果分析看，A型禽流感病毒檢出率61.88%，表明近年來北碚區活禽場所外環境中禽流感病毒普遍存在，與相關報道基本一致，其H5、H9亞型均檢出，其中H9亞型檢出率最高（37.50%）。

表1 不同場所外環境標本檢測結果

表2 不同類型外環境標本檢測結果

表3 不同年份外環境標本檢測結果

不同監測場所的檢測結果表明，北碚城區及鄉鎮活禽市場中普遍存在致病性禽流感病毒H5、H9亞型，與國內研究符合，活禽交易市場同時存在多種禽流感病毒污染的現象。

不同類型標本的檢測結果表明，北碚區禽流感外環境標本病毒檢出率依次是，案板擦拭子＞禽類籠具＞禽類糞便。表明在禽類的售賣、加工等環節中很容易造成污染，特別是宰殺中所用的案板等更容易受到禽流感病毒的污染。需提醒相關部門加強涉職人員的消毒防護意識，及時清理禽糞、清潔籠具及宰殺用具等，減少外環境中禽流感病毒的存在，降低人感染禽流感的風險。

人感染禽流感病毒的主要傳播途徑是呼吸道傳播。建議：①長期堅持對涉禽場所禽流感監測，增加外環境標本類型，了解掌握本區禽流感病原的變化趨勢，預判潛在感染風險，及時有效采取針對性的防控措施。②改進本區活禽市場衛生條件，切實加強對禽糞、籠具、宰殺用具、污水等清理消毒，增強對活禽場所涉職人員的安全防護意識，做好個人防護。③加大衛生宣教力度，進街道社區做好科學宣傳工作，定期發布疫病防治知識，提高群眾衛生及防護意識，避免接觸活禽，減少受感染機會。