白羽肉雞“支氣管阻塞”的初步診斷

張夢琳，丁芳，段淇凡，陳立保，陳立功，2，常建光，王學靜，劉聚祥，2

（1.河北農業大學動物醫學院， 河北保定071001；2.農業部動物疫病病原生物學華北科學觀測實驗站， 河北保定071001；3.河北省畜牧獸醫研究所， 河北保定071000）

雞“支氣管阻塞”是一種以呼吸困難為特征的多病因呼吸道疾病，病雞常因干酪樣物質阻塞氣管、支氣管而發生機械性窒息死亡， 該病發病快，病程較長，雞群發病率高，治療效果不顯著，死亡率較高，給養雞生產帶來了嚴重的經濟損失。 該病主要發生于秋冬、冬春交替之時，主要通過呼吸道進行傳播， 流行范圍廣。

2019 年12 月， 河北某養殖場21 日齡白羽肉雞發病， 病雞主要表現呼吸道癥狀， 主要病變為支氣管見干酪物阻塞， 進一步結合病原學檢測結果，初步診斷病雞為“支氣管阻塞”，該結果可為該地區白羽肉雞呼吸道病防控提供有益參考。

1 臨床癥狀觀察

2019 年12 月， 河北某養殖場21 日齡白羽肉雞發病， 病初雞群僅表現甩鼻、咳嗽等呼吸道癥狀。 2～3天后雞群癥狀加重，表現為呼嚕、怪叫、伸頸張嘴呼吸等癥狀，少數病雞流淚、面部腫脹，有時可見肉雞突然尖叫， 仰臥死亡。 常規治療效果不佳，隨著肉雞日齡的增加，雞群采食量不增或逐漸下降， 有的病雞縮頸閉眼，或呆立，發病嚴重時，各棟雞舍肉雞的日死淘率為1%以上。

2 病理學檢查

病雞面部腫脹（2/10）、鼻腔見黏液（4/10）。 病雞氣管腔內見黏液（4/10），氣管下端黏膜出血（6/10），支氣管內見質地堅實的黃白色干酪樣物（7/10）； 肺臟局部顏色呈暗紅色（4/10），或有泡沫樣分泌物（3/10）；腺胃黏膜輕微出血（3/10）；小腸黏膜輕度出血 （3/10）， 盲腸扁桃體出血（6/10）；直腸黏膜出血（4/10）；腎臟腫脹、顏色呈暗紅色（4/10）。 部分病雞見氣囊炎（3/10）、心包炎（2/10）和肝周炎（2/10）。

3 病原學檢測

3.1 病毒PCR 檢測

無菌操作采取具有典型病變的肉雞氣管和支氣管等病料， 按常規進行病毒RNA 的提取。 按試劑盒說明書或文獻規定的方法分別進行AIV(H5、H7、H9 亞型) 、新城疫病毒（NDV） 和傳染性支氣管炎病毒（IBV） 的RT-PCR 檢測。 電泳結果顯示， 采集病料呈H9 亞型AIV 陽性 （見 圖1），H5 和H7 亞 型AIV、NDV 和IBV 均未檢出。

3.2 細菌分離與鑒定

無菌操作采取具有典型病變的肉雞氣管和支氣管內容物， 分別接種至十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板、 麥康凱瓊脂平板、 伊紅美藍瓊脂平板和甘露醇氯化鈉瓊脂平板，37℃培養24～48 小時。 挑取生長的典型菌落進行純培養； 純培養后的細菌進行培養特性觀察、革蘭氏染色和形態觀察。

細菌培養結果表明， 甘露醇氯化鈉瓊脂平板無細菌生長， 其余三種平板上均有細菌生長。 十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板上的菌落呈灰白色、表面濕潤、向周圍擴散生長，菌落周圍培養基有綠色水溶性色素， 且該純培養物可使麥康凱的紅色消退。 麥康凱瓊脂平板上初次培養見2 種不同的菌落，第1種為圓形、光滑、濕潤、邊緣整齊、無色中等大小菌落， 純培養后可使麥康凱培養基的紅色消退； 第2 種為表面光滑、邊緣整齊、圓形隆起的紅色菌落。 伊紅美藍瓊脂平板上的菌落具有紫黑色帶金屬光澤。 十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板上純化的菌落和麥康凱瓊脂平板上的第1 種菌落純化后染色鏡檢均為革蘭氏陰性小桿菌，菌體兩端鈍圓，沒有莢膜，不存在芽孢， 單個散在或者成對排列。 麥康凱瓊脂平板上的第2 種菌落和伊紅美藍瓊脂平板上的菌落純培養物鏡檢均為兩端鈍圓的革蘭氏陰性紅色短桿菌。 根據以上結果初步判定分離細菌分別為銅綠假單胞菌和大腸桿菌。

十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板上的純培養物按李玲等報道的方法進行PCR 檢測，電泳結果顯示該細菌呈銅綠假單胞菌陽性（見圖2）。

4 小結與討論

根據臨床癥狀、觀察結果、病理學檢查和病原學檢查結果， 初步判定2019 年冬季河北某養殖場白羽肉雞發生了“支氣管阻塞”。 該雞場患病肉雞病料中檢測到的病原包括H9 亞型AIV、銅綠假單胞菌和大腸桿菌。 該結果與2014 年齊茜和王守榮報道的結果不完全一致： 前者研究發現山東濰坊地區肉雞 “支氣管阻塞” 病例病原為H9 亞型AIV 和大腸桿菌， 后者從山東聊城地區雞氣管阻塞病例鑒定的病原包括H9亞型AIV、NDV、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌。 以上結果均表明肉雞支氣管阻塞疾病是由多種病原體聯合導致， 且混合感染嚴重。 2010 年以來， 關于白羽肉雞發生 “支氣管阻塞”的報道逐漸增多，應該引起從業人員和相關部門的重視。做好生物安全工作是控制本病的關鍵。雞場工作人員應重視環境因素，加強對雞舍環境的監控，做好清潔衛生，提高飼養管理水平，做好防寒通風工作， 改善雞舍內空氣質量，重視舍內空氣濕度，保持舍內各飼養階段濕度正常。保障雞場生物安全，健全并嚴格執行消毒制度。給雞群創造一個良好的生長環境， 減少疫苗免疫、轉群等應激，從而減少呼吸道疾病發生的誘因。接種疫苗時要避免和換料、 擴群同時進行。 同時要加強種雞免疫，使雛雞獲得較高的母源抗體。發病早期控制繼發感染，及時使用藥物預防， 如抗病毒中藥、敏感抗菌藥物、抗支原體藥物和抗應激藥物。發病過程中及時發現取出病死雞并進行無害化處理。